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1、,第二十章 自身抗体检测及应用,,抗核抗体（antinuclear antibody，ANA）是一组将自身真核细胞的各种细胞核成分作为靶抗原的自身抗体的总称。,抗核抗体,,（一）检测方法 间接免疫荧光法又称为荧光抗体法或荧光染色法：目前最常用间接免疫荧光法（indirect immunofluorescence，IIF）作为总的ANA筛选试验。,（二）常见的ANA荧光图形及临床意义 均质性 斑点型 核膜型 核仁型 （三）抗双链DNA抗体的检测方法,,第二十一章 MHC与HLA检测及应用,,第二节 HLA分型,HLA的多态性最初是通过使用一系列特异性抗体来确定的，由于不同型别的HLA各具特点，其
2、分型的方法不尽相同，除以相应的抗体为必要条件的经典血清学分型法外，还包括细胞学分型法。有鉴于此，HLA分型技术的应用愈加广泛，包括器官和骨髓移植前供受体间组织相容性配型、探索HLA与某些疾病的相关性、法医鉴定、亲子鉴定、成分输血时HLA抗体导致的输血副作用研究、以及遗传学研究等。,,血清学分型法，是应用一系列已知抗HLA的特异性标准分型血清与待测淋巴细胞混合，借助补体的生物学作用介导细胞裂解的细胞毒试验。,血清学分型法,,（一）原理 在含有各种已知抗HLA标准血清的微孔板（定型血清板）中加入外周血淋巴细胞，则淋巴细胞与相应的HLA抗体结合，继而在免补体的作用下细胞被溶解。溶解的细胞即为具有与此
3、抗体特异抗原的细胞，可被加入的台盼蓝或伊红染料着染，亦即阳性反应；而活的细胞则不着色，为阴性反应（图213）。 因为板中的各抗血清特异性是已知的，可由此推断所加入的淋巴细胞所表达的HLA型别。这种通过染色来判断细胞死活的方法；称作染料拒染淋巴细胞毒性试验。,,（二）技术要点 1、CDC试验的关键在于获得各种HLA标准抗血清。 2、定型血清板内的抗血清种类应覆盖本民族、本地区80以上的抗原，其中每一高频抗原相应的抗体应为3分以上，低频抗原的抗体为2分以上。定型血清板需经几个实验室认可。 3、HLA-A、-B、-C等I类抗原存在于所有有核细胞表面，因而CDC试验可以方便地进行分型，而 HLA-DR、DQ等类抗原，仅分布于 B细胞或巨噬细胞表面，故其检测往往采集较多的血标本，以弥补外周血中B细胞含量较少之不足。,,4、注意假象 5、HLA抗血清的筛选及鉴定 由于 I类和类抗原分布的差异，用于筛选或鉴定相应抗体的细胞不同。 6、HLA单克隆抗体的制备与应用 用经克隆的HLA等位基因转染小鼠淋巴细胞，以获得专一表达某一HLA的转染细胞此细胞可用于研制和筛选相应的HLA单克隆抗体，尤其是类HLA的单克隆抗体。,,（三）临床应用 1、HLA配型 2、HLA交叉配型 3、群体反应性抗体的检测,
