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1、留取检验标本的要求 以及方法,留取检验标本的要求 （包括了影响检验标本的因素） 附加： 教病人如何正确采集检验标本,临床检验标本采集与处理的重要性,在临床检验的过程当中，标本来源尤其至关重要，所以我们临床科室要把好采集检验标本关，但因种种原因，导致标本不合格。比如：有的尿标本因放置时间过长而长菌，使尿中有形成分和化学成分破坏；有的大便标本因干结而无法检验；细菌培养标本，不经无菌操作留取，造成大量杂菌生长；做血脂检查，不注意控制高脂饮食；做隐血试验前不吃隐血食等，有的抽血选择同一静脉的近心端，甚至使用原来输液的针头，直接把血液放入试管，这些因素都会导致检验结果假阴性或假阳性。,检验标本采集的要求
2、,一、病人准备 二、标本采集 三、标本保存和运送,一、病人准备,1病人状态 一般需在安静状态下采集标本，因运动能影响许多项目的测定结果。活动的影响可分暂时和持续性两类。暂时性影响如使血浆脂肪酸含量减少；丙氨酸、乳酸含量增高。持续性影响，如激烈运动后使CK、LDH、ALT、AST和GLU等的测定值升高，有些恢复较慢，如ALT在停止运动1h后测定，其值仍可偏高 3050。,2饮食 多数试验要求在采血前禁食12h，因为饮食中的不同成分可直接影响实验结果。 (1) 餐后血液中ALT、GLU、BNU、Na等均可升高，但空腹达24h以上，可出现低血糖，血中TG、游离甘油及脂肪酸可增高。 (2) 高脂餐后2
3、4h采血，多数人ALP含量增高，主要来自肠源性同工酶，且与血型有密切关系，O型或B型兼为Le+分泌型者增高更为明显。,(3) 高蛋白质餐使血浆尿素、血氨增加，但不影响肌酐含量。 (4) 高比例不饱脂肪酸食物，可减低胆固醇含量；香蕉、菠萝番茄可使尿液5-羟色胺增加数倍。 (5) 含咖啡因饮料，可使血浆游离脂肪酸增加，并使肾上腺和脑组织释放儿茶酚胺。 (6)食物如含有动物血液，可引起粪隐血假阳性。,(7) 饮酒后使血浆乳酸、尿酸盐、乙醛、乙酸等增加，长期饮酒者高密度脂蛋白胆固醇偏高、平均血细胞体积增加、谷氨酰转肽酶亦较不饮酒的病人为高，甚至可以将这三项作为嗜酒者的筛选检查。 (8)吸烟：瘾大者血液
4、一氧化碳血红蛋白含量可达8，而不吸烟者含量在1以下。此外，儿茶酚胺、血清可的松亦较不吸烟者为高，血液学方面亦有变化，白细胞数增加、嗜酸粒细胞减少、中性粒细胞及单核细胞增多、血红蛋白偏高、平均红细胞体积偏高。吸烟组血浆硫氰酸盐浓度明显高于非吸烟组。,3药物 药物对检验的影响非常复杂，在采样检查之前，以暂停各种药物为宜，如某种药物不可停用，则应了解可能对检验结果产生的影响。 4体位 体位影响血液循环，由于血液和组织间液因体位不同而平衡改变，则细胞成分和大分子物质的改变较为明显，例如由卧位改为站位， 血浆ALB、TP、酶、Ca、胆红素、Tch及TG等浓度增高；Hb、HCT、RBC等亦可增加。由于体位
5、的因素，在确立参考值时，应考虑门诊和住院病人可能存在的结果差异，故采集标本时要注意保持正确的体位和保持体位的一致性。,5时间 病人准备还应考虑病人的生物钟规律，特别是激素水平分析，如女性生殖激素与月经周期密切相关；胆固醇则在经前期最高，排卵时最低；纤维蛋白原在经前期最高，血浆蛋白则在排卵时减少。生长激素于入睡后会出现短时高峰。胆红素、血清铁以清晨最高；血浆蛋白在夜间降低；血Ca往往在中午出现最低值。故采血时间应在相同时间进行。,二、标本采集,标本采集是直接关系检验结果的基本要素，如果标本采集不当，即使最好的仪器设备也难以弥补在采集标本时引入的误差和错误。 现将各种标本的采集要点分述如下：,(一
6、) 血液标本 采血管分普通管、抗凝管和促凝管三类。常用抗凝剂有草酸钾、草酸钠、枸橼酸钠、EDTA-K2或EDTA-Na2、肝素、氟化物等。根据不同的检验项目，选用合适的抗凝剂十分重要。 1选择抗凝剂注意事项： (1) 含有K+、Na+的抗凝剂不能用于测定K+、Na+的标本。 (2) EDTA、氟化物、草酸盐等不能用于测定Ca2+的标本，因为Ca2+可与它们形成不溶性物质。,(3) 草酸盐、氟化物不能用于测定酶和用酶法测定的标本，因为它们有激活或抑制某些酶活性的作用，如草酸盐可抑制AMY、ACP、LDH的活性，氟化物则有激活尿素酶、AMY的作用。 (4) 草酸钾：钙离子螯合剂，常用量为12mg/
7、ml血液。草酸钾虽仍可应用，但使红细胞缩小，水分从红细胞渗入血浆，使血浆成分浓度相应偏低。 (5) 草酸钾氟化钠混合抗凝剂：专供葡萄糖测定用，氟化钠1g，草酸钾3g混合，混合剂4mg抗凝1ml血。,(6) 肝素：是一种粘多糖体，可抑制凝血酶原转化为凝血酶，使纤维蛋白原不能转化为纤维蛋白。以152.5IU抗凝血液1ml。肝素抗凝血不影响红细胞体积，可用于生化及血液学检验标本，但不可用于筛选DIC的3P和TT试验，因肝素与鱼精蛋白作用，发生沉淀，使3P出现假阳性以及肝素的抗凝血酶作用出现产生干扰。 (7) EDTA：与钙离子络合而抗凝，通常血液学常规检验应用其钾盐EDTA-K2或EDTA-K3 。
8、EDTA-Li2 亦可作为抗凝剂，且可用于大多数生化检验。,使用抗凝剂要注意血与抗凝剂的比 如血沉取106mmol/L的枸橼酸钠0.4ml，抽1.6ml血； 凝血机制取0.2ml，抽1.8ml血； 血常规用EDTA抗凝管抽1.5ml血； 血生化用肝素抗凝管抽3ml血等。,2标本采集注意事项： (1) 末梢采血时，务必清洁消毒，待干燥后穿刺，用1次性采血器。婴儿可取自脚后跟两侧处，一般不取手指，采血中不可用力挤压，以免组织液混入血液，使血液易于凝固和稀释，出现误差。 (2) 采静脉血时止血带结扎过久，可引起误差。如以结扎1min的样品结果为基数，则结扎3min，可使血浆总蛋白增加5，胆固醇增加5
9、，铁增加6，胆红素增加8，乳酸则不能使用止血带。 (3) 血清标本应避免溶血，并及时分离血清，如需隔日检验，应封口后冰箱储存。,(4) 采血用针头过细会使血K+升高。 (5) 要特别注意采血不能在输液的同侧进行，更应杜绝在输液管内采血，因输液成分会影响检测结果(使相应的结果偏高，如输K+、Glu时，可使所测K+、Glu明显增高)，或使血液稀释结果偏低。 (6)血气和pH值测定的血液以动脉血为原则，且不可漏气。细胞培养的样品要采用无菌技术，防止污染。,(7) 标本采集后，必须在试管或容器上帖上检验申请单号码、住院病人应有床号、姓名，且应当场核对无误。,(二) 尿液标本 根据采集时间可分为清晨空腹
10、尿、随机尿、计时尿(2h、3h、12h、24h等)、午后尿、餐后尿、症状典型时尿等。 (1) 晨尿为住院病人留尿的主要方法，早晨起床后收集第一次尿，可用尿常规检验。 (2) 随机尿多为门诊就诊病人的留尿检验方法。 (3) 餐后尿为收集进餐后2h尿，主要用于了解葡萄糖代谢情况，用以筛查隐性糖尿病或轻症糖尿病。,(4) 计时尿应于计时开始时排空尿液，然后于规定时间内至截止时间留尿，计时尿多用于肾功能和有形成分排出率的评估，亦用于计算淀粉酶或肌酐的排出率。 (5) 24h尿多用于化学组分的测定，亦用于泌尿道抗酸杆菌的检查。,尿液原则上以不用防腐剂为好，如需12h或24h尿，首选以冷藏为妥，根据不同的
11、检验目的加用合适的防腐剂，例如加40甲醛1滴于尿液30ml中，适用于细胞及管型等有形成分的检查；激素检验常以盐酸10ml作为24h尿的防腐剂或硼酸1g加于尿液100ml，麝香草酚0.1g加于尿100ml供抗酸杆菌浓集检查。,(三) 粪便标本 采集后及时送检，如作原虫阿米巴检查应保持一定的温度，且立即送检，立即检查，如检查蛲虫则不必送检粪样，而应于晨起时排便前用棉拭擦肛门周围，可得虫卵。粪便标本应不污染容器外表，一般以无滤漏容器留取510g即可。,(四) 脑脊液、浆膜腔液、关节液 均由临床医师穿刺采样，检验科应提供专用的各种试管或容器，及时送送检。,(五) 骨髓 采样由临床医师穿刺，抽吸量不得超
12、过0.2ml，涂片送检。,(六) 胃及十二指肠液 一般均在门诊或病房采集后送检，收样时应核对标本。胃液分基础胃酸分泌(ABO)、最大胃酸分泌(MAO)等，十二指肠液分甲、乙、丙、丁管。甲管来自总胆管为橙黄色，乙管来自胆囊为黄绿色，丙管来自胆道为柠檬色，丁管来自十二指肠液为灰黄或淡黄色，细菌培养应从乙管取样接种培养基。,(七)痰液标本 采集晨间第一口痰，多用于细胞学及微生物学检查。采样前应先反复漱口，经深呼吸数次后用力咳痰，不可吐入唾液。微生物培养取样应在抗生素等药物治疗开始之前，如已用药，则应选血液药物浓度最低水平时采样。,(八) 阴道分泌物 由妇产科医师采样后即时送检，如不能及时送检，可在3
13、7加温数分钟后检查，否则影响滴虫动力，易于漏检。,(九) 精液和前列腺液 采集精液应在禁欲35天后进行，且于排精后30min内保温送达检验科，容器以广口玻璃小好，不可贮存于避孕套或塑料瓶内，收到标本后应及时检查。前列腺液由医师作前列腺按摩术取样，收到标本后亦应立即检查。,(十) 其他标本 根据具体检验项目而定，临床医师在开申请单前，应同检验科相关部门联系并询问详细后，注明检查要求，再采样并及时送检。 总之，各种检验标本的采集合适与否，直接关系检验质量，应予以重视。,三、标本保存和运送,标本保存和运送是检验质量保证的重要环节之一。由于采集的标本受各种因素的影响，可能使检验结果受或大或小的误差，因
14、此必须正确掌握标本保存和运送。 (1) 采样后须立即送检的常规项目：血氨、血沉、血气分析、酸性磷酸酶、乳酸以及各种细菌培养，特别是厌氧菌培养 (2) 采样后0.5h内送检的常规项目：血糖、电解质、血液细胞学、体液细胞学、涂片找细菌、霉菌等。,(3) 采样后12 h内送检的常规项目：各种蛋白质类、色素类、激素类、脂类、酶类、抗原、抗体测定等。 (4) 采样后2 h以上才能送检者，则常对标本采取必要的保存手段。对血糖或乳酸可直接分离血清后冷冻保存，或用NaF作稳定剂28密封保存；K+ 必须分离血清后密封28存放；ACP须加稳定剂后分离血清冷冻保存；对其他一般项目，可加盖密封后直接28存放，但血沉和
15、细胞学检查不能采用此方法。,(5) 标本保存1个月：一般对检测物分离后，-20存放。 标本需长期保存(3个月以上者)：对检测物分离后(包括菌种) -70保存，还应避免反复冻融。,怎样留取检验标本,、大便标本的留取 大便常规检查：用竹签或木片采取约蚕豆大一块新鲜粪便，装入专门留取标本的纸盒内，写上姓名，立即送检。如大便有脓血时，应留取脓血部分，水样便要用容器留送，检查寄生虫时要在粪便各部分都留一点。 大便培养检查的标本：用清洁便器接便，然后用无菌棉签在大便上面取脓血部分少许，置入试管内。或用消毒棉签蘸生理盐水后插入肛门57厘米处，轻轻转动带出少许大便，置入试管内送检。这项工作一般由医生、护士做。
16、 查大便隐血：留标本前3天即要禁食肉类、肝、血、大量绿叶及含铁食物，留取的大便标本不能混入尿液，也不能混入其它分泌物、泻剂、钡剂和灌肠液。,、尿标本的留取 尿常规检查：留清晨第一次尿约100毫升于清洁容器内送检，不能污染上大便，女性月经期暂不宜留尿。 留24小时或12小时尿标本：必须在清晨7时排空小便后开始留尿，将规定时间内的尿都留在一个大容器中，直到最后一次尿排完为止，全部送检。为了防止尿液变质，除加入防腐剂外，还应将尿放置在阴凉处。 尿培养需留中段尿：要用肥皂水清洗会阴(龟头)，再用清水洗净，排尿时，前段尿不要，接取中间尿液于试管中送检。,、痰标本的留取 留取痰作常规检查：应在早晨漱口后用力咳出气管深处的痰液，留于清洁容器内送检。 查找癌细胞：可用95%的酒精浸泡送检。 留取24小时痰标本：要将时间范围内的痰集中留于清洁容器内，时间范围一般从早晨7点至晚上7点，不可将唾液、漱口水、鼻涕等混入标本内。,(4)呕吐物的留取 在呕吐时，用
