《李晓红-侵袭性真菌感染的形态学诊断》由会员分享，可在线阅读，更多相关《李晓红-侵袭性真菌感染的形态学诊断（45页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、1,侵袭性真菌感染的形态学诊断,第六届全国侵袭性真菌病实验室诊断及临床治疗新进展研讨会汇报 李晓红,真菌室 封闭式实验室 脚感开门器,生物安全柜 涂片（10%KOH、棉酚兰）丝状菌压片,2,28和35恒温恒湿培养箱 真菌常规培养28 、真菌药敏35（检测双相真菌必备）,3,显微镜观察形态学10%KOH压片 快速鉴定非常重要的步骤 真菌小培养 真菌乳酸酚棉蓝染色,4,培养基、试剂、鉴定药敏,l l l l l l l l l l l,沙保弱琼脂斜面 科玛嘉显色培养基（CHROM agar） 沙保弱琼脂（Sabouraud agar，SDA）平皿 土豆培养基（Potato agar,PDA） 脑心
2、浸液培基（BHI） 乳酸棉酚蓝 真菌KOH压片 API 20C试剂盒 VITEK 2 YST鉴定卡 ATB FUNGUS 3酵母菌药敏试验 真菌 Etest 药敏试验,常见引起侵袭性感染的真菌有那几种？,l l,引起侵袭性感染的真菌是指侵袭深部组织和 内脏，引起全身性感染的病原真菌或条件致 病真菌 主要包括念珠菌属、隐球菌菌属、曲霉属、 毛霉属和双相型真菌等，常见双相型真菌有 组织胞浆菌、马尔尼菲青霉菌等,6,显微镜观察形态学是非常重要的步骤,l,某些真菌特异性结构是在感染病症，是显微镜直接检查确诊 如：卡氏肺孢子虫菌孢囊的检测（六胺银染色),13p0681 痰 ，感染内科,憋气 （HIV+)
3、,13p0854 肺泡灌洗液，ICU,感染性休克呼吸衰竭,9,CSF,新型隐球菌,09W7612 儿科发热待查,革兰染色,CSF墨汁染色（+）,13W1998神经科门诊 (20倍低倍镜、40倍高倍镜） 墨汁染色,10,13R588痰 呼吸科 诊断：间质性肺炎 涂片：有隔菌丝45高度可疑曲菌（报危急！） 培养：烟曲霉,11,10W8601 胸水 革兰染色-低倍镜-油镜 （诊断：肺癌 痰培养克柔、白念、热带）,12,13R3268消化内科病房 痰 革兰染色：酵母样孢子假菌丝 培养：白念、鲍曼 痰、支气管吸取物、便均培养：白念、光滑,13,13z6088 分泌物（急诊内科-消化科） 诊断：溃疡性结肠
4、炎 涂片：酵母样孢子假菌丝大量、培养：白念,14,12R12739 痰 血液科 诊断：浆细胞白血病 涂片：关节孢子、芽生孢子、菌丝及断裂后形成的孢子 培养：阿萨希毛孢子菌,15,13R330 痰 诊断：卵巢癌复发 涂片：有隔菌丝 培养：地霉属 （长方形关节孢子有角部发芽、没有芽孢）,16,13r2231痰国际医疗部 诊断：不明原因发热 需氧血培养1次 痰培养+涂片1次 培养（-) 涂片提示：可疑努卡菌建议复查,17,13xr750痰涂片（未做努卡检查） 免疫内科病房诊断：皮肌炎、支气管扩张 弱抗酸（+)报危急！培养+药敏：圣乔治教堂努卡菌 （Nocadia cvriacigeorgica）,1
5、8,采血及无菌部位标本送检 (需氧、厌氧、儿童瓶、分支杆菌快速/真菌 ） 检验中报警,2014-8-28,PUMCH xxl,19,PDF 文件使用 “pdfFactory“ 试用版本创建 ,需氧瓶12.24h报警 涂片找到孢子加种显色培养基,白念珠菌纯培养涂片,血培养阳性瓶直接涂片 显色培养基,20,血培养 35.38h报警 近平滑念珠菌,B07K04681 API20C AUX鉴定 显色培养基,21,13B15620 外周血 56h报警 支气管扩张 直接革兰染色有隔真菌丝 土豆培养基2天,大分生孢子紡锤形,22,13B15620 外周血 土豆琼脂8天菌落正反面呈橘红色,半裸镰刀菌？,23,
6、细菌室在此患者诊治过程中与临床沟通对后 续的诊治有所提示,l l l l l l l l l,病例特点: 咳黄色痰10余年，间断有发热。陈旧性肺结核35年，2012年出现活动 后气短 CT影像诊断： 印象：双肺多发斑片影伴支气管扩张考虑感染性改变可能 痰培养绿脓杆菌，特治星泰能可乐必妥 PCT(-) 9月26日 G实验：60pg/ml正常 TB细胞亚群：B细胞比例降低，NF细胞比例升高，CD8+T细胞比例稍 低，纯真CD4+T细胞比例降低，CD8+T细胞有异常激活 10月12日 抽外周血需氧瓶56小时报警，直接涂片大量有隔菌丝 10月13日 发热38 ，患者自动要求出院 10月22日 外周血培
7、养镰刀菌属,24,真菌室培养阳性率最高的丝状真菌,l l l,曲霉菌属：烟曲霉、黄曲霉、黑曲霉、杂色 曲霉和构巢曲霉等是常见的致病菌 可从痰、支气管灌洗液、肺组织、血、外耳 道、鼻窦、腹膜液等标本中分离到 如果镜检看到菌丝有隔，呈二叉型，45度角 分枝，高度可疑曲霉菌,25,常见曲霉菌镜下形态（1）,26,常见曲霉菌镜下形态（2）,27,丝状真菌沙氏土豆平皿点种非常重要 观察菌落形态取分纯菌压片,黄曲霉,烟曲霉,28,13XR2689 痰 烟曲霉 烟曲霉菌 绒状或絮状边缘为白色烟绿色分生孢 子头、分生孢子梗、顶囊倒烧瓶状、瓶 梗单层、分生孢子,29,肺组织 13Z14598 黄曲霉 诊断：咳血
8、、左上肺占位 粗毛毯状或放射状皱纹 黄色-黄绿色-棕绿 分生孢子头疏松放射状、分生孢 子梗长、顶囊、梗基、瓶梗、小 分生孢子,30,肺活检标本真菌检测的意义,l l l l l l l l,咳血8个月，2013.8.1胸外科 诊断:左肺上叶真菌感染 手术:左开胸，左肺上叶切除术 痰培养:绿脓、肺克 痰真菌培养:丝状真菌 肺活检真菌培养:黄曲霉 两性霉素B:0.38g/ml,伊曲康唑0.5g/ml， 伏立康唑0.125g/ml CT检查:左肺上叶尖后段见气囊状影，支气管扩张及高密 度致密影，周边可见磨玻璃密度影 病理冰冻结果:左上肺考虑为真菌菌团，PAS（+）六胺银 （+）粘卡（-）,31,13
9、R2854 痰 神经科诊断：复发性多发血管母细胞瘤 涂片：有隔菌丝、顶囊？培养：黑曲霉,32,黑曲霉菌 分生孢子头、分生孢子梗长、顶囊、梗基、瓶梗、分生孢子表面粗 糙厚绒状白色-黄色区域-黑色 痰 诊断：肺肿物,33,13R08506 构巢曲霉（壳细胞） 内科ICU、鼻前庭拭子,34,CAP F-14：PDA培养6天,乳酸酚棉蓝压片：分生孢子梗短、壳细胞,13Z11959 痰 棒曲霉 诊断：肺炎、肺间质纤维化,36,肺组织,组织胞浆菌(双相真菌),28C SDA培养，镜下典型大分生孢子表面有指状突起,37,显示37C培养呈酵母镜下圆形橢 显示25C侧支分生孢子梗和分生 圆形长形（酵母样菌体）
10、孢子链马纳菲青霉菌（丝状菌菌落）,38,毛霉属直接镜检及培养,l l l l l,组织标本 鼻窦抽吸物 肺支气管冲洗液（离心） 可见宽大（7-15mm）透明 极少分隔，分支呈直角的菌 丝有诊断意义 毛霉属 菌落生长迅速疏松 呈灰或褐灰色大型孢子囊,无 囊托,无匍匐菌丝及假根,39,孢子囊、包囊梗从菌丝长出、 9 0 度角分枝菌丝,毛霉属涂片 08z09969 sp 孢囊梗、囊轴、孢子囊孢子,40,13Z14339 痰 诊断：肺部阴影 根霉属：白色-灰褐色至黑色 匍 匐菌丝，菌丝由假根长出，假根, 孢囊梗,孢子囊,孢子囊孢子,41,帚狀枝,真菌标本中不常见条件 致病菌或环境中污染菌 区别 青霉菌
11、属（Aspergillus） 或透明丝孢霉和暗色丝孢霉病 的病原体（瓶霉、外瓶霉、枝 孢霉）,绒状灰绿色,青霉属,42,红色毛癣菌 13z14691脓标本 诊断：慢性粒-单核细胞白血病,43,CAPF-16:脱发部位皮损标本 须癣毛癣菌 SDA培养6天，棒状大分生孢子，螺旋状菌丝结节状器官,44,CAP F-16:脱发部位皮损标本 须癣毛癣菌 SDA培养5天，白色绒毛状菌落，扁平圆盘状，背面黄色,45,须癣毛癣菌与红色毛癣菌区别 红色毛癣菌菌落背面典型酒红色 诊断：慢性粒-单核细胞白血病,46,细菌室可为临床医师做的 细菌、真菌、分枝杆菌,l l,及时报告血培养报警瓶/无菌部位标本危 急报告结果，严格按照三级报告/危急报 告制度及时与临床主管医生联系 融入临床，了解临床，学习临床，因为在 患者诊治过程中我们和临床医师有着共同 的责任！ 谢谢！,47,
