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1、胸腹水脱落细胞学,浙江大学医学院附属第一医院,一、制片,1、取液：轻轻的把送检液体上部倒掉，取下层液体，放入离心管。 2、转速3000/分，2分钟。 3、看沉淀物的量的多少区别对待： （1）量少：快速倒去液体，将试管竖直倒立于卫生纸上，吸干管口的水分，用吸管吸出沉淀物。如果沉淀物太少，可将液体倒去后再加入送检标本，重复离心，反复多次。,（2）量多：用吸管吸掉上清液，然后，用吸管吸取沉淀物上层细胞。 （3）血多的标本处理：吸取上层沉淀物，放入25%酒精内，打匀，再离心沉淀。然后，吸取沉淀物。 4、涂片：吸取沉淀物后，滴在玻片上，可采用二张玻片对拉法，也可用吸管涂拉，最好是采用玻片推拉法(玻片与玻
2、片之间角度为5度左右。 吸取沉淀物涂片的关键：吸取沉淀物内不能带有水分。,5、固定：也是制片的关键。当细胞涂片完成后，应立即放入95%酒精液体内固定，至于固定液：如甲醇、酒精乙醚液等效果无明显差异。细胞的褪变主要原因不是固定液的种类，而是在制片过程中空气的氧化过程-干燥。 固定时间：5分钟即可。 剩下的送检液体不要立即倒去，等阅片完成后，看看需不需要再制片做免疫组化或制成组织块。（可放在冰箱内，也可放在室温状态下24小时以上）,干固定,湿固定,5X 未经处理的胸水,5X 处理后的胸水,细胞团块切片外貌,细胞团块切片,二、良性的细胞,1、红细胞、白细胞、单核细胞、嗜酸性细胞、嗜碱性粒细胞、组织细
3、胞等。 2、间皮细胞： 多角形的扁平细胞，核居中，圆形或椭圆形，核染色质细颗粒状，分布均匀；大小10-15微米左右；细胞散在或成片，成堆。,肿胀变性: 间皮细胞脱落后，由于细胞膜渗透压的改变，细胞质开始发生液化变性，体积增大，细胞内出现液化空泡，细胞核偏位,这时与组织细胞很难鉴别。一般说来，间皮细胞的核较圆，胞浆较厚实，核仁小而染色质均匀，而组织细胞的核椭圆形或肾形。有人根据电镜下的结构认为间皮细胞来源于组织细胞，我认为可能是把组织细胞误认为间皮细胞。,?,干固定的间皮细胞,湿固定的间皮细胞,40X CK pan,40X CK18,40X CK19,40X Calretinin,40X CD6
4、8,EMA 阴性 CEA 阴性 CK14 阴性 AB 阴性 PAS 阴性,固缩变性 在浆膜腔积液中间皮细胞很少发生固缩变性。间皮细胞在退变时所发生的细胞体积缩小、细胞核变小的现象称“固缩变性”。固缩变性一般表现为梭形的间皮细胞，其核固缩是固缩变性的最重要的表现：核形不规则或畸形，核染质致密浓染。有些细胞的核甚至出现核碎裂或核崩解，在胞浆中出现数个核碎片。,间皮增生 正常情况下间皮细胞很少脱落，而在炎症、肿瘤等刺激下，细胞呈增生状态，其数量增多，大小不一致，其中还有细胞核增大，但胞浆丰富，核边整齐。这时会伴有幼稚的间皮细胞出现，有的还呈特殊的排列结构：梅花样、腺腔样、乳头状、栅栏状、菊花团样。但
5、这些细胞团细胞核大小较为一致，出现的同时，周围应该有大量散在的间皮细胞存在。,鉴别增生的间皮细胞和肿瘤细胞，可采取与涂片中的其他良性间皮细胞相对比，如果是间皮细胞增生，增生的间皮与正常间皮之间就有过渡的形态；而某些不明性质的细胞核，如果明显较周围其它间皮细胞核增大和深染，核染色质颗粒较粗糙、并向核膜处集中，核仁明显和核膜增厚并有轻到中度的畸形，那么这些细胞有可能就是异型增生的间皮细胞或者就是肿瘤细胞。,核分裂像 间皮细胞增生中，可见到许多核分裂象，这些核分裂的细胞一般体积较小。而肿瘤细胞核分裂细胞常常较大、量多和不够清晰。但如果涂片中细胞的异型性不足，不能以单一的核分裂象作为诊断恶性的依据。,
6、良性间皮细胞的核分裂像,恶性间皮细胞的核分裂像,在电镜下的间皮细胞具有微绒毛，这些微绒毛即光镜下所见的微突起，表现为间皮细胞胞浆边缘毛糙，在正常、炎症、异型增生情况下可见，但在恶性间皮瘤时则少见。因为间皮细胞间有微绒毛，所以在相连的间皮细胞之间产生裂隙，这也是从光镜下判断间皮细胞的一个方法。,微绒毛性裂隙,肿瘤细胞,1、原发性肿瘤：间皮瘤和恶性间皮瘤 2、转移性癌：腺癌（占80-90%以上）、鳞癌、未分化癌 3、其它转移性恶性肿瘤：恶性淋巴瘤、恶性黑色素瘤、恶性纤维组织细胞瘤、卵巢无性细胞瘤、精原细胞瘤等等。,间皮瘤与间皮肉瘤,间皮瘤：细胞常常排成乳头状、腺样结构，胞核增大，深染。但无恶性特征
7、。从形态学上很难与间皮细胞增生区别，不能单凭细胞形态为依据，必须结合临床病史及检查。 恶性间皮瘤：细胞常常散在排列，细胞拉长，核大、奇形怪状，有双向分化的细胞形态。与腺癌或其它类型肉瘤类似。应辅助电镜、免疫组化或特殊染色鉴别。,间皮细胞肿瘤常为混合性形态变化，有从间皮细胞过渡的形态。而在癌性积液中，我们看不到不典型增生柱状细胞，见到的全是腺癌细胞。其原因为不典型增生的柱状细胞是正在发生癌变过程中的细胞形态，而是腺癌细胞的有丝分裂，因此不可能出现癌前的增生细胞。这也是两者的鉴别点之一。,恶性间皮瘤,增生的间皮细胞,Cal Calretinin 钙视网膜素,免疫组化是鉴别间皮瘤的一个很好的辅助方法
8、,腺 癌,浆膜腔积液中腺癌占肿瘤细胞的比例最高，基本上保持了原发部位腺癌的特性，但其形态由于在积液中的浸泡、繁殖使其发生了改变，与原发部位的不尽相同。腺癌细胞的特点：核大，大小不一，异形，核膜较厚，核仁明显；胞浆内可见大小不等的粘液空泡，常有核偏位。,浆膜腔积液的腺癌细胞形态多样，大小不一，细胞的大小可相差数十倍，有时一个大的癌细胞比数个成团细胞还要大。而小的癌细胞和间皮细胞相似。 浆膜腔积液的腺癌细胞绝大部分是以成团结构出现的，少数病例以散在分布为特征。散在分布的腺癌细胞以低分化腺癌多见。,浆膜腔积液中胸水的原发灶以肺癌，乳腺癌多见； 浆膜腔积液中腹水以卵巢癌，胃癌，肠癌，肝癌，胰腺癌，子宫
9、内膜癌，乳腺癌为主。,腺 癌,腺癌,腺癌,腺癌,腺癌,腺癌,腺癌,腺癌,腺癌,腺癌,鳞癌,积液中鳞癌很少见，仅占2%-3%左右。第一种形态是高分化的鳞癌，胞浆有角化，细胞奇形怪状，细胞核深染，块状，常伴有坏死。第二种形态是癌细胞单个散在，细胞为圆形，胞核居中，深染，胞浆厚实明显。第三种形态癌细胞分化较差，成团或成堆，胞核圆形，核仁明显，核膜较厚，和腺癌很难鉴别。,鳞状细胞癌,鳞状细胞癌,小细胞未分化癌,胸水中发现肺小细胞未分化癌比鳞癌细胞癌多，5%左右。细胞呈葡萄状或相嵌状排列，胞浆极少或裸核样，核形不规则，圆形或椭圆形，核染色质粗颗粒或块状，偶有核仁。与痰中见到的小细胞癌非常相似。而淋巴瘤往
10、往细胞分散，无组织结构。有时也需要免疫组化才能区分。,小细胞未分化癌,小细胞未分化癌,小细胞未分化癌,小细胞未分化癌,可疑癌,可疑癌 10X,可疑癌 40X,可疑癌 40X,免疫组化和特殊染色的应用：,推断原发部位,胸水 腺癌,TTF-1,SPA,判断类型,10X 病例一,病例一： Calretinin,病例一：CK18,病例一：EMA,病例一：AB,病例一：PAS,病例一：细胞切片,病例一：Cal,病例一：CK5/6 间皮与鳞癌阳性,病例一：CK7,病例一：CK18,病例一：CK H,CK10、CK14、阴性 结论：腺癌,病例二 ： 10X,病例二 ：40X,肿瘤细胞分散，无组织结构，核异型
11、明显，有切迹，裂沟，并有多个突起，核弯曲，脑回样核，核仁大而不规则。胞浆较少。,病例二 ：40X,病例二 ：细胞切片,病例二 ：细胞切片 40X,病例二 ：细胞切片 LCA,病例二 ：细胞涂片 CD3,病例二 ：细胞切片 CD3,病例二 ：细胞涂片 CD45RO T细胞淋巴瘤,病例二 ：细胞切片 CD45RO,CK、EMA、Cal 阴性 Syn、CgA 阴性 CD20 、CD79a 阴性 结论：T细胞淋巴瘤,病例三,间皮增生,间皮增生： 40 X,病例三：40 X,病例三： Calretinin,病例三 细胞切片：Mes,病例三：CEA,病例三 细胞切片：CEA,病例三 细胞切片：EMA,病例三 细胞切片：SPA,结论：肺转移性腺癌，肺泡细胞癌可能,浆膜腔积液中细胞成分复杂，细胞类型繁多，加上制片过程中人为的假象，容易导致误诊和漏诊。所以必须要有优质的片子，仔细的观察，合理的应用免疫组化和特殊染色，综合的分析，才能做出正确的诊断。,谢 谢,谢 谢,加入血性沉淀物的量,沉淀物的上层,
