细菌学各论 (2)课件

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1、,第二篇 细菌学各论,动物医学学院 冯新,了解各种细菌的形态、培养特性、致病因子及微生物学诊断。,第七章 革兰氏阳性球菌,第一节 葡萄球菌属 第二节 链球菌属 第三节 肠球菌属,淋球菌、脑膜炎球菌,阳性,阴性,第一节 葡萄球菌属（Staphylococcus）,广泛存在于自然界，多数是不致病的腐物寄生菌。 致病性葡萄球菌可引起化脓性炎症、败血症、食物中毒等。,第一节 葡萄球菌属（Staphylococcus）,球形，排列成葡萄串状。 用青霉素可诱导成L型。 无芽孢，无鞭毛，有的形成荚膜或黏液层。 革兰氏阳性。 需氧或兼性厌氧，无运动力。,一般特征, 过去按产生的色素分为3种：金黄色葡萄球菌、白

2、色葡萄球菌、柠檬色葡萄球菌。 1974年分为3种 ：金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、腐生葡萄球菌。 伯吉氏系统细菌学手册1986年将葡萄球菌属分为20多种 。,二、分类,常见的致病菌多为金黄色葡萄球菌。,金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）,1. 培养及生化特性 在普通琼脂平板形成湿润、光滑、隆起的圆形菌落。菌落颜色依菌株而异，初呈灰白色，继而为金黄色。 在血液琼脂平板形成的菌落较大，产溶血素的菌株多为病原菌，在菌落周围呈现明显的溶血。 产生金黄色色素。 高度耐盐。 分解葡、乳、麦、蔗糖， 产酸不产气，致病菌株能分解甘露醇。,第一节 葡萄球菌属（Staphylococcu

3、s）,金黄色葡萄球菌普通 培养基上菌落形态,金黄色葡萄球的溶血,高盐培养基,2. 抗原及变异 葡萄球菌细胞壁上的抗原构造比较复杂，含有多糖及蛋白质两类抗原。 多糖抗原 荚膜多糖，具有型特异性。 蛋白抗原 人源菌株都含有葡萄球菌蛋白A(SPA)，来自动物源菌株则少见。 SPA能与多种动物的免疫球蛋白的Fc端结合，结合后的IgG仍能与相应抗原特异性反应。 SPA与IgG结合形成的复合物在机体内具有生物学作用（趋化性、抵抗吞噬、损伤血小板等）。 用于免疫学及诊断技术（协同凝集试验）。,3.抵抗力及药物敏感性 在无芽孢菌中，葡萄球菌的抵抗力较强。 在干燥的脓汁或血液中可存活2-3个月，80 30min

4、 才能杀死。 对磺胺类、青霉素、金霉素、红霉素、新霉素等抗生素敏感，但易产生耐药性。,4.致病性及毒力因子 金色葡萄球菌可产生多种毒素和酶，故致病性强。 化脓性疾病（创伤感染、脓肿、乳腺炎、败血症、脓毒败血症等） 毒素性疾病（被葡萄球菌污染的食物或饲料可引起人或动物的食物中毒性疾病） 。,毒力因子： 毒素 溶血素，与牛羊的坏疽性乳腺炎有关，它还导致白细胞等崩解。毒素是不耐热的蛋白质，对多种哺乳动物红细胞有溶血作用，而从动物分离的菌株常见溶血素。 肠毒素 引致人类食物中毒， 表现呕吐、腹泻。耐热抗酸， 能经受10030min或 胃蛋白酶的水解。,凝固酶 能使含有抗凝剂的人或兔血浆发生凝集的酶类物

5、质。 （1）游离凝固酶:使液态纤维蛋白原变成固态纤维蛋白。 （2）结合凝固酶:使纤维蛋白原与菌体交联而致细菌凝聚。 作用：有助于致病菌株抵抗吞噬细胞和杀菌物质。 检测葡萄球菌的凝固酶是鉴别菌株的重要指标，致病株多数为凝固酶阳性。,耐热核酸酶 100作用15min不失去活性，由致病株产生。 此酶能迅速分解核酸，利于病菌扩散。 目前将该酶的检测作为鉴定致病菌株的重要指标值之一。 此外，还可产生溶纤维蛋白酶、透明质酸酶，又称为扩散因子。,金黄色葡萄球的耐热核酸酶试验,5. 微生物学诊断 （1）涂片染色镜检 取脓汁、渗出液、乳汁、血液，中毒症取剩余食物等。将病料涂片染色镜检。 （2）分离培养鉴定 将病

6、料划线接种于5绵羊或兔血液琼脂平板，37 培养18-24h，菌落金黄色，周围呈溶血圈者多为致病菌株。进一步鉴定还要做凝固酶试验、分解甘露醇试验，阳性者多为致病菌。必要时可做动物试验。,第二节 链球菌属 (Streptococcus),链球菌种类多、分布广。有些可致人或动物的各种化脓性疾病、肺炎、乳腺炎、败血症等。 一、分类 按溶血性分为、 3类。 型溶血链球菌 在菌落周围形成不透明的草绿色溶血环，红细胞未完全溶解，血红蛋白变成绿色。此菌致病力不强，多为机会致病菌。 型溶血链球菌 菌落周围形成完全透明的溶血环，红细胞完全溶解。这类菌致病力强，常引起人及动物各种疾病。 型溶血链球菌 菌落周围无溶血

7、现象。一般为非致病菌。,二、形态与染色 链球菌呈圆形或卵圆形，常排列成链状或成双。肉汤内生长的链球菌常呈长链排列，革兰氏阳性，多有荚膜。,三、培养及生化特性 多为兼性厌氧菌。 致病菌营养要求较高，普通培养基中生长不良，需添加血液、血清、葡萄糖等。 在血液琼脂平板上长成直径0.1-1.0mm，灰白色，表面光滑，边缘整齐的小菌落。 多数致病菌株有溶血性。,化脓性链球菌普通培养基上菌落形态,四、致病性 致病性链球菌可产生多种毒素或酶，可致人及多种动物的很多疾病，化脓感染、肺炎、乳房炎等。 溶血素 分为对氧敏感溶血素O(SLO)和对氧稳定溶血素S(SLS)两种，称溶血性。 致热外毒素 旧名红疹毒素，主

8、要由A群链球菌产生，致人猩红热，小剂量皮内注射家兔可引起局部红疹，大剂量注射可致全身红疹。 其他 不同致病菌株，可产生链激酶（溶纤维蛋白酶），透明质酸酶等，其性质作用类葡萄球菌 。 细胞壁脂磷壁酸(LFA)与菌体吸附于宿主黏膜有关。其荚膜成分、M蛋白等具有抗吞噬作用。,五、抵抗力 本属细菌的抵抗力不强。对青霉素、磺胺类药物敏感，易产生耐药性。 六、免疫性 链球菌的抗原结构比较复杂，机体感染后有多种抗体产生，已知抗M蛋白的抗体具有保护作用，M蛋白有多种抗原型，各型间缺乏有效的交叉保护。我国研制的猪、羊链球菌疫苗有较好的免疫效果。,七、微生物学诊断 病料（脓汁、乳汁、血液、组织）涂片染色镜检，见革

9、兰氏阳性、具荚膜、成对或链状排列的球菌，可作初步诊断。 确诊需用血液琼脂平板分离培养，观察菌落、溶血等特征，并进行生理生化试验。用群、型特异性血清作血清学试验，对病原菌定群或定型。,兰氏（Lancefield）用温热的稀盐酸浸出C抗原，与特异性血清作沉淀反应，将链球菌分为20个血清群（A-V，缺I和J）。同群链球菌间，因表面蛋白质抗原不同，又分不同型。,兰氏分群法,乳胶凝集试验,八、主要致病菌,猪链球菌 是猪链球菌病的重要致病菌，并可感染人而致死。 (一)病原 1. 链球菌共有20个群(从A-V)，数百个血清型，主要感染人类的是A.B群和肺炎链球菌；主要感染猪的有D.L.R.S.T.U.V群

10、2. 猪溶血性链球菌2型(Swine streptoo_cosis) 3. 链球菌为G+球菌成对、短链状排列,(二)传播途径 1.主要经过破损皮肤传播: 屠宰、加工、饲养、贩运感染/病/死猪过程中,通过破损皮肤接触,感染猪2型链球菌。 2.消化道辅助: 食入没有煮烂熟透的病死猪肉感染。,(三)临床表现 1.普通型表现:急起高热、畏寒、头痛、头昏、腹痛、 腹泻、乏力、不适。 2.可致猪脑膜炎、关节炎、心内膜炎、多发性浆膜炎、流产和局部脓肿。,第八章 肠杆菌科,第一节 埃希菌属 第二节 沙门菌属 第三节 耶尔森菌属 第四节 其他肠道杆菌属 (克雷伯菌属、变形杆菌属、爱德华菌属),本科共同特性为：革

11、兰氏阴性、无芽孢的兼性厌氧菌。共28属、110种。多为正常肠道菌群成员。沙门氏菌属、埃希菌属和耶尔森菌属的部分成员对人和动物有广泛的致病性，在公共卫生和兽医临床有重要意义。,第一节 埃希菌属 (Escherichia),本属现有8个种，其中最重要的种是大肠埃希菌(E.coli)，俗称大肠杆菌，下分血清型。本菌系人和温血动物肠道内正常菌群成员之一。大肠杆菌常被用作粪便直接或间接污染的检测指标。本菌还是分子生物学和基因工程中重要的实验材料和研究对象。,一、形态染色特性 大肠杆菌为革兰氏阴性无芽孢的杆菌，两端钝圆、散在，周生鞭毛可运动，多有菌毛。,E. coli 伊红美蓝琼脂上呈金属绿色,E. co

12、li 麦康基琼脂上呈粉红色菌落,二、培养及生化特性 本菌为兼性厌氧菌，在普通培养基上生长良好，形成圆形凸起、光滑、湿润、半透明、灰白色菌落； 本菌大多可以发酵乳糖产酸产气，麦康凯琼脂上形成红色菌落；在伊红美蓝琼脂上产生黑色带金属闪光的菌落；一些致病性菌株在绵羊血平板上呈溶血。,二、培养及生化特性 致病菌株在绵羊血平板上呈型溶血； 生化特性：糖发酵试验（发酵乳糖）和IMViC（+-）试验。 H2S阴性。,三糖铁培养基,I(吲哚)、M（MR）、Vi （VP)、 C（枸橼酸盐利用试验）,三、抗原及血清型,四、致病性 条件性大肠杆菌、病原性大肠杆菌。 与动物疾病有关的病原性大肠杆菌可分为五类： 产肠毒

13、素大肠杆菌(ETEC) 肠出血性大肠杆菌(EHEC) 肠致病性大肠杆菌(EPEC) 肠侵袭性大肠杆菌(EIEC) 肠聚集型大肠杆菌(EAEC),五、微生物学诊断 分离与鉴定程序可参见图8-1。 (PAGE 106) 1. 采病料分离培养 败血症病例采集内脏组织（肝脾肾等），对幼畜腹泻及猪水肿病病例应取其各段小肠内容物或黏膜刮取物以及相应肠段的肠系膜淋巴结，分别在麦康凯平板和血平板上划线分离培养。 2. 可疑菌落生化鉴定 挑取麦康凯平板上的红色菌落或血平板上呈溶血(仔猪黄痢与水肿病菌株)的典型菌落几个，分别转种三糖铁（TSI）培养基和普通琼脂斜面做初步生化鉴定和纯培养。,3. 纯培养物抗原鉴定

14、将TSI琼脂反应模式符合埃希氏菌属的生长物或其相应的普通斜面纯培养物做O、K抗原鉴定。 4. 检测毒力因子 确定其属于何类致病性大肠杆菌。 六、防治 目前已有菌苗，包括抗粘附素的含单价或多价菌毛抗原的灭活全菌苗或亚单位苗；抗肠毒素的类毒素苗；表达一种或两种粘附素以及同时表达粘附素和肠毒素的基因工程菌苗等。用这些菌苗免疫怀孕母畜后，均能使其后代从初乳中获得抗体而被动保护。,第二节 沙门氏菌属(Salmonella),一、主要特征,沙门氏菌属是一群革兰氏阴性无芽孢杆菌，通常都以周生鞭毛运动。在三糖铁琼脂上常产生H2S，大多沙门氏菌不发酵乳糖。 绝大多数沙门氏菌对人和动物有致病性，能引起人和动物的多

15、种不同临床表现的沙门氏菌病，并为人类食物中毒的主要病原之一，在医学、兽医和公共卫生上均十分重要。 沙门氏菌血清型复杂，有2 500种以上。,一、形态及染色特性 形态染色特性与同科其他菌属相似，呈杆状，0.7-1.5umX2.0-5.0um，革兰氏阴性。除雏沙门氏菌和鸡沙门氏菌无鞭毛不运动外，其余均有周生鞭毛可运动，大多数有菌毛。,二、培养及生化特性 本属大多数细菌的培养特性与埃希氏菌属相似。沙门氏菌在肉汤琼脂上生长贫瘠，形成较小的菌落。在肠道菌鉴别或选择性培养基上，大多数菌株因不发酵乳糖而形成无色菌落。,Salmonella on S.S. Agar,Salmonella on麦康基琼脂上为无

16、色菌落,三、抗原及变异,四、致病性类型 根据对宿主嗜性不同，可将沙门氏菌分成三群。 第一群具有高度专嗜性沙门氏菌，它们只对人或某种动物产生特定的疾病。例如鸡白痢和鸡伤寒沙门氏菌仅使鸡和火鸡发病，马流产、牛流产和羊流产等沙门氏菌；猪伤寒沙门氏菌仅侵害猪。 第二群是在一定程度适应于特定动物的偏嗜性沙门氏菌，如猪霍乱和都柏林沙门氏菌，分别是猪和牛羊的致病菌。 第三群是泛嗜性沙门氏菌，它们有广泛宿主谱，能引起人和各种动物的沙门氏菌病，具有重要的公共卫生意义。如鼠伤寒和肠炎沙门氏菌等。,六、毒力因子 沙门氏菌毒力因子有多种，主要有脂多糖(LPS) 、肠毒素、细胞毒素及毒力基因。 七、免疫性 体液抗体与细胞免疫在抗沙门氏菌感染中都很重要。 认为细胞免疫在抗沙门氏菌感染中具有重要作用。 八、微生物学诊断 未污染病料 直接接种普通琼脂、血琼脂或鉴别培养基平板分离细菌； 污染材料 如饮水、粪便、饲料、肠内容物和已败坏组织等，常需要增菌培养基增菌后再行分离。,九、防制 目前的疫苗多限于预防各