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1、1996年7月5日,世界上第一只体细胞克隆动物-克隆羊多利诞生于英国.,这样的生物技术属于何种生物工程？,动物细胞工程,2.2动物细胞工程,动物细胞培养,动物细胞融合,生产单克隆抗体,动物细胞核移植,动物细胞工程常用技术手段,(基础),动物细胞培养,小资料： 皮肤烧伤，如果创面很小（不大于硬币）只要保持清洁，甚至深度烧伤，也可能自愈。如果下层真皮受损面积较大，常常需要植皮。植皮需要健康皮片。植皮需要的健康皮片，可以取自烧伤病人自身未烧伤的部位（自体植皮），也可取自其他活人或尸体（异体植皮）等。自体植皮是永久性的，取自其他人或动物的植皮是暂时性的，是在创面愈合过程中为保护创面而采取的措施，101
2、4天后就要被身体排斥。,如果一个大面积烧伤的病人来说，自体皮肤有限，其他渠道的皮肤来源不足。如何才能获得大量的自体健康皮肤？,一、动物细胞培养,1、概念:,就是从动物机体中取出相关的组织,将它分散成单个细胞，然后,放在适宜的培养基中,让这些细胞生长和增殖。,剪碎组织的目的？,胰蛋白酶处理的目的？,2、过程：,取什么样的动物组织？为什么？,培养瓶光滑无毒,贴壁生长,转入培养液中 进行传代培养,培养过程：,动物胚胎或幼龄动物的组织、器官,细胞悬浮液,剪碎后用胰蛋白酶、胶原蛋白酶,10代细胞,原代培养,传代培养,无限传代,单个细胞,加培养液,动物细胞培养不能最终培养成生物体,（第一瓶）,（之后的瓶）
3、,有关概念,细胞贴壁：悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上。 接触抑制：当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞就会停止分裂增殖。 原代培养：动物组织消化后的初次培养。（分瓶前的细胞培养） 传代培养：将贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶等处理，然后分瓶继续培养，让细胞继续增殖。,3、动物细胞培养的原理 细胞增殖,4、动物细胞培养的条件：,1）无菌、无毒的环境：,对培养液和所有用具进行无菌处理,通常向培养液中添加一定量的抗生素,定期更换培养液,体外与体内培养所需营养物质基本相同,合成培养基：,2）营养：,如：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等,根据细胞需要按其种类和数量严格配制 而成的（通常加入
4、血清、血浆等）,体外培养与动物体温基本相同,3）温度和PH：,多数细胞生存的PH为：72 74,细胞培养所需气体主要有：和,）气体环境：,主要作用：是细胞代谢所必需的 主要作用：维持培养液的,5. 动物细胞培养技术的应用:,1)、生物制品的生产：(如:干扰素、病毒疫苗、单克隆抗体） 2）、基因工程离不开动物细胞的培养 3）、用于检测有毒物质： 4）、用于生理、药理、病理等方面的研究,1、简述动物细胞培养的过程 2、植物组织培养和动物细胞培养的比较,植物组织培养和动物细胞培养的比较,植物组织培养和动物细胞培养的比较,1.动物细胞工程技术的基础是( ） A.动物细胞融合 B.单克隆抗体 C.胚胎移
5、植 D.动物细胞培养 2.在动物细胞培养过程中，使用胰蛋白酶的目的是 A、使动物组织分散为单个细胞进行培养 B、去掉细胞壁成为原生质体 C、去掉细胞膜暴露出原生质体便于细胞融合 D、促进蛋白质水解为多肽,D,A,3.动物细胞培养与植物细胞培养的重要区别在于 A、培养基不同 B、动物细胞培养不需要在无菌条件下进行 C、动物细胞能够大量培养而植物细胞不能 D、动物细胞能够大量培养，而植物细胞只能培养成植株 4.下列植物细胞全能性最高的是 （ ） A.形成层细胞 B.韧皮部细胞 C.木质部细胞 D.叶肉细胞,A,A,5.在动物细胞培养的有关叙述中正确的是 A.动物细胞培养的目的是获得大量的细胞分泌蛋
6、白 B.动物细胞培养前要用胰蛋白酶使细胞分散 C.细胞遗传物质的改变发生于原代培养过程中 D.培养至50代后能继续传代的原代细胞叫癌细胞,B,6.下列有关动物细胞培养的叙述，不正确的是 A.用于培养的细胞大都取自胚胎或幼龄动物的器官或组织 B.将所取的组织先用胰蛋白酶等进行处理使其分散成单个细胞 C.在重新培养过程中，在培养瓶中要定期用胰蛋白酶使细胞从瓶壁上脱离，制成悬浮液 D.动物细胞培养只能传50代左右，所培养的细胞就会衰老死亡,D,7植物体细胞杂交要先去除细胞壁的原因是 （ ） A.植物体细胞的结构组成中不包括细胞壁 B.细胞壁使原生质体失去活力 C.细胞壁阻碍了原生质体的融合 D.细胞
7、壁不是原生质的组成部分,C,思考：,动物细胞为什么不能表现出全能性？,因为： 动物细胞全能性会随分化程度提高而逐渐受限制，分化潜能逐渐变弱,所以： 克隆动物实际是通过核移植来实现的,动物细胞核移植,二、动物核移植技术：,1、概念:,是将动物的一个细胞的细胞核,移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中.使其重组并发育成一个新的胚胎,这个新的胚胎最终发育为动物个体.,胚胎细胞核移植：,体细胞核移植：,细胞分化程度低，恢复全能性容易,细胞分化程度高，恢复全能性不易,2、分类：,3、体细胞核移植过程：,高产奶牛（供体）,体细胞培养,供体细胞,构建重组胚胎,代孕母体,耳细胞,牛卵巢,卵母细胞,卵母细胞（M期）
8、,提取,重组细胞(供体细胞核移入),去核,新小牛,提取,(融合),4. 原理,动物体细胞核具有全能性,细胞膜具有一定的流动性,5.应用： 加速家畜遗传改良进程，促进良畜种群繁育 保护濒危动物，增大存活数量 转基因克隆动物生产珍贵医用蛋白 转基因克隆动物作为异种移植的供体 人的核移植胚胎干细胞诱导可用于组织器官的移植,细胞质,细胞核,细胞核移植,多莉羊的培育过程,8.从母羊甲的体细胞中取出细胞核，注入到母羊乙去掉核的卵细胞中，融合后的细胞经卵裂形成早期胚胎，再植入到另一只母羊丙的子宫内，出生小羊的大多数性状 （ ） A.难以预测 B.像甲 C.像乙 D.像丙 9动物细胞融合和植物原生质融合决定于
9、 （ ） A.细胞膜的流动性 B细胞膜的选择透过性 C.细胞质的流动性 D细胞质酶的活性,B,A,11.在克隆多利羊的过程中，下列哪项技术没有运用到 A.细胞培养技术 B.细胞核移植 C.胚胎移植技术 D.基因工程技术,D,12.生物技术的发展速度很快，已灭绝生物的“复生”将不再是神话。如果世界上最后一只野驴刚死亡，以下较易成功“复生”野驴的方法是 A将野驴的体细胞取出，利用组织培养技术，经脱分化、再分化，培育成新个体 B将野驴的体细胞两两融合，再经组织培养培育成新个体 C取出野驴的体细胞核移植到母家驴的去核卵细胞中，经孕育培养成新个体 D将野驴的基因导入家驴的受精卵中，培育成新个体,C,13
10、.一只羊的卵细胞核被另一只羊的体细胞核置换后，这个卵细胞经过多次分裂，再植入第三只羊的子宫内发育，结果产下一只羊羔。这种克隆技术具有多种用途，但是不能 A有选择地繁殖某一性别的家畜 B繁殖家畜中的优秀个体 C用于保存物种 D改变动物的基因型,D,16.如果用动物的细胞进行克隆实验应该选择的细胞核不能是（ ） A、乳腺细胞的 B、卵细胞的 C、胃腺细胞的 D、囊胚时期的胚胎细胞的,B,17.美国一个研究小组利用成年猪的动脉血管细胞和模拟胚胎环境的新型生物反应器,成功地在实验室里培育出新的动脉血管.这种血管的外形和功能都与真的血管一样,这一研究成果是生物组织培养领域的重大进展. 以上技术的叙述中正确的是: （多选） A属于“克隆” B可能要利用去核卵母细胞 C关键是激发血管细胞的全能性 D关键是激发血管细胞发育成血管的潜能,ABD,
