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1、,血液常用检查（二）,主要内容,白细胞计数,白细胞分类计数,白细胞形态学检查,血小板计数,血小板形态检查,白细胞计数(white blood cell count，WBC)： 指测定单位容积的外周血各种白细胞的总数。 检测原理 （显微镜计数法） 用白细胞计数稀释液(稀乙酸)， 将血液稀释一定倍数并破坏成熟红细胞和固定白细胞 充入改良牛鲍(Neubauer)计数板， 在显微镜下计数一定范围内的白细胞数 经换算求得每升血液中各种白细胞的总数。,一、白细胞计数,【质量保证】 1计数误差 (1)技术误差：规范、熟练的操作，仪器的校正、 试剂的标准化和操作人责任心。 1)器材：清洁、干燥，校准，合格试剂
2、。 2)标本要求：血液分析仪检测的标本要求及质量保证见表225。,3)加盖玻片影响：WHO推荐采用“推式”法，此法较“盖式”法更能保证充液体积的高度为0.10mm。 4)充池影响： 充池前充分混匀白细胞悬液，避免气泡。 充池应避免充液过多、过少、断续，避免气泡及充液后移动盖玻片。,技术误差,5)计数原则：计数压线细胞时， 数上不数下, 数左不数右。 6)计数室内细胞分布要均匀：白细胞总数在正常范围内时，各大方格间的细胞数不得相差8个以上。2次重复计数误差不超过l0。 7)有核红细胞影响：外周血出现有核红细胞，可使白细胞计数结果偏高，须校正。,技术误差,(2)固有误差：主要是指计数域误差(fie
3、ld error)。 是由于每次充池后血细胞在计数室内分布不同 计数域误差变异系数(CV)可随计数的细胞数量增多而减小。 白细胞数量太少时(15X109L) 稀释 固有误差还应包括计数室和吸管的使用次数，即计数池误差(chambererror)和吸管误差,计数误差,3)生理状态影响： 运动、劳动、冷热水浴、酷热、严寒等常出现一过性白细胞增高；一日之内白细胞数最高值与最低值可相差1倍。另外，吸烟者白细胞总数平均较非吸烟者高30。最好在固定检查时间。,计数误差,2质量考核与评价 (1)经验控制 (1)与红细胞数相对比较：正常范围下，红细胞数白细胞数约为500：1。 (2)判断白细胞计数与显微镜白细
4、胞分布密度一致性(表24)：由于手工制备血涂片难以标准化，因此也只能粗略估计，有矛盾者再复查。,表24 血涂片上WBC密度与WBC数量关系 血涂片上WBC数：HP WBC(109L) 24 4 7 4 6 79 6 10 10 12 10 12 13 18,(2). 两差比值评价法 (3). 双份计数标准差评价法,2质量考核与评价,成人： (410) 109L 新生儿： (15 20) 109L 6月2岁： ( 11 12) 109L,参考值,10109L称白细胞增多(1eukocytosis)， 4109L称白细胞减低(1eukopenia)。 白细胞数在生理或病理情况下均可有变异。 由于中
5、性粒细胞占白细胞总数的5070，其增高和减低直接影响白细胞总数的变化，中性粒细胞增减的意义与白细胞总数的增减的意义基本上是一致的。 有时两者的数量关系也有不一致的情况，要具体情况具体分析。,临床意义,白细胞分类计数(differential count，DC)是将血液制成涂片，经染色后在油镜下观察白细胞的形态并进行分类，求得各种类型白细胞的比值(百分率) 。 分析白细胞分类变化意义时，必须计算各类型白细胞的绝对值(各类型白细胞绝对值白细胞计数值白细胞分类计数百分率)，才有诊断参考价值。 白细胞分类计数的方法有两种： 一种是传统显微镜分类法， 一种是血液分析仪分类计数法。,二、白细胞分类计数,检
6、测原理 (显微镜分类法) 将血液涂成薄膜， 经Wright染色后， 于显微镜下，按白细胞形态学特征逐个分别计数，得出各种白细胞百分率。 结合白细胞计数结果，可间接求出每升血液中各种白细胞的绝对值。,质量控制,分析前质量控制 分析中质量控制 血涂片制备 染色 镜检部位 镜检白细胞数量 分析后质量控制,成人白细胞分类参考值 百分率() 绝对值(109L) 中性杆状核粒细胞 1 5 0.04 0.5 中性分叶核粒细胞 50 70 2 7 嗜酸性粒细胞 0.5 5 0.05 0.5 嗜碱性粒细胞 0 1 0 1 淋巴细胞 20 40 0.8 4 单核细胞 3 8 0.12 0.8,参考值,正常情况下，
7、 中性杆状核粒细胞占1一5， 中性分叶核粒细胞占50一70， 2叶核细胞为1030， 3叶核为4050， 4叶核为10一20， 5叶核小于3。 正常时，外周血中性粒细胞核以3叶的居多，杆状核与分叶核之间的正常比值为 l ：13。,参考值,1.中性粒细胞增多 白细胞总数与中性粒细胞(neutrophil，N) 白细胞总数与中性粒细胞数量增多及减少的定义见表. 在外周血中，由于中性粒细胞占白细胞总数的50一70，临床意义基本一致。 淋巴细胞、嗜酸性粒细胞等数量上的改变也会引起白细胞总数的变化。因此，还应具体分析。,临床意义,1)中性粒细胞生理性增多：常不伴有白细胞质量的改变。 年龄：,临床意义,1
8、)生理性增多： 日间变化：一日之间最高值与最低值之间可相差1倍。 运动、疼痛和情绪的影响：如剧烈运动可使短时间内白细胞高达35X109L，以中性粒细胞为主。当运动结束后迅即恢复原有水平。 妊娠与分娩：分娩后2 5d内恢复正常。 其他：吸烟者 白细胞的生理波动很大，30%以内波动多无意义，只有通过定时和反复观察才有意义。,2)病理性增多：外周血白细胞10X109L 反应性增多，可见于： A、 急性感染或炎症：为引起白细胞总数和中性粒细胞增多最常见的原因。 球菌、杆菌、真菌、放线菌、病毒、 立克次体、螺旋体、寄生虫等。 增高程度与病原体种类、感染部位和程度以及机体的反应性等有关,B、类白血病反应：
9、指机体在有明确病因的刺激下，出现白细胞数中度增高(50Xl09L)，多以成熟中性粒细胞增多为主，原始、早幼粒细胞增多少见(10)，常伴较明显的中性粒细胞中毒性改变，其他细胞均无明显变化。,C. 广泛组织损伤或坏死： 严重外伤、手术创伤、大面积烧伤、冻伤以及血管栓塞(如心肌梗死、肺梗死)所致局部缺血性坏死等使组织严重损伤者，在1236h内常见白细胞增高，以中性分叶核粒细胞增多为主。 有无术后感染，与心绞痛鉴别。,D、 急性溶血：缺氧及分解产物刺激 E、 急性失血： 消化道大量出血、内脏破裂如脾破裂或输卵管妊娠破裂等，白细胞总数常在12h内迅速增高，可达(10 20)X109L， 但此时的红细胞数
10、和血红蛋白量仍可暂时保持正常范围，待组织间液吸收回血液或补充循环血容量后，才出现红细胞和血红蛋白减低。 早期诊断内出血的参考指标。,F、急性中毒： a、外源性中毒：化学物质或药物如汞、铅、安眠药急性中毒，生物毒素如昆虫毒、蛇毒以及植物毒素如毒蕈中毒。 b、内源性中毒：如尿毒症、糖尿病酮症酸中毒、子痫、内分泌疾病危象等。,G、恶性肿瘤： 非造血系统恶性肿瘤可出现持续性白细胞增高，以中性分叶核粒细胞增多为主。 其机制可能为： 肿瘤坏死分解产物刺激 肿瘤细胞(如肝癌、胃癌等) 促粒细胞生成因子。 恶性肿瘤骨髓转移，破坏骨髓调控作用等 H、其他原因： 见于类风湿性关节炎、自身免疫性溶血性贫血、痛风及严
11、重缺氧 应用皮质激素、肾上腺素、氯化锂等。,异常增生性增多 A、 白血病：,B、骨髓增殖性疾病： 包括真性红细胞增多症、原发性血小板增多症和骨髓纤维化症(也可包括慢性粒细胞白血病)等。 本组疾病均系多能干细胞的病变引起，具有潜在演变为急性白血病的趋势。 其特点为除了一种血细胞成分的主要增多外，常伴有其他一种或两种血细胞的增生，故常有中性粒细胞增多，白细胞数常在(1030)X109L。,(2)中性粒细胞减低(neutropenia)： 白细胞减低主要是中性粒细胞减低。 粒细胞减低症(granulocytopenia)： 中性粒细胞绝对值成人 2.0X109L, 儿童1.5X109L 粒细胞缺乏症
12、(agranulocytosis) ： 外周血白细胞2.0X109L, 中性粒细胞绝对值0.5X109L,(2)中性粒细胞减低(neutropenia)：,(2)中性粒细胞减低(neutropenia)：,1)嗜碱性粒细胞增多(basophilia)： 指外周血嗜碱性粒细胞浓度绝对值超过参考值的上限(0.05109L)的一种征象,(2)嗜碱性粒细胞减少(basopenia)： 多无临床意义。 减少可见于过敏性休克、促肾上腺皮质激素或糖皮质激素应用过量以及应激反应等。,3淋巴细胞(lymphocyte，L) (1)淋巴细胞增多(lymphocytosis)： 指外周血淋巴细胞绝对值增高 成人 4
13、.0109L； 儿童：4岁以上7.2109L、 4岁以下9.0109L。,(1)淋巴细胞增多：,(2)淋巴细胞减少(1ymphopenia)： 指外周血淋巴细胞绝对值减低(成人 1.0109L)。 凡中性粒细胞显著增高的各种病因均可导致淋巴细胞相对减少。,(2)淋巴细胞减少,(2)淋巴细胞减少,4单核细胞(monocyte，M) 成人单核细胞占白细胞总数3-8。 正常儿童稍高，平均为9； 2周内的婴儿可达15或更多； 妊娠中、晚期及分娩增多. 骨髓释放入外周血的单核细胞为成熟的单核细胞，在血液中停留36d，即逸出血管进入组织或体腔内，经59d，发育为巨噬细胞，形成单核-巨噬系统， 功能: 吞噬
14、和杀灭作用： 清除损伤或已死亡的细胞： 处理抗原：,单核细胞增多(monocytosis) 是指成人外周血单核细胞绝对值大于0.8109L。,单核细胞增多,四、白细胞形态检查 检测原理外周血液经涂片、染色后，在普通光 学显微镜下作白细胞形态学观察和分析。 血涂片染色方法有：瑞氏染色法和吉姆萨染色法，其他的染色法还有MayGrunwald法、Jenner法和Leishman染色法等。 常用瑞氏和吉氏混合染色法。1984年ICSH推荐该法使用的两种染料为天青B和伊红Y。,方法学评价 1显微镜分析法 目前对血液细胞形态的识别，特别是异常形态的鉴别主要采用人工方法进行血涂片制备和染色，在普通光学显微镜
15、下观察。,方法学评价 2血液分析仪法 优点：提供血细胞数量及其他相关参数，对异常结果予以报警并作提示。 缺点：不能直接提供血细胞质量(形态)改变的确切信息，而需进一步用显微镜检查血涂片进行核实。 注：血细胞形态分析是病理性血标本必不可少的初步检查手段。,临床意义 一、正常白细胞形态 、外周血正常白细胞形态特征 瑞氏染色正常白细胞的细胞大小、核和质的特征见表2-49,一、正常白细胞形态 2中性粒细胞核形界定 分叶核粒细胞的核分叶之间，外观以染色较深的一丝实线相连，只有核膜组成，其内无染色质，这是中性粒细胞分叶核与杆状核鉴别的基础。当杆状核与分叶核鉴别困难时，可将其归类于分叶核。 3粒细胞胞质内颗粒 中性粒细胞的胞质内颗粒分为嗜天青颗粒(占20)和特殊颗粒(占80)。粒细胞胞质内的颗粒比较见表2-5
