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1、1,第二章 血液一般检验 第一节红细胞检查 P21-42,学习内容: 红细胞计数 血红蛋白测定 红细胞形态检查 红细胞比容测定,红细胞平均指数 网织红细胞计数 嗜碱性点彩红细胞计数 红细胞沉降率测定,2,红细胞生成过程,干细胞,原始红细胞,早幼红细胞,中幼红细胞,晚幼红细胞,网织红细胞,成熟红细胞,72h,48h,脾: 破坏分解 死亡 RBC,RBC寿命:120天,血 管,Epo 促 红 细 胞 生 成 素,3,一.红细胞计数red blood cell,RBC,(一)、原理 1.显微镜计数法:用等渗稀释液将血液稀释一定倍数后，滴入血细胞计数盘，然后于显微镜下，计数一定范围内的红细胞数，经过换
2、算即可求得每升血液中红细胞数。（XXX 1012/L） 2.血液分析仪法:电阻抗或流式细胞术激光检测法原理 (二)、质量保证:技术、仪器、分布误差 （三）、参考值 成年男性：(4.05.5)1012/L 成年女性：(3.55.0)1012/L 新生儿： (6.07.0)1012/L 医学决定水平：高于6.81012/L，应采取相应治疗措施； 低于3.51012/L可诊断贫血； 低于1.51012/L应考虑输血 (四)、临床意义,4,二 . 血红蛋白测定 （Hemoglobin Hb）,Hemoglobin :是一种微红色的胶体物质，是一种呼吸载体,由珠蛋白和亚铁血红素组成，其相对分子质量为64
3、458。,5,(一) .Hb的结构,1、血红蛋白由珠蛋白和亚铁血红素组成，分子量为64458，它是一种呼吸载体，每克血红蛋白可携带氧1.34ml。 血红蛋白由4条多肽链组成，每条有1个分子的亚铁血红素。组成Hb的多肽链分为和非两大类：类链：，和链；非链：，链。链由141个氨基酸组成，链由146个氨基酸组成。 2、珠蛋白肽链有三种形式： HbA（22），成人主要血红蛋白，约97%。 HbA2（22），成人次要血红蛋白，约2-3%。 HbF（22），胎儿血红蛋白，约2%。,6,Fe2+有6个配位键， 4个与原卟啉环连接， 1个与珠蛋白连接， 1个与O2结合。,3.亚铁血红素结构式,7,1.Hb的合
4、成受激素的调节,激素有两种.一是红细胞生成素,二是雄激素。 2.正常情况下，血红蛋白主要为HbO2和Hbred，还有少量HbCO 和 Hi。 3.血红蛋白分子降解为珠蛋白和血红素。血红素中大部分铁由单核-吞噬细胞系统细胞加工处理后，再重新回到循环血液中 。,（二）.Hb的合成及代谢,8,（三）. 血红蛋白Hb测定,即测定血液中各种血红蛋白的总浓度。 （xx g/L） 血液中血红蛋白以各种形式存在，包括氧合血红蛋白、碳氧血红蛋白、高铁血红蛋白或其他衍生物。,9,Hb测定的方法,1、 测铁法：1gHb3.47mgFe 2、 测氧法：1gHb1.34mlO2 此两种方法较准确，但不易操作。 目光比色
5、法：沙利氏法，现已淘汰。 3、比色法 光电比色法：常用，有HiCN、SDS-Hb 1966年国际血液学委员会 HiCN是测定Hb的标准方法 也是参考方法（WHO）,10,氰化高铁血红蛋白法（HiCN法）,1.检测原理 血液在血红蛋白转化液中溶血后，除SHb外各种血红蛋白均可被高铁氰化钾氧化成高铁血红蛋白（Hi），Hi与氰化钾的氰根（CN-）生成稳定的棕红色氰化高铁血红蛋白（HiCN）。其在540nm有吸收峰。特定标准条件下，其毫摩尔消光系数为 44L/（mmol.cm），可测得 吸光度并计算Hb（g/L）。 A/4464458（mg）/1000251=A367.7,但在实际工作中，一般实验室的
6、分光 光度计达不到WHO规定的标准条件，所以利用Hb参考液制备标准曲线，或算K (K=Hb/A)值，间接计算出Hb（G/L）。,11,氰化高铁血红蛋白法转化液作用及评价,12,氰化高铁血红蛋白法（HiCN法）质量保证,13,Hb测定方法学评价,14,RBC和Hb临床意义,参考值： Hb： RBC： 成年男: 120 160 g/L （4.0 5.5）X1012/L 成年女: 110 150 g/L （3.5 5.0）X1012/ 新生儿：180190 g/L (6.07.0)1012/L,15,RBC、Hb临床意义：,生理变化 （1）年龄与性别的差异；初生 2周男6-7岁25-30岁 （2）精
7、神因素； （3）剧烈的体力劳动； （4）气压降低； （5）长期多次献血者红细胞亦可代偿性增多； （6）生理性贫血。,16,RBC、Hb临床意义：,病理变化-增多： 相对性增多：因脱水血液浓缩所致； 如剧烈呕吐、大面积烧伤、出汗、多尿、慢性肾上腺皮质功能减退、尿崩症、甲状腺功能亢进等。 继发增多：组织缺氧、促红细胞生成素代偿性增多所致 。如法洛四联症、紫绀型先天性心脏病、阻塞性肺气肿、肺源性心脏病、肺动-静脉瘘以及携氧能力低的异常血红蛋白病等。 原发增多：真性红细胞增多症，多能造血干细胞受累所致。,17,RBC、Hb临床意义：,病理变化-减少： 一般成年男性血红蛋白120g/L,成年女性血红蛋白
8、110g/L，红细胞 3.5 X1012/L为贫血。 根据血红蛋白减低的程度贫血可分为四级。 轻度： 90gL 血红蛋白120gL、 中度：血红蛋白6090gL、 重度：血红蛋白3060gL、 极度：血红蛋白30g/L。 当RBC1.51012/L，Hb45g/L时，应考虑输血,18,三.红细胞形态检查,19,红细胞形态检查的检测常用方法,20,人为原因造成的红细胞形态异常,21,（一）、RBC正常形态,直径69.5m，平均7.2m，厚度2m。 瑞氏染色成淡红色，中央1/3为生理性淡染区，胞内无特殊结构。 外观：双凹圆盘状，大小相似。,22,正常形态红细胞图,正常形态红细胞扫描电镜图,23,（
9、二）、RBC异常形态,（1）红细胞大小改变 （2）红细胞形态改变 （3）红细胞内血红蛋白含量改变 （4）红细胞内结构改变,24,（1）大小异常：,小红细胞microcyte ：直径小于6m。 见于：缺铁性贫血、珠蛋白生成障碍性贫血。 大红细胞macrocyte ：直径大于10m。 见于：溶贫、巨幼贫。 巨红细胞megalocyte ：直径大于15m。 见于：巨幼红。 大小不均anisocytosis：直径相差一倍以上。 见于：严重增生性贫血，如巨幼红。,25,巨红细胞,红细胞大小不均,26,（2）形态异常：, 球形红细胞spherocyte 椭圆形红细胞elliptocyte 靶形红细胞tar
10、get cell 镰形红细胞sickle cell 口形红细胞stomatocyte 棘红细胞acanthocyte 裂片红细胞schistocyte 红细胞形态不齐poikilocytosis: 新月形、 泪滴形、蝌蚪形等多形红细胞,27, 球形红细胞（spherocyte）,结构：球状，直径6m，厚2.6m，体积 较小，中央着色深。 见于：遗传性球形红细胞增多症(20%)、 自身免疫性溶贫等。,28,29, 椭圆形红细胞（elliptocyte）,结构：细胞呈卵圆形、杆形、长度可大于宽度3-4倍，最大直径可达12.5m，横径可为2.5m。 见于：遗传性椭圆形红细胞增多症25%、大红细胞性贫
11、血等,30,31,靶形红细胞（target cell）,结构：红细胞中心部位染色较深， 其外围为苍白区域，而细胞边缘又深染 形如射击之靶。 见于：地中海性贫血、严重缺铁性贫血等,32,33, 镰形红细胞（sickle cell）,结构：形如镰刀状。这是由于红细胞内存 在着异常HbS所致，在缺氧 情况下尤易形成此类红细胞。 见于：遗传性镰形红细胞增多症。,34,35, 口形红细胞（stomatocyte）,36,口形RBC,37,38, 棘红细胞（acanthocyte）,结构：红细胞表面有针尖状突起，其间距不规则。突起的长度和宽度不一。 见于：在-脂蛋白缺乏症病人的血涂片中出现较多。也可见于脾
12、切除后、酒精中毒性肝脏疾病、尿毒症。,39,棘形RBC,皱缩RBC,40,裂片红细胞（schistocyte）,结构：为红细胞碎片或不完整的红细胞。大小不一。外形不规则，有各种形态如棘形、盔形、三角形、扭转形等。 常见于：弥漫性血管内凝血、微血管病性溶血性贫血、重型珠蛋白生成障碍性贫血。,41,裂片红细胞,42,红细胞形态不齐（poikilocytosis）,结构：红细胞形态呈泪滴状、梨形、棍棒形、新月形等。 常见于：巨幼细胞性贫血。 病因：可能因贫血严重但又缺乏原料，在骨髓内粗制滥造；也可能因红细胞脆性增大，在推片时碎裂所致。,43,泪滴状RBC,44,（3）红细胞内血红蛋白含量改变,正常色
13、素性normochmic ： 见于：正常人、急性失血、再障等。 低色素性hypochromic ： 见于：缺铁性贫血、地中海性贫血等。 高色素性hyperchromic ： 见于：巨幼贫。 嗜多色素性polychromatic ：为未成熟红细 胞，含有嗜碱性RNA物质，染成灰兰色。 见于：骨髓造血旺盛时，溶贫最多见。,45,巨幼红细胞,46,低色素性RBC,47,嗜多色性RBC,48,（4）、RBC内结构异常,点彩红细胞（basophilic stippling cell） ： 未完全成熟红细胞胞浆内残存变性的嗜碱性 RNA，经瑞氏染色，呈蓝黑色颗粒。 50个视野点彩红细胞数 5个视野内红细胞
14、总数10 参考值：310-4 常见于：铅、汞、银、苯胺中毒患者血液涂片中。,点彩红细胞%=,49,50,染色质小体(howell jollys body),定义： 又称豪周氏小体。成熟或幼红细胞的胞质内含有的，直径1-2m大小，可1至数个，暗紫红色圆形小体，已证实为核碎裂或溶解后核残余物，常见于巨幼细胞性贫血、红白血病、溶血性贫血及脾切除术后。,51,52,卡波氏环(Cabots ring),定义：在嗜多色性、点彩红细胞胞浆中出现的紫红色细线圈状结构，为脂蛋白变性所致，呈“8”字形或环形，常与豪周氏小体一起存在。 见于：巨幼贫、铅中毒。,53,卡波氏环,54,有核红细胞 （nucleated
15、eryhrocyte）,幼稚红细胞，病理时出现。 见于： 溶血性贫血； 造血系统恶性疾患或骨髓转移性肿瘤； 慢性骨髓增生性疾病； 脾切除后。,55,有核红 细胞,56,、寄生虫,当患者感染疟原虫、微丝蚴等时， 可见红细胞胞质内相应的病原体。,57,58,四. 红细胞比容测定 （hematocrit，HCT、PCV）,（一）、概念及测定原理 是指血液中红细胞所占全血容积的比值。 通常是将不改变红细胞体积的抗凝血置于压积管中，经一定的离心力离心后计算被压实红细胞层所占的比值。,59,（二）Hct测定方法,1、温氏法：常用，但残留血浆量有3%。 2、毛细管高速离心法： WHO定为首选常规方法，用量少，快速（离心5分 钟），同时可测多个标本，结果准确。 3、血液分析仪法：由红细胞计数和红细胞平均体积 导出HCT，HCT红细胞计数红细胞平均体积。 4、放射核素法：ICSH推荐为参考方法。,60,（三）Hct临床意义：,1、参考值：成年 男性：0.400.50 女性：0.370.48 儿童：0.330.42 新生儿：0.470.67 2、增高：见于各种原因所致的血液浓缩 可作为补液的指标（烧伤、脱水HCT增高） 真性红细胞增多症 HCT0.7，RBC(710）X1012/L,Hb180g/L 3、减低：见于各种贫血，有助于贫血的鉴别、分类。 4、是影响全血粘度的因素之一。,61,五
