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1、组织学与胚胎学,组织学绪论 Introduction of Histology 主编：邹仲之,组织学（histology） 研究机体微细结构及其相关功能的科学 研究水平：组织、细胞、亚细胞和分子 （例：心脏）,研究内容,发展简史,学习方法,技术简介,组织学,组织,意义,图1-3,石蜡切片术（paraffin sectioning）：取材、固定、脱水、包埋、切片（5 10 m 厚）、染色 苏木精- 伊红染色法（hematoxylin-eosin staining， HE染色法）：苏木精为碱性染料，使染色质和核糖体着紫蓝色；伊红为酸性染料，使胞质和细胞外基质着红色 嗜酸性（acidophilia)
2、;嗜碱性(basophilia) 特殊染色,光镜技术,电镜技术,组织化学,图像分析,研究内容,发展简史,学习方法,技术简介,图9、10,细胞培养 组织工程,图4-8,透射电镜术（transmission electron microscopy, TEM） 用于观察组织细胞的超微结构 戊二醛、锇酸双重固定树脂包埋超薄切片（50 80nm 厚）电子染色（醋酸铀、柠檬酸铅） 根据电子束在不同结构上被散射程度的差异表现为电子密度高（黑或深灰色）和电子密度低（浅灰色）,光镜技术,电镜技术,组织化学,图像分析,细胞培养 组织工程,研究内容,发展简史,学习方法,技术简介,图11-15,扫描电镜术（scann
3、ing electron microscopy, SEM） 用于观察组织细胞表面结构，具有真实的立体感，无需制备切片,光镜技术,电镜技术,组织化学,图像分析,细胞培养 组织工程,图16,研究内容,发展简史,学习方法,技术简介,组织化学术（histochemistry）为应用化学、物理、生物化学、免疫学或分子生物学的原理和技术，与组织学技术结合而产生，在组织切片显示某种物质的存在和分布状态 分类： 一般组织化学术 免疫组织化学术 原位杂交术,光镜技术,电镜技术,组织化学,图像分析,细胞培养 组织工程,研究内容,发展简史,学习方法,技术简介,一般组织化学术：组织中的某种结构成分与所加试剂发生化学反
4、应、并呈现某种颜色，在显微镜下可观察到 糖类： PAS（过碘酸希夫）反应，显示多糖和糖蛋白，呈紫红色 糖 多醛 品红硫酸复合物 （希夫试剂，无色）,光镜技术,电镜技术,组织化学,图像分析,图17,细胞培养 组织工程,过碘酸,紫红色反应产物,研究内容,发展简史,学习方法,技术简介,免疫组织化学（immunohistochemistry） 根据抗原、抗体特异性结合原理，检测组织切片中的肽和蛋白质 用标记的抗体与组织中的抗原结合，标记物可于显微镜下观察。标记物有荧光素（荧光显微镜观察）、辣根过氧化物酶（光镜或电镜观察）、胶体金（多用于电镜观察）,图18-21,光镜技术,电镜技术,组织化学,图像分析,
5、细胞培养 组织工程,研究内容,发展简史,学习方法,技术简介,原位杂交术（in situ hybridization） 即核酸分子杂交组织化学术，检测基因（DNA片段）的有无、基因的表达活性（mRNA） 原理：用带标记物的已知碱基顺序的核酸探针与细胞内待测核酸按碱基配对原则进行特异性原位结合（杂交），并通过对标记物的显示而获知待测核酸的有无及相对量 常用标记物有放射性核素和地高辛,图22,光镜技术,电镜技术,组织化学,图像分析,细胞培养 组织工程,研究内容,发展简史,学习方法,技术简介,图像分析术（image analysis）又称形态计量术（morphometry）：应用数学和统计学原理对组织
6、切片提供的平面图像进行分析，从而获得立体的组织细胞内有形成分的数量、体积、表面积等参数，从量的角度显示结构与功能的关系 体视学（stereology）：根据连续的组织切片应用计算机进行三维重建，以获得微细结构的立体模型,光镜技术,电镜技术,组织化学,图像分析,细胞培养 组织工程,图23,研究内容,发展简史,学习方法,技术简介,细胞培养术（cell culture） 把从机体取得的细胞在体外模拟体内的条件下进行培养；培养组织块或器官则称组织培养术或器官培养术 用于研究细胞、组织的代谢、增殖、分化、形态和功能变化，各种理化因子对活细胞的影响 培养条件：营养、生长因子、pH值、渗透压、O2和CO2浓
7、度、温度，控制污染 用相差显微镜观察,光镜技术,电镜技术,组织化学,细胞培养 组织工程,图像分析,图24、25,研究内容,发展简史,学习方法,技术简介,组织工程（tissue engineering） 用细胞培养术在体外模拟构建机体组织或器官的技术 正在构建的有皮肤、软骨、骨、肌腱、骨骼肌、血管、角膜等；其中以组织工程皮肤较为成功，已成为商品用于治疗烧伤、皮肤静脉性溃疡等疾病,光镜技术,电镜技术,组织化学,细胞培养 组织工程,图像分析,研究内容,发展简史,学习方法,技术简介,研究包括四个方面： 种子细胞，即增殖旺盛的细胞，多为干细胞 细胞外基质，可用生物材料（如牛胶原）和人工合成高分子材料 构
8、建组织或器官，即把细胞置于细胞外基质中进行三维培养、并形成所需要的形状 将构建物移植机体的方法,图26,光镜技术,电镜技术,组织化学,细胞培养 组织工程,图像分析,研究内容,发展简史,学习方法,技术简介,组织学、组织、嗜酸性、嗜碱性的概念 组织学学习方法要点 石蜡切片术和超薄切片术的基本原理 HE染色法,本章重点,图2 心脏 （心肌细胞光镜图）,图5 切片,图6 （左）在水浴槽的温水展开切片，捞于载玻片上；（下）在干燥器上烘干切片,图7 HE染色 （左上）苏木精（左下）伊红 （下）染好的切片脱水后加盖玻片,图9 镀银染色，小脑皮质神经元,图18 免疫组织化学原理模式图,图19 免疫组织化学（荧光素标记） 毛细血管内皮细胞呈vWF阳性,图20 免疫组织化学（辣根过氧化物酶标记） 胰岛B细胞呈胰岛素阳性,图24 体外培养的HeLa细胞相差显微镜图,
