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1、快速微生物鉴定快速微生物鉴定 传统方法与最新技术 中国人民解放军总医院微生物科 沈定霞 主要的快速鉴定试验主要的快速鉴定试验 斑点吲哚试验斑点吲哚试验 斑点氧化酶试验斑点氧化酶试验 PYR试验 芽管试验芽管试验 需氧菌的触酶试验需氧菌的触酶试验 快速斑点快速斑点CAMP试验试验 试管血浆凝固酶试验试管血浆凝固酶试验 胆汁溶解试验胆汁溶解试验 CLSI M35-A2 保护工作人员，正确处理患者，防止病原菌扩 散 不用生化反应，商业设备，过夜培养 20022008 大肠埃希菌 ?初步：G-杆菌，非迁徙生长，在羊血平板（BAP）上 有溶血环,或麦康凯或伊红美兰平板上分解乳糖， 斑点吲哚阳性，氧化酶阴
2、性 ?明确：吡咯烷酮奈酰胺（PYR）试验阴性。如BAP平 板上无溶血环，乳糖阴性，应采用MUG试验，阳性 可鉴定为大肠埃希菌。 ?注意： 1.如来自无菌部位应进一步鉴定以确定不发酵乳糖的大 肠埃希菌 2.99%E.coli O157：H7 MUG阴性 铜绿假单胞菌 ?初步：革兰阴性杆菌，氧化酶阳性， 具有特殊 气味（醇香的葡萄味或玉米饼味） ?明确：菌落有金属光泽或珍珠光泽，产色素，或 呈粘液型菌落，可鉴定为铜绿假单胞菌。 ?注意： 1.如无气味或色素，应在42生长 2.从囊性纤维化病人分离的铜绿假单胞菌形态不典型，有 时与洋葱伯克霍尔德菌菌落相似，应注意区分。 变形杆菌 ?初步：菌落迁徙生长
3、， 吲哚实验：阴性-奇异变形杆菌 阳性-普通变形杆菌 ?确定：氨苄西林敏感,不需其它实验确定为奇异变形杆 菌。 ?注意：对氨苄青霉素耐药、吲哚阴性的变形杆菌要用麦 芽糖和鸟氨酸试验鉴定 菌种麦芽糖鸟氨酸 彭氏变形杆菌+ - 奇异变形杆菌-+ 流感嗜血杆菌 ?初步：革兰阴性小杆菌，在巧克力平板（不是血平 板）上于5%CO2中35培养24h，生长的菌落直径 大于1mm；羊血平板上有卫星现象 ?确认：快速卟啉试验阴性可鉴定为流感嗜血杆菌。 卡他莫拉菌 ?初步：革兰阴性双球菌，氧化酶阳性，巧 克力平板和羊血平板上均生长，BAP上菌 落可移动 ?确认：快速丁酸酯酶试验阳性可鉴定卡他 莫拉菌。 ?注意：其它莫拉菌多数丁酸酯酶阳性，但 为球杆状，而非双球菌。 金黄色葡萄球菌 ?初步：革兰阳性球菌，葡萄串状排列，在血平板 上呈白色、黄色、奶油状不透明菌落，触酶阳 性，玻片凝集（+） ?明确：4h快速试管凝集试验，乳胶凝集试验，或 快速耐热DNA酶试验(+)鉴定金黄色葡萄球菌。 ?注意： 1.若分离自无菌部位，应进行试管法血浆凝固酶试 验 ，采用无菌EDTA兔血浆 2.施氏和路登葡萄球菌可以玻片凝集+（90%: 87.3% 1021 clinical isolates, 967(95%) concordance with Phoenix
