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1、临床微生物标本的采集与送检,主 要内容,标本采集的意义和原则 标本的运送与拒收原则 血液标本采集 尿标本采集 粪便标本采集 痰标本采集 咽拭子标本采集,临床感染性疾病的诊断和治疗,应用良好的检测技术和方法，提供准确的结果或报告,正确规范的采集和运送标本,正确地选择检查目的和方法,标本采集是指采集患者体内的一小部分血液、体液、排泄物、分泌物以及组织细胞等标本进行检验，以反映机体正常的生理现象和病理改变。,标 本 采 集,标 本 采 集,标本采集正确与否与检验结果的准确性有密切的关系 因此，我们应掌握正确的标本采集方法。,协助明确疾病诊断,推测病程进展,制定治疗措施,观察病情,标本采集的意义,遵照
2、医嘱,充分准备,严格查对,正确采集,及时送检,标本采集的原则,一、按医嘱采集标本,医生填写检验申请单 检验单应标明姓名、性别、住院号、床号、标本种类、检验目的和送检日期等。,二、评估(充分准备、严格查对),采集标本前应先评估患者的病情、 心理反应与合作程度。 根据检验目的选择相应的标本容器 在容器外贴上检验单的副联,二、评估(充分准备、严格查对),向患者解释采集标本的目的方法、 以消除顾虑，取得合作。 采集时认真核对床号、姓名、检 验项目等,三、掌握正确的标本采集方法,为保证标本的质量，获得阳性结果，应掌握正确的标本采集方法、采集量和采集时间并应及时送检，特殊标本还需注明采集时间。,四、及时送
3、检,采集标本后应及时送检，一般情况下，用于细菌培养的标本保存时间不应超过24h，最好2h内能送检，越快越好，以保证结果的准确性。,标本的运送原则,所有的标本都必须立即送往实验室，最好在2h内,保存时间不应超过24h. 最佳的临床标本送检首先取决于所获取标本的量.量少的标本应在采集后15-30min内送检. 对环境敏感的微生物如志贺菌、奈瑟氏菌和流感嗜血杆菌（对低温敏感）应立即处理，禁止冷藏脊髓液和生殖道、眼部、内耳道标本。,标本的拒收原则,无标签 不检测，并与送检的医生和护士联系。 送检延误 不接收，提醒送检者，要求重新采集。 送检容器不当或渗漏 不接收，告知送检者，要求重新采集。,标本的拒收
4、原则,标本不符合要求 不接收，联系送检者，指出不符合要求之处，要求重新采集符合试验要求的标本. 同一天内收到同一检测目的的相同标本（血液标本除外）不检测，与送检者联系并说明标本重复不予处理，并在报告单上注明,标本拒收原则制订的目的,我们必须重视标本的质量，对不规范采集、保存和运送的标本要采取纠正措施。如果检测不合格的标本，那么得出的结果会给医生提供错误的信息，导致误诊和治疗不当。因此，实验室必须制订并严格执行标本接收和拒收准则,临床常见标本,血液（生化、免疫及微生物检验） 尿液 粪便 痰及上呼吸道标本 穿刺液标本（脑脊液、胆汁、胸腹水等） 脓液及创伤感染分泌物标本 生殖道标本 组织标本,血标本
5、检验的意义,血液是临床最常见的检验项目 它可以反映血液系统本身的病变 还可判断病人病情进展程度 为治疗疾病提供参考。,血标本采集方法,（一）静脉血标本（最常用） （二）动脉血标本(血气分析) （三）毛细血管标本（血常规）,静脉血标本分类及目的,全血标本,血清标本,血培养标本,血沉、血常规、 凝血机制检测等,血清酶、脂类、电解质、肝功能,血中的致病菌,静脉血采集操作步骤及要点,携用物至床边，核对床号、姓名、解释 戴手套，选择静脉，常规系止血带、 消毒皮肤，嘱患者握拳 行静脉穿刺、取血、松止血带、 嘱患者松拳、按压针眼、迅速拔针 穿刺点按压23min,血液注入标本瓶内方法,血清标本： 取下针头，将
6、血液顺试管壁缓慢注入干燥试管（最常用）内。,注入血标本的方法,注意事项,（1）严禁在输液、输血的针头处抽取标本，以免影响检验结果。（最好在对侧采集）,注意事项,（2）若同时抽取几个项目的血标本，一般注入容器的顺序为：血培养瓶抗凝瓶干燥试管. 动作要迅速准确，避免溶血。,血标本的微生物学检查,1.采血时间及次数：一般应在抗生素治疗前，发热初期或高峰时抽血。 伤寒患者应在发热1-2周内抽血 化脓性脑膜炎、鼠疫或野兔热患者应在发热1-2d内抽血 急性败血症应在24小时内抽血3次或更多次，并可在不同部位，如左、右手臂或颈部,采血时间及次数,不明原因发热应不定期多次、多部位采样送检。24小时内不超过3次
7、，如培养阴性应继续采样送检 急性心内膜炎应在治疗前1-2小时内分别在3个不同部位抽血，分别进行培养。 亚急性心内膜炎及布鲁菌感染的患者，除在发热采血外，并要多次抽血（24h内3-4次）和增加抽血量（可增至10ml）。,血标本,2.抽血部位及抽血量 以无菌方法从患者肘静脉采血。采血量以培养基的1/51/10为宜，成人一次采血5-10ml，儿童3-5ml，婴儿为1-2ml。血液抽出后，立即以无菌手续注入血培养瓶，充分混合后送检。,骨髓标本的微生物学检查,采集部位：骨髓穿刺法从髂骨采集标本。 采集时间：在用药前、发热初期或高热期 当骨髓炎时或长期使用抗菌药物患者，抽取骨髓培养阳性率远高于血液培养,全
8、自动血培养仪BacT/Alert 120,培养基的选择：,普通需氧培养瓶：采血量4ml,用于未使用抗菌素患者的需氧培养。主要用于小儿。,建 议,不管患者是否使用过抗生素，是做细菌培养还是真菌培养 成人 采血量5ml 小儿 采血量4ml,注意事项,严格做好患者抽血部位的无菌操作。严禁在输液、输血的针头处抽取标本，以免影响检验结果（要在对侧采集）。 注入标本后的血培养瓶务必立即送至临床细菌室，如因某种原因不能立即送检时，应将已接种样本的培养瓶放在室温，切勿放冰箱存放。,注意事项,每次领培养瓶不宜过多，以防过期，未使用的培养瓶亦应室温保存（15-30），切勿放冰箱保存。,二、尿液标本的采集,留取尿液
9、标本作物理、化学、细菌和显微镜等检查以助诊断和观察疗效。,尿液标本,采集时间： 一般原则 通常应采集晨起第一次尿液送检。原则上应选择在抗菌药物应用之前采集尿液。,尿液标本的采集时间,结核分枝杆菌感染 留取晨尿或24小时尿的沉渣部分10-15ml作涂片检查，若为培养，患者应停药1-2天后再采样，以提高阳性率 沙门菌、钩端螺旋体感染 感染后2周左右采集,采集方法,中段尿采集方法 （最常用） 集尿法 结核分枝杆菌检查时，可用一清洁容器，留24小时尿取其沉渣10-15ml送检 导尿法、肾盂尿采集法、膀胱穿刺采集法,中段尿采集方法,女性：成年女性外阴部先以肥皂水清洗，再以无菌水冲洗，然后排尿弃去前段尿，
10、留取中段尿10ml左右于无菌试管内送检 男性：先用肥皂水清洗尿道口，后用清水冲洗，留取中段尿 儿童、婴儿：先以无菌生理盐水清洗外阴部或外生殖器，将无菌试管对准尿道口，待尿排出后送检,注意事项,严格进行无菌操作，因为尿液标本的采集和培养中最大的问题是污染杂菌 通常应取晨起第一次尿液送检 多数药物均通过尿液排泄，因此采集尿液应在用药前进行,三、粪便标本的采集,收集粪便标本，做实验室检查，有助于评估病人排泄功能及准确评估疾病。,粪便标本,采集时间： 1采样原则 腹泻病人应在急性期采集（3天以内），以提高检出率，亦最好在用药之前。 2沙门菌感染 肠热症在2周以后；胃肠炎病人在急性期，早期采集新鲜粪便,
11、采集方法,自然排便采集法 自然排便后，挑取其脓血、粘液部分2-3g，液状粪便取絮状物2-3ml，盛于灭菌容器内或保存液中送检 直肠拭子方法 如不易获得粪便时，或排泄困难的患者及婴儿，可用直肠拭子采取，即以无菌棉拭子用生理盐水湿润后，插入肛门内4-5cm（幼儿2-3cm）轻轻转动取出，插入无菌试管内送检。,注意事项,虽粪便含有多种杂菌，但应尽量采用无菌容器（一次性无菌平皿）。 为提高检出率，要采集新鲜粪便作培养，且应挑取其脓血、 粘液部分。,四、痰及上呼吸道标本的采集,采集痰标本作细菌培养，或涂片后经特殊染色以检查细菌、真菌或抗酸杆菌等，以助诊断；从咽部及扁桃体采取分泌物作细菌培养或病毒分离,痰
12、及上呼吸道标本,采集时间: 痰：一般以晨痰为好；支气管扩张症患者，清晨起床后进行体位引流，可采集大量痰标本。 咽拭标本：时间上虽无严格限制，但应于抗菌药物治疗前为好。咽部又是呼吸和食物的通路，因此亦以晨起后采集为宜,采集方法：,痰液标本： 自然咳痰法：患者清晨起床后，先用朵贝尔氏液（复方硼砂溶液）漱口，再以开水或生理盐水漱口，以减少口腔常居菌群的污染，然后用力自气管深部咳出第一口痰于无菌痰怀内送检,采集方法：,小儿取痰法：用压舌板向后压舌，用棉拭子伸入咽部，小儿经压舌刺激咳嗽时，可喷出肺部或气管分泌物粘在拭子上，送检,采集方法：,上呼吸道标本（咽拭子） 采集上呼吸道标本通常采用无菌棉拭子。采集
13、前患者应用开水或生理盐水反复漱口，由检查者将舌向外拉，使腭垂尽可能向外牵引，将棉拭子通过舌根到咽后壁或腭垂的后侧，涂抹数次，但拭子要避免接触口腔和舌粘膜,注意事项：,1 采集标本以清晨为佳，以减少口腔正常菌群的污染，采集前先用漱口液充分漱口。 2 做结核分枝杆菌和真菌培养的标本若不能及时送检，应放4冰箱保存，以免杂菌生长。（血培养瓶室温） 3 作结核分枝杆菌检查，痰量要多或留取24小时痰液，以提高阳性检出率。,穿刺液标本,脑脊液 采集时间： 怀疑为脑膜炎的病人，应立即采集脑脊液，最好在用药前采集 采集方法：用腰穿方法采集脑脊液3-5ml，一般放入3个无菌试管，每个试管1-2ml.如果用于检测细
14、菌或病毒，应1ml，如果用于检测真菌或抗酸杆菌，应2ml,注意事项：,如果用于检测细菌，收集脑脊液后，最好能在常温下15-30分钟内接种培养皿。脑脊液标本不可置冰箱保存，否则会使病原菌死亡，尤其是脑膜炎奈瑟菌（能产生自溶素迅速自溶）、肺炎链球菌和嗜血杆菌 。,注意事项：,如果只采集了一管脑脊液，应先送细菌室做细菌培养，再做脑脊液生化、常规等检查 腰穿时应严格无菌操作 不需要加入防腐剂 作脑脊液培养时，建议同时作血培养,穿刺液标本,其他穿刺液（胸腹水、心包液、关节液、鞘膜液等） 采集时间：当怀疑感染存在，应尽早采集标本，一般在患者使用抗菌药物之前或停止用药后1-2日采集 采集方法：采用无菌方法用
15、注射器抽取体内可疑感染部位的液体，注入无菌试管立即送检,注意事项：,一般要求常温下15-30分钟内接种培养皿，尤其是脑脊液和心包液；除了做结核杆菌、真菌培养的标本应在4下保存外，做其他项目的应常温保存。 严格无菌穿刺。,注意事项：,为了防止穿刺液的凝固，最好在无菌试管中预先加入灭菌肝素，再注入穿刺液 尽可能采集更多的液体，至少1ml,脓液及创伤感染分泌物标本,采集方法： 开放性脓肿和脓性分泌物 先以无菌盐水冲洗溃疡表面，用2支无菌棉拭子拭取溃疡深处的分泌物后插入无菌试管送检。一支为涂片检查用，另一支作培养用,采集方法：,大面积烧伤的创面分泌物 用无菌棉拭子取多部位创面的脓液或分泌物，置无菌试管
16、内送检 封闭性脓肿 消毒局部皮肤或粘膜表面后，用注射器抽取，将脓液注入无菌试管内送检,注意事项：,由于烧伤的早期创面是无菌的，通过12小时才可出现大量细菌，因此在烧伤后12小时内，勿采集创面的标本，否则不能获得阳性结果 不能立即送检的标本，应放4保存；培养淋球菌、脑膜炎奈瑟菌的标本除外 用药前采集标本，严格无菌采样,细菌培养标本采集注意事项：,采集标本最好能在用药前采样，以提高阳性率 采集标本时必须注意无菌操作，使用密闭的无菌容器，避免污染杂菌 采集标本后应尽快送检，否则病原菌会死亡而影响细菌检查的正确性 采集的标本中不得加防腐剂或消毒剂,报告时间,涂片找细菌、真菌、隐球菌、结核杆菌及白带常规等，一般是当天发报告。(周末除外) 普通细菌、真菌培养，若为阴性2-3天发报告，若为阳性4-5天发报告。,报告时间（特殊情况）,血及骨髓培养，若为阴性7天发报告，阳性视具体情况而定。 结核杆菌培养，阳性一般是4-6周，阴性一般为1.5-2个月。,小
