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1、组织胚胎学绪论,组织胚胎学教研室 邓成国,教学目的要求,掌握:石蜡切片技术及HE染基本原理。 熟悉:其它组织学常用研究技术的基本原理及其应用。 了解:组织学研究内容和学习这门课程的目的。,提纲:,一、组织学与胚胎学的研究内容和意义 二、发展简史 三、组织胚胎学研究技术 四、学习方法,组织学(histology)着重研究人体的细微结构及与其机能的关系。 胚胎学(embryology)着重研究人体结构的发育、分化程序和生长变化规律。,组织学与胚胎学的研究内容和意义,组织学是借助于显微镜观察人体微细结构的一门学科。,组织学定义:,1、细胞,研究内容:,2、组织,3、器官,胚胎学是研究人体发生、生长发
2、育及其机理的学科。,胚胎学定义:,生殖细胞形成、受精、植入、胚层形成与分化、胎膜与胎盘、先天性畸形等。,研究内容:,研究内容:,意义:,组织胚胎学是医学教育的重要入门课程之一,它为生理学、生物化学、免疫学、病理学以及临床医学等的学习奠定坚实的基础。,提纲:,一、组织学与胚胎学的研究内容和意义 二、发展简史 三、组织胚胎学研究技术 四、学习方法,人类对有机体结构的认识分几个不同的水平 1、肉眼观察的大体解剖学水平;,发展简史:,2、光镜观察的显微结构水平: 光镜的发明与细胞、组织概念的提出:光学显微镜是16世纪末于荷兰发明。 英国人Hooke命名“细胞”,Bichat提出“组织”,发展简史:,发
3、展简史:,Hooke(英国),细胞学说的提出和组织学的建立 1838-1839年施万Schwann、施莱登Schleiden 提出细胞学说,发展简史:,发展简史:,Schwann(德国),3、电子显微镜观察的超微结构水平。 1932年电镜发明 德国人:卢斯卡(Ruska) 科诺尔(Knoll),发展简史:,发展简史:,Ruska(德国),Knoll(德国),使观察工具的分辩率从光镜的0.2um提高到0.2nm。,发展简史:,提纲:,一、组织学与胚胎学的研究内容和意义 二、发展简史 三、组织胚胎学研究技术 四、学习方法,1、一般光镜技术 光镜观察组织切片是最基本的技术方法,常用的切片 技术是石蜡
4、切片。,组织学研究技术:,过程:,组织学研究技术:,取 材,固 定,切 片,包 埋,脱 水,染 ,封 固,HE染标本,HE染:,苏木精(hematoxylin) 伊红(eosin)染,碱性染料,将嗜碱性物质(本身酸性)染成蓝,细胞核中的DNA、RNA细胞质中的RNA,酸性染料,将嗜酸性物质(本身碱性)染成红,细胞质、膜性结构(线粒体、溶酶体、滑面内质网),涂片法,镀银法,2、一般组织化学 组织化学(histochemistry)方法是通过化学或物理反应原理 显示组织切片或细胞内某种化学成分,进行定位、定量及其与功能相关的研究。,组织学技术:,过碘酸 Schiff反应(periodic acid
5、 Schiff reaction)简称 PAS反应,是确定组织或细胞中有无多糖存在的一种方法。 原理:,多糖,PA,氧化,醛,Schiff 试剂,紫红沉淀,3、免疫组织化学 免疫组织化学(immunohistochemistry) 是利用抗原、抗体特异性结合的原理,检知组织中某种多肽、蛋白质等大分子的分布。,组织学技术:,肽和蛋白质均具有抗原性, 当把人或动物的某种蛋白质作为抗原注入另一种动物, 其体内则会产生针对该抗原的特异性抗体。将抗体从动物血清中提出后, 与标记物相结合, 即成为标记抗体。,用标记抗体与组织切片孵育, 抗体 则与组织中相应抗原特异性结合在 显微镜下通过观察标记物而获知肽
6、或蛋白质的分布部位。常用的标记 物有荧光素, 辣根过氧化物酶、胶 体金。,PAS反应标本,4、电镜技术,组织学技术:,透射电镜 电子密度高: 当电子束投射到密 度大吸附重金属多的结构时, 电 子被散射的多, 因此, 射落到荧 光屏上的电子少而呈暗像, 电镜 照片呈黑或深灰, 称为电子密 度高。反之称为电子密度低。,细胞培养(cell culture),提纲:,一、组织学与胚胎学的研究内容和意义 二、发展简史 三、组织胚胎学研究技术 四、学习方法,1、平面与立体的关系:同一结构由于切面不同而呈现一定形态差异。如血管切面。 2、结构与功能相联系:例如肌细胞形态 3、从静态结构了解动态变化:如胚胎时期生长发育。,组织胚胎学的学习方法:,参考文献:,1、组织学与胚胎学进展何泽涌主编 人民卫生出版社 2、医科院校教学参考书组织学彩谱科学技术文献出版社,