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1、三、实验归类1,物质的鉴定与提取、分离实验 观察实验 有关酶的实验（生化） 生态调查及实验,生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定；DNA的提取与鉴定；叶绿体中色素的提取与鉴定,比较过氧化氢酶和Fe3+的催化效率；探索淀粉酶对淀粉和蔗糖的作用；探索影响淀粉酶活性的三个条件,用高倍显微镜观察叶绿体和细胞质的流动；观察植物细胞的有丝分裂；观察植物细胞的质壁分离与复原；植物向性运动的设计与观察,种群密度的取样调查；设计并制作小生态瓶；观察生态系统的稳定性并设计农业生态系统,观察鉴定法： 示踪原子法： 等组实验法： 杂交实验法： 化学分析法： 模拟实验法：,还原性糖、蛋白质、脂肪的鉴定、植物细胞有
2、丝分裂观察、叶绿体、细胞质的观察等。,噬菌体侵染细菌的实验、用18O和14CO2追踪光合作用中氧原子和碳原子转移途径、3H标记亮氨酸追踪分泌蛋白的合成和分泌过程等。,淀粉酶催化淀粉水解的实验，植物激素与向性。,一对、两对相对性状的杂交遗传,叶绿体色素的提取与分离、DNA的粗提取,渗透作用的实验装置、分离定律的模拟实验等。,实验归类2,四、中学生物实验包含的基本技术,（1）玻片标本技术,压片法 装片法 涂片法 切片法,取材 解离 漂洗 染色 制片（压片） 观察,例：有丝分裂;低温诱导染色体数目加倍,材料在载玻片水滴中展平；染色； 放盖玻片从一侧慢慢盖在水滴上，防止气泡产生 改变溶液浓度时从一侧滴
3、，另一侧吸水纸吸（引流法）,例：观察叶绿体；质壁分离和复原实验；制备细胞膜,例：观察动物如人体血液中的细胞；观察DNA和RNA在细胞中分布（人体口腔上皮细胞）,例：生物组织中脂肪鉴定,（2）染色技术（染色便于观察）,龙胆紫 醋酸洋红 改良苯酚品红 甲基绿 吡罗红 健那绿 亚甲基兰,染色体,紫色,染色体,红色,DNA,绿色,RNA,红色,线粒体,蓝绿色,活体染色,细菌氧化使之褪色，检测污水中好氧性细菌,（活体染色）,（活体染色）,染色体,红色,鉴定试剂（鉴定化学反应，是否物质存在）,斐林试剂 苏丹（）试剂 双缩脲试剂 二苯胺试剂 碘液 重铬酸钾溶液（H+） 溴麝香草酚蓝试剂,还原糖（葡、果、麦芽
4、糖）,砖红色（要加热）,脂肪,橘黄色（红色),蛋白质,紫色,DNA,蓝色（要加热）,淀粉,蓝色,酒精,二氧化碳,橙色灰绿色,蓝绿黄,高中生物实验中盐酸的作用总结,酶在不同PH下的活性：提供酸性环境（浓度不要求掌握的） 15 15%的HCl和95%的酒精：解离液在观察根尖分生组织细胞的有丝分裂中，与酒精1:1混合，起解离作用。 8 在观察DNA和RNA在细胞中的分布中，改变细胞膜的通透性，加速染色剂进入细胞，同时使染色质中的DNA与蛋白质分离，有利于DNA与染色剂结合。,高中生物实验中酒精的作用总结,1、50%的酒精溶液：用于洗去苏丹在脂肪上的浮色。 2、75%的酒精溶液：用于医学临床上的消毒灭
5、菌。 3、95%的酒精溶液：冷却的体积分数为95%的酒精可用于凝集DNA。 15%的盐酸和95%的酒精溶液等体积混合可用于解离根尖。,4、无水酒精 作用：提取色素 原理：叶绿体中的各种色素均是有机物, 能溶解在有机溶剂中, 各色素在无水酒精中的溶解度较大, 且酒精无毒, 方便操作。 应用：叶绿体中色素的提取与分离。,高中生物中需要水浴加热的实验,1、用二苯胺鉴定DNA（沸水浴） 2、酵母细胞固定实验中煮海藻酸钠（热水浴7080） 3、观察DNA和RNA在细胞中的分布实验中的水解（热水浴7080） 4、探究温度对酶活性的影响（水浴调节温度） 5、用斐林试剂或班式糖定性试剂鉴定还原性糖（热水浴）,
6、斐林试剂和双缩脲试剂的比较,【相同点】都由NaOH溶液和CuSO4溶液构成； 斐林试剂甲液和双缩脲试剂A都为0.1g/mLNaOH溶液。 【不同点】 CuSO4溶液浓度不一样：斐林试剂乙液为0.05g/mLCuSO4溶液，双缩脲试剂B为0.01g/mLCuSO4溶液。 配制比例不一样。使用方法不一样：斐林试剂是甲、乙液一起混合后再使用，双缩脲试剂则是先向待鉴定材料加入A试剂摇匀后，再加入试剂B。 鉴定的对象不一样：斐林试剂鉴定的是还原糖，双缩脲试剂鉴定的是蛋白质。 反应本质及颜色反应不一样。,（3）纸层析技术,（6）显微镜使用的基本技术,取样液 制备滤纸条 点样液 层析 观察结果,例：色素提取
7、和分离,（4）恒温技术 （水浴和恒温箱）,例：酶的催化反应；观察DNA和RNA在细胞中分布,（5）研磨和过滤技术,例：色素提取和分离,五、材料选择要满足实验要求 无色材料：还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定 观察细胞中DNA、RNA的分布 有色材料：叶绿体中色素的提取和分离取选择新鲜绿叶 观察植物细胞的质壁分离与复原 高倍显微镜的使用和观察叶绿体 活 材 料：观察植物细胞的质壁分离与复原 高倍显微镜的使用和观察线粒体 高倍显微镜的使用和观察叶绿体 (观察植物细胞的有丝分裂),五、材料选择满足实验要求 可溶性还原性糖(葡萄糖、果糖、麦芽糖)鉴定中含糖量较高、颜色为白色或近于白色，如：苹果、梨、白色甘蓝叶
8、、白萝卜等。 不宜选择甜菜、甘蔗等，因为这些材料中主要的糖类为不具还原性的蔗糖；(淀粉、蔗糖、纤维素都是非还原性糖。) 观察叶绿体和细胞质流动时，选择菠菜叶下表皮稍带叶肉（叶表皮细胞没有叶绿体，而靠近下表皮的叶肉细胞中含少而较大的叶绿体）或用藓类（叶片薄、叶绿体大），观察时应选择靠近叶脉部位细胞（叶脉附近细胞中水含量丰富，细胞质流动明显）。,五、材料选择满足实验要求 观察有丝分裂实验时，选择幼小根尖或动物 受精卵 减数分裂选择雄性生殖器官） 观察质壁分离和复原实验时,紫色洋葱鳞片叶外表皮细胞（具紫色大液泡），便于观察； 进行DNA提取和鉴定实验时不能选用哺乳动物红细胞作为材料；可选用鸡血、动物
9、肝脏，植物材料等。,显微镜观察实验,取材解离漂洗染色制片,取材、直接制片,取材、直接制片,取材、制片,低倍镜的使用、低倍镜到高倍镜的转换、熟练使用高倍镜、熟练进行对光、对焦、调节视野光线的强弱等一系列操作,正确选择观察的参照,明确观察目标,寻找、识别观察目标,观察、对比,2.几种特殊的细胞的判断 低等植物：有中心体、叶绿体、细胞壁等，常见类型衣 藻、绿藻、水绵,根尖分生区细胞：无叶绿体、大液泡,洋葱鳞片叶肉细胞：属于变态茎，因此无叶绿体,植物表皮细胞：无叶绿体,根尖成熟区（根毛）细胞：无叶绿体，有大液泡,植物导管细胞：死细胞，只有细胞壁,植物筛管细胞、血小板、哺乳动物成熟红细胞：无细胞核,观察
10、叶绿体的实验不适用,质壁分离实验不适用,综合运用显微观察技术、染色技术、玻片标本制作技术等,物质的鉴定（实验步骤及其顺序）,斐林试剂、班氏糖定性试剂,新制斐林试剂、水浴加热煮沸2min，加热过程中观察,溶液颜色 浅蓝色棕色 砖红色沉淀,碘酒,若材料具有颜色需先脱色,呈蓝色,苏丹或苏丹,显微观察,橘黄色或红色,双缩脲试剂,先加试剂A （0.1g/mLNaOH）摇匀后，再加试剂B（0.01g/mLCuSO4）,出现紫色,二苯胺,设置对照；加入.015mol/mL NaCl搅拌后加试剂，沸水中加热5min，冷却观察,出现蓝色,物质提取和分离实验,溶解度原理,丙酮、层析液,色素及色素带,杂质较少的DN
11、A,不同浓度的NaCl溶液、冷酒精,【以下为高中生物的部分实验内容】 检测生物组织中的还原糖 用高倍镜观察线粒体 检测生物组织中的脂肪 细胞大小与物质运输的关系 绿叶中色素的提取和分离 观察DNA和RNA在细胞中的分布 低温诱导植物染色体数目的变化 探究酵母菌细胞呼吸的方式 请用序号回答下列相关问题： （1）在上述实验过程中始终保持生物活性的是 （2）在上述实验中，常用到酒精的实验有 （3）在上述实验过程中，必须借助显微镜才能完成的是 需要水浴加热的是，得出结论，需借助颜色观察的是，,常用到盐酸的实验有 ,DNA的粗提取与鉴定,原理： 1.析出溶解在NaC1溶液中的DNA。 2.用冷酒精提取出
12、含杂质较少的DNA。 3.DNA在沸水浴时被二苯胺染成蓝色。 方法步骤： 1提取细胞核物质：顺时针方向搅拌，稍快，稍重。 2溶解DNA： 3析出含DNA的黏稠物：蒸馏水300mL，顺时针方向 搅拌，缓慢 4过滤：取黏稠物 5再溶解：顺时针方向搅拌，较慢。 6过滤：取滤液。 7提取出含杂质较少的DNA，顺时针方向搅拌，稍慢。 8DNA的鉴定：沸水浴5min,DNA的粗提取与鉴定,考点提示： （1) 鸡血能用猪血代替吗？为什么？ 不能，因为哺乳动物的红细胞中没有细胞核，不能提取DNA。 （2）鸡血中为何要加柠檬酸钠？为何要弃去鸡血细胞的上清液？ 防止血液凝固；因为上清液是血浆，不含细胞和DNA。
13、（3）胀破细胞的方法？能用生理盐水吗？ 向血细胞中加入蒸馏水，使细胞大量吸水而胀破；不能用生理盐水，因为血细胞在蒸馏水中不能吸收水分。 （4）该实验中最好应用玻璃烧杯还是塑料烧杯？为什么？ 最好用塑料杯，因为玻璃烧杯容易吸附DNA。,（5）前后三次过滤时，所用纱布的层数分别是多少？为什么？ 第一次用一层纱布，有利于核物质透过纱布进入滤液；第二次用多层纱布，能防止DNA丝状物透过纱布进入滤液； 第三次用两层纱布，既有利于DNA透过纱布，又能防止其它杂质透过纱布。 （6）若实验中所得黏稠物太少，其原因是什么？ 第一次加蒸馏水过少，细胞未充分胀破；第二次加蒸馏水过多或过少；第一次过滤用了多层纱布；第
14、二次过滤用了一层纱布；使用了玻璃烧杯。 （7）两次加入蒸馏水的目的分别是什么？ 第一次是为了使血细胞吸水胀破；第二次是为了降低氯化钠的浓度，有利于DNA有析出。 （8）实验中搅拌溶液时，为何总要沿一个方向搅拌？ 防止DNA分子受到损伤。,（9）两次析出DNA的方法分别是什么？原理分别是什么？ 第一次是加蒸馏水，降低氯化钠的浓度，促使DNA析出； 第二次是加入冷酒精，因为DNA不溶于酒精溶液 （10)三次溶解DNA的液体分别是什么？原理分别是什么？ 第一次、第二次都是用浓度为2mol/L的氯化钠溶液，第三次用的是0.015mol/L的氯化钠溶液。其原理是DNA在氯化钠中的溶解度，是随着氯化钠的浓
15、度的变化而改变的。当氯化钠的物质的量浓度为0.14mol/L时，DNA的溶解度最低。2mol/L的氯化钠溶液和0.015mol/L的氯化钠溶液对DNA的溶解度都比较高。 （11)鉴定DNA时为何要用两支试管？其现象分别是什么？ 其中不加DNA的试管起对照作用。该试管溶液不变色，另一支加有DNA的试管溶液变蓝色。,(1)使用显微镜观察几种细胞 (2)观察DNA、RNA在细胞中的分布 (3)用高倍显微镜观察叶绿体和线粒体 (4)观察根尖分生组织细胞的有丝分裂 (5)观察蝗虫精母细胞减数分裂固定装片 (6)低温诱导植物染色体数目的变化 (7)观察植物细胞的质壁分离和复原 （只用低倍显微镜）植物细胞的
16、吸水和失水 (8)体验制备细胞膜的方法 (9)培养液中酵母菌种群数量的变化,课本实验-显微镜观察类,高考生物实验考查的几种形式,1、找出实验设计中的描述错误并改正,2、补充和完善某一实验过程,3、分析实验结果并得出结论,4、设计实验方案,要注意应用多种形式来分析实验结果并表述结论,五、实验（设计）的原则,（1）科学性原则,（2）平行重复原则,（6）单一变量原则,（4）随机性原则,（5）简便性原则,（3）可行性原则,（7）对照原则,（1）科学性原则,实验原理的科学性 实验材料选择的科学性 实验方法的科学性 实验结果处理的科学性,（4）随机性原则,（5）简便性原则,材料易获取 装置简单 药品便宜 操作简便，步骤少，时间短,（消除系统误差，平衡无关变量）,（6）单一变量原则,实验变量与反应变量 无关变量与额外变量,自变量 因变量,（原因 ） （结
