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1、实验七: 细菌的分布 实验八:外界因素对细菌的影响 湖师院医学院,目的要求,1、了解细菌在自然界和正常人体的分布。 2、理解消毒、灭菌及无菌操作的重要意义。 3、掌握外界因素对微生物的不利影响。,基本概念,1、消毒：用物理或化学方法杀死物体上病原微生物的方法。如注射前用2%的碘酒在局部皮肤涂擦；用75%的酒精棉球擦拭体温表等。用于消毒的化学药物称为消毒剂。 2、灭菌：用物理或化学方法清除或杀灭物体上所有微生物（包括病原微生物、非病原微生物、繁殖体和细菌的芽胞）的方法。 3、无菌操作：防止微生物进入机体或物体的操作方法，称无菌操作或无菌技术。如外科手术，细菌接种等。,实验材料,菌种：白色葡萄球菌
2、、大肠杆菌、枯草杆菌； 培养基：普通平板、液体培养管 试剂：2%碘酒棉球、75%酒精棉球、药敏纸片、无菌生理盐水 器材：接种环、酒精灯、镊子等,实验内容与方法,一、细菌分布 （一）细菌在自然界的分布 （二）细菌在正常人体的分布 二、外界因素对细菌的不利影响 （一）湿热对细菌的杀灭作用 （二）紫外线对细菌的杀灭作用 （三）消毒剂对细菌的杀灭作用 （四）抗生素对细菌的杀灭作用,一、细菌的分布,1、空气中的细菌检查（1块平板） 2、水（自来水）中细菌的检查（1块平板） 3、周围环境中细菌检查（1块平板） 自由发挥（如笔、硬币） 4、皮肤（手）上细菌的检查（结合化学消毒剂试验）（3块平板） 5、咽喉中
3、细菌的检查（1块平板）,二、外界因素对细菌的影响,（一）湿热对细菌的杀灭作用 （二）紫外线对细菌的杀灭作用 （三）消毒剂对细菌的杀灭作用 （四）抗生素对细菌的杀灭作用,（一）温度对细菌的影响,热力杀菌的原理：是通过加热脱水干燥和大分子变性。可使菌体蛋白质变性或凝固，酶失去活性，新陈代谢发生障碍，细菌因而死亡。,实验方法,检测对象：大肠杆菌（或白葡菌）、枯草杆菌; 步骤：分别取上述两种细菌，设置对照组后，分别沸水浴510min， 37培养24h，观察结果。,目的要求： 认识高温（煮沸法）对细菌繁殖体和芽胞的作用,材料： 1、菌种：枯草杆菌（有芽胞） 大肠杆菌 （无芽胞） 2、肉汤培养基、水浴锅,
4、37 24h,枯草杆菌,枯草杆菌,大肠杆菌,大肠杆菌,100 5min,100 5min,菌膜,澄清,浑浊,普通条件培养下细菌生长状况,枯草杆菌,大肠杆菌,煮沸杀菌后细菌生长状况,枯草杆菌,大肠杆菌,（二）紫外线对细菌的影响,原理：紫外线可以诱发细菌DNA形成胸腺嘧啶二聚体，使细菌死亡。 取有芽胞细菌（枯草杆菌）、无芽胞细菌，设置对照后，以紫外线照射30min， 37培养24h，观察结果。,班级、姓名/学号、大肠 枯草,uv30,培养箱,紫外线杀菌的结果,（三）消毒剂对细菌的影响,化学消毒剂杀菌的原理：使微生物蛋白质凝固与变性，致使细菌代谢发生障碍而死亡；干扰微生物酶系统和影响其代谢；损伤细胞
5、膜：醇类、酚类、表面活性剂等损伤细菌细胞膜，引起细胞膜的渗透性改变，导致细菌死亡。 消毒剂：2%碘酒棉球，75%酒精棉球 方法：以碘酒（酒精棉球）消毒手指前后，分别涂抹平板培养基， 37培养24h后，观察结果。,（四）抗生素对细菌的影响 （药敏试验 ）,原理 影响细胞壁的合成：-内酰胺类抗生素，如青霉素类； 影响蛋白质的合成：氨基糖苷类、四环素类、大环内酯类； 影响细胞膜的功能：多黏菌素、两性霉素B； 影响核酸代谢的药物：喹诺酮类、利福霉素类、磺胺类；,方 法,平板培养基上徒均匀涂布细菌后，以沾有庆大霉素、头孢曲松、青霉素、环丙沙星的四张纸片贴在培养基表面 37，培养24h后，观察结果。记录抑菌圈大小。,红,链,药敏试验,葡萄球菌,大肠杆菌,本次实验所用平板培养基,1、空气中的细菌检查（1块平板） 2、水（自来水）中细菌的检查（1块平板） 3、周围环境中细菌检查（1块平板） 自由发挥（如笔、硬币） 4、皮肤（手）上细菌的检查（结合化学消毒剂试验）（3块平板） 5、咽喉中细菌的检查（1块平板） 6、UV杀菌实验（1块） 7、药敏实验（ 2块平板）,
