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1、考纲点击 1.微生物的利用：(1)大肠杆菌的培养和分离；(2)分离以尿素为氮源的微生物。2.酶的应用：(1)果汁中的果胶和果胶酶；(2)淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测。3.生物技术在食品加工中的应用：(1)果酒及果醋的制作；(2)泡菜的腌制和亚硝酸盐的测定。4.浅尝现代生物技术：植物的组织培养。,碳源、氮 源、生长因 子,消毒和灭菌,划线分离法,涂布分离法,温度、酸碱度等,吸附,交联,酵母菌,无氧,醋杆菌,有氧,乳酸菌、假丝酵母,紫红色,光电比色,全能性,脱分化和再分化,激素,思维激活 1现有红萝卜和白萝卜，你认为哪一种更适合用作不同食盐浓度和发酵期间对亚硝酸盐含量变化的影响实验的材料？为
2、什么？ 提示：白萝卜。避免细胞中的色素对显色反应产生干扰。 2探究利用苹果匀浆制作果汁的最佳条件的实验时，实验的自变量、因变量分别是什么？并写出果胶被果胶酶水解的反应式。,自查 1大肠杆菌培养和分离实验中，用 培养基扩大培养大肠杆菌、培养后再在 培养基上 进行分离。 2微生物常用的分离方法为 分离法和 法。进行 分离时需先将培养的菌液稀释。 3划线后的培养皿应 ，放到37 恒温箱中培养1224 h后，可看到在划线的末端出现 ，表明菌落已被分离。 4从土壤中分离出能利用尿素的细菌，需以 培养基为对照。,LB液体,LB固体平面,划线,划线,涂布分离,涂布,倒置,不连续的单个菌落,LB全营养,5进行
3、亚硝酸盐定量测定绘制标准曲线时，应以 为横坐标，以 为横坐标绘制。,亚硝酸钠质量,光密度值(OD值),自纠 1相对于涂布分离，划线分离方法简单，且单菌落更易分开。 ( ) 2进行划线分离时接种环只在菌液中蘸菌液一次。 ( ) 3要使果汁澄清，应使用果胶酶，不能使用果胶甲酯酶。 ( ) 4酵母菌、醋杆菌各有不同菌种，但其发酵产生的酒和醋的风味均相同。 ( ) 5亚硝酸盐可与N1萘基乙二胺偶联，形成紫色产物。( ) 6进行植物组织培养时，培养基中生长素和细胞分裂素的摩尔浓度比决定组织生根、生芽。 ( ),7进行菊花组织培养时，盖上封口膜后应置于1825 下培养且需持续光照。 ( ) 答案 1. 2
4、. 3. 4. 5. 6. 7.,必考点一 微生物的利用 1微生物两种分离方法比较,接种环,玻璃刮刀,减少,单个菌体分离,梯度稀释,固体,单菌繁殖,不能,2.分离以尿素为氮源的微生物注意事项 (1)选择培养基：以 为唯一氮源； (2)以 为对照； (3)培养基需 灭菌； (4)通过G6玻璃漏斗过滤尿素溶液使之无菌。 3大肠杆菌及其培养与分离 (1)特性：革兰氏 性、兼性厌氧的肠道杆菌。 (2)用途：是基因工程技术中被广泛采用的工具。 培养：实验中用 培养基扩大培养大肠杆菌。,尿素,LB全营养基,高压蒸汽,阴,LB液体,分离(实验部分),灭菌,倒平板,接种,划线分离,(2)下列对尿素溶液进行灭菌
5、的最适方法是_灭菌。 A高压蒸汽 B紫外灯照射 C70%酒精浸泡 D过滤 (3)步骤X表示_。在无菌条件下操作时，先将菌液稀释，然后将菌液_到培养基平面上。菌液稀释的目的是获得_菌落。 (4)在培养时，需将培养皿倒置并放在_中。若不倒置培养，将导致_。 (5)临床上用14C呼气试验检测人体是否感染Hp，其基本原理是Hp能将14C标记的_分解为NH3和14CO2。,解析 (1)Hp含有脲酶，它可以尿素作为氮源，加入酚红指示剂后，菌落周围可出现红色环带(分解尿素可产生NH3，遇酚红指示剂变红)。(2)对尿素溶液进行灭菌最适方法为通过玻璃漏斗过滤。(3)步骤X为接种，其方法为涂布法接种，稀释菌液的目
6、的在于使细菌分散开，从而获得单菌落。(4)进行培养时，宜将培养皿倒置并放在恒温培养箱中。(5)含脲酶的Hp能将14C标记的尿素分解为NH3和14CO2，若能检测到14CO2，则表明人体感染了Hp。 答案 (1)脲酶 红 (2)D (3)接种 涂布 单 (4)恒温培养箱 无法形成单菌落 (5)尿素,【名师点睛】 区分消毒与灭菌,较为温和,强烈,所有的微生物,培养基,【应用1】 (2013东城区质检)欲从土壤中分离出能分解尿素的细菌，下列实验操作中不正确的是 ( )。 A将土壤用无菌水进行一系列的梯度稀释 B同一浓度的土壤稀释液应至少涂布三个平板 C可将未接种的培养基在相同条件下培养作为对照 D用
7、加入刚果红指示剂的培养基可筛选出分解尿素的细菌 解析 为了获得单个菌落，应将土壤用无菌水进行一系列的梯度稀释，A正确；为了使结果更加准确，同一稀释度下至少要涂布3个平板进行重复实验，然后计算平均值，B正确；加入刚果红的培养基用来筛选纤维素分解菌，D错。 答案 D,必考点二 酶的应用 【典例2】 (2013浙江自选模块)利用紫甘薯制酒可提高其附加值。请回答下列问题。 (1)为提高紫甘薯的利用率，工厂化生产时，可加入果胶酶和淀粉酶，其中果胶酶可来自_等微生物。由于酶在水溶液中不稳定，因此常将酶固定在某种介质上制成_。,(2)果胶酶可将紫甘薯匀浆中的果胶水解成_。 A半乳糖醛酸和葡萄糖 B半乳糖和果
8、糖 C半乳糖醛酸甲酯和果糖 D半乳糖醛酸和半乳糖醛酸甲酯 (3)紫甘薯匀浆流经淀粉酶柱后，取适量流出的液体，经脱色后加入KII2溶液，结果液体呈红色。表明该液体中含有_。 A淀粉 B糊精 C麦芽糖 D葡萄糖,(4)在发酵前，为使酵母菌迅速发生作用，取适量的干酵母，加入温水和_。一段时间后，酵母悬液中会出现气泡，该气泡内的气体主要是_。将酵母液接种到待发酵液后，随发酵的进行，酵母菌在_条件下产生了酒精和二氧化碳。 (5)下图表示发酵液pH对酒精浓度的影响。据图判断，最佳pH值是_。,解析 (1)果胶酶可来自黑曲霉、苹果青霉等真菌；由于酶在水溶液中不稳定，因此常将酶固定于某种介质上制成固定化酶，从
9、而提高酶的利用率。 (2)果胶水解产物为半乳糖醛酸和半乳糖醛酸甲酯。 (3)淀粉的初步水解产物糊精遇KII2溶液呈红色。 (4)为使酵母菌迅速发挥作用，可取适量干酵母加入温水及营养物质蔗糖，酵母菌可将底物分解，其气体产物为CO2(即气泡主要成分)，在转入发酵阶段后，酵母菌可将葡萄糖分解为酒精和CO2。,(5)分析三条曲线变化趋势，我们会发现，在三曲线上升至高点即对应酒精产量最多点为pH4.7时，这表明pH4.7时，发酵最彻底，此时的酸碱度即发酵最适pH。 答案 (1)黑曲霉(或苹果青霉) 固定化酶 (2)D (3)B (4)蔗糖 CO2 无氧 (5)4.7,【归纳提炼】 1完善利用苹果匀浆制作
10、果汁的最佳条件的实验流程,5 g匀浆液,10 mL水,不加热,不加热,95%的乙醇,淀粉溶液,KII2,蓝色,红色,不显色,【应用2】 (2013江苏，6)下列有关固定化酶和固定化细胞的叙述，正确的是 ( )。 A可用包埋法制备固定化酵母细胞 B反应产物对固定化酶的活性没有影响 C葡萄糖异构酶固定前后专一性不同 D固定化细胞可以催化各种反应底物的一系列反应,解析 细胞体积相对较大，宜采用包埋法固定，A正确；若反应产物包含酸或碱性物质，可能会影响酶的活性，B错误；酶的各项特性在固定前后不变，C错误；细胞并不能利用各种化学物质维持其生活，如有些大分子物质细胞就难以利用，D错误。 答案 A,【典例3
11、】 果醋有促进新陈代谢、调节酸碱平衡、消除疲劳及减肥等功效，该饮料深受广大女士的喜爱，市场上常出现供不应求的情况。某果酒厂的果酒滞销，计划将生产的部分果酒“转变”为果醋。研究人员设置了如图所示的装置：,必考点三 生物技术在食品加工中的应用,(1)乙瓶为发酵瓶，你认为甲、丙两个装置瓶中，盛有果酒的是装置瓶_，盛有果醋的是装置瓶_。 (2)在果醋发酵过程中，需要不断向发酵瓶乙中通入无菌空气，原因是_。 (3)在装置瓶乙中，醋化醋杆菌先将乙醇变为_，最后变为醋酸。 (4)制作果酒时，提供碳源的物质主要是_，在如图所示装置中，提供碳源的物质主要是_。,(5)在制作泡菜时，盐水中清水和食盐的质量比为_；
12、盐水要先煮沸腾的目的是_； 盐水煮沸腾后要冷却才可以使用的原因是_ _。 (6)“每天喝一点，健康多一点”，这是“宁夏红”率先提出的消费理念，将积淀了千百年的枸杞药食文化和中国红文化完美结合起来，更增添了品牌的文化魅力和优势。下图为“宁夏红”枸杞果酒生产工艺流程简图，据图回答问题。,选料？粉碎灭菌接种发酵？果酒 流程中？处的内容分别应为_、_。 果酒酿造过程中如果果汁灭菌不合格，含有醋酸杆菌，在酒精发酵旺盛时，醋酸杆菌能否将果汁中的糖发酵为醋酸？_,解析 装置瓶甲中装有果酒，果酒通过导管流入发酵瓶乙中，在乙瓶中进行醋酸发酵。醋化醋杆菌为好氧细菌，在有氧条件下醋化醋杆菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛转
13、变为醋酸，制果酒时，提供碳源的物质主要是葡萄糖，用果酒制果醋时，提供碳源的主要是酒精。(5)制作泡菜时水盐比宜控制在在41，盐水煮沸的目的是杀灭其中的杂菌，盐水需冷却后使用是防止温度过高影响乳酸菌等的生命活动。(6)选料后宜先冲洗，再粉碎，发酵后需过滤得果酒，在酒精发酵旺盛时，厌氧环境不适合醋杆菌发酵，故不能将果汁中的糖发酵为醋酸。,答案 (1)甲、乙 丙 (2)醋化醋杆菌为好氧细菌 (3)乙醛 (4)葡萄糖 乙醇(或酒精) (5)41 为了杀灭杂菌 防止温度过高影响乳酸菌等微生物的生命活动 (6)冲洗 过滤 不能,【归纳提炼】 1果酒、果醋和泡菜的制作,酵母菌,醋化醋杆菌(细菌),乳酸菌,无
14、氧,16%,醋化醋杆菌,有氧,乳酸菌,续表,醋化醋杆菌,pH,2. 亚硝酸盐含量的测定 (1)亚硝酸盐含量测定原理 亚硝酸盐可与 发生重氮化反应，这一产物再与 偶联，形成 产物，可用 法定量。 (2)亚硝酸盐的定量测定步骤 样品处理测定 计算。,对氨基苯磺酸,N1萘基乙二胺,紫红色,光电比色,标准曲线绘制,【应用3】 小李尝试制作果酒，他将葡萄汁放入已灭菌的发酵装置中进行试验(如图)，恰当的做法是 ( )。 加入适量的酵母菌 一直打开阀b通气 一直关紧阀a，偶尔打开阀b几秒钟 把发酵装置放到4 冰箱中进行实验 A B C D,解析 酵母菌在无氧环境中可以利用葡萄糖进行发酵，产生酒精，果酒的制作即应用了此原理，果酒制作过程一般将温度控制在2530 。 答案 A,【应用4】 (2013江苏卷，14)某研究性学习小组以樱桃番茄为材料进行果酒、果醋发酵实验。下列相关叙述正确的是 ( )。 A酵母菌是嗜温菌，所以果酒发酵所需的最适温度较高 B先供氧进行果醋发酵，然后隔绝空气进行
