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1、1,第一节 提取分离方法,提取前的准备 系统的文献调研 原材料的处理 保留凭证标本 提取分离一般原则 已知物或已知结构类型文献方法 未知物活性跟踪（定向分离）,2,一、中草药有效成分的提取,溶剂提取法：最常用 水蒸气蒸馏法：挥发性 升华法 ：升华性,3,1. 溶剂提取法 （1） 选择溶剂考虑因素,溶剂尽可能多地溶出有效成分，杂质少溶或不溶。 依据有效成分、杂质、溶剂的极性：相似相溶原理。 溶剂的安全性、价廉易得、回收方便等,4,（2） 常见溶剂的种类及其特点,石油醚，苯，氯仿，乙醚，乙酸乙酯，正丁醇，丙酮，乙醇，甲醇，水 极性： 亲脂性： 亲水性： 与水可以以任意比例混溶的有机溶剂： 与水分层
2、的有机溶剂： 能与水分层的极性最大的有机溶剂： 溶解范围最广的有机溶剂：,5,（3） 常用溶剂提取方法,浸渍法： 水或稀醇，常温或低热 优：简单易行，适用于有效成分遇热易破坏者或含大量淀粉、树胶的药材的提取； 缺：提取效率低（静态），水溶液易发霉变质。 渗漉法： 渗漉筒 优：提取效率相对较高（动态）； 缺：溶剂用量大 煎煮法： 水 优：简便易行，药材中大部分成分可不同程度地提出； 缺：受热时间长，不宜用于有效成分遇热易破坏和具有挥 发性有效成分的天然药物的提取。,6,回流提取法：有机溶剂 优：提取效率高； 缺：热不稳定成分不宜，溶剂用量消耗量大，操作麻烦。 连续回流提取：索氏提取器 优：减少溶
3、剂消耗量，操作简便； 缺：受热时间长，提取一般要4-5小时。,超声波提取：超声波辅助溶剂进行提取 优：提取时间短，提取效率高，对成分的破坏少； 缺：需要特定的设备。,7,超临界流体萃取技术法（SFE）： 超临界流体 处于临界温度和临界压力以上，介于气体和液体之间的物质。 具有液体和气体的双重特性 如：密度与液体近似，粘度与气体近似，扩散系数是液体的100倍，对很多物质有很强的溶解能力。 优：提取效率高；不残留有机溶剂；萃取温度低，对成分的破坏少； 缺：对水溶性成分的溶解能力弱，需加入夹带剂； 设备较为昂贵，清洗较困难。,8,（4） 影响溶剂提取效率的因素,粉碎度 温度 时间,9,2. 水蒸气蒸
4、馏法,具有挥发性； 能随水蒸气蒸馏而不被破坏，难溶或不溶于水； 沸点在100以上，并在100左右有一定的蒸气压。,第一课件网 （ ）,10,3. 升华法,具有升华性的固体物质，如茶叶中的咖啡因。,11,第二节 天然药物有效成分的分离与精制,分离依据：共存成分的性质差异 1. 溶解度差异 2. 分配比不同 3. 吸附性差异 4分子大小差异 5离解程度不同,12,1. 根据物质的溶解度差异进行分离,调节温度 改变混合溶剂的极性 调节PH 加入某种沉淀试剂,13,（1）调节温度,温度不同，导致溶解度改变，如结晶、重结晶。,14,结晶法,分离和精制固体成分的重要方法之一； 用结晶法分离化学成分，关键在
5、于选择合适的溶剂： A.对欲纯化的物质热时溶解度大，冷时溶解度小，对杂质冷热均溶或均不溶； B. 沸点不宜太高或太低，宜在30-150。,第一课件网 （ ）,15,加另一种极性相差较大的溶剂，混合溶剂极性改变，部分物质沉淀析出。如水/醇法、醇/水法、醇/醚法。,（2）改变混合溶剂极性,16,A 水/醇法：除去水提液中的水溶性杂质,中药水提取液,加数倍量浓醇静置过夜,母液 （目标成分）,沉淀,（水溶性杂质 如蛋白质、多糖）,17,B 醇/水法：除去醇提液中的脂溶性杂质,母液 （目标成分）,中药醇提取液,加数倍水静置过夜,沉淀 （脂溶性杂质如油脂、叶绿素等）,18,C 醇/醚法（醇/丙酮法）：纯化
6、皂苷,19,适用于酸、碱、两性成分； 通过调节PH改变的分子存在状态，从而改变溶解度。,（3）调节PH,解离型/离子态,H+,BH+,B,OH-,H+,A-,HA,OH-,脂溶性,水溶性,20,A酸/碱法（酸提碱沉法）生物碱的提取、纯化,（水溶性杂质）,21,（水溶性杂质）,B碱/酸法（碱提酸沉法）黄酮、蒽醌等酚性成分的提取、纯化,22,C. 调节PH至等电点，沉淀蛋白,23,成分中加入某种沉淀试剂，生成水不溶性盐。 如生物碱类成分加入苦味酸、磷钨酸、雷氏盐等生成沉淀，与其他组分相分离。,（4）加沉淀剂,24,二、天然药物有效成分的分离与精制,分离依据：共存成分的性质差异 1. 溶解度差异 2
7、. 分配比不同 3. 吸附性差异 4分子大小差异 5离解程度不同,第一课件网 （ ）,25,2. 根据物质在两相溶剂中的分配比不同进行分离,(1) 分配比K K= CU / CL (2) 分离因子 =KA / KB （KA KB） 100 1次萃取，基本分离 10100 1012次 2 100次以上 1 无法分离,上层,下层,26,(3) 分配比与PH,酸性物质,pKa值越小，酸性越强,碱性物质，用其共轭酸的pKa值示,pKa值越小，碱性越弱,27,（1）简单液液萃取法,50 有机溶剂/水（酸、碱水）,28,（2）逆流分溶法（CCD， countercurrent distribution）,
8、50 工作原理：多次、连续的液液萃取 逆流分溶仪萃取单元及工作过程 优点：避免手工操作 缺点：溶剂用量大 机械操作导致破损、漏液 乳化,29,30,31,（3）纸色谱（paper chromatography, PC）,固定相：纸纤维上吸附的水 分离原理： Rf值与展开剂的种类相关 如果展开剂极性大于水： 极性越大的物质，Rf值越大； 极性越小的物质，Rf值越小。 反之亦然。,32,固定相涂覆于硅胶等多孔载体上，装柱； 流动相通过色谱柱进行洗脱； 物质在两相溶剂中作逆流移动； 分配比不同，被洗脱速度不同。,（4）液液分配柱色谱,33,正相色谱与反相色谱,34,二、天然药物有效成分的分离与精制,
9、分离依据：共存成分的性质差异 1. 溶解度差异 2. 分配比不同 3. 吸附性差异 4分子大小差异 5离解程度不同,第一课件网 （ ）,35,（1）吸附的类型,物理吸附： 分子间力，无选择性，可逆。 如硅胶、氧化铝、活性炭 化学吸附： 化学键，选择性较强，常不可逆。 如硅胶生物碱 碱性氧化铝黄酮、蒽醌等 半化学吸附：氢键，选择性较弱，多可逆。 如聚酰胺,36,（2）物理吸附的基本规律,极性相似者易于吸附,37,（3）简单吸附法用于物质的浓缩与精制,活性炭吸附法 结晶、重结晶中脱色、脱臭； 从大量稀水液中浓缩微量物质一叶秋碱的浓缩、精制。,38,（4）吸附柱色谱法用于物质的分离,硅胶吸附柱色谱,
10、氧化铝吸附柱色谱,A吸附剂：3060倍，难分离时提高到100200倍； B装柱： 干法装柱/湿法装柱； C上样： 干法上样/湿法上样； D洗脱： 等度/梯度（洗脱剂极性递增）； E洗脱系统的选择： TLC Rf=0.20.3。,39,（5）聚酰胺柱色谱,高分子聚合物 不溶于常见有机溶剂 对碱稳定 对酸特别是无机酸稳定性差 可溶于浓盐酸、冰乙酸、甲酸中,聚酰胺性质,40,分子间氢键半化学吸附,41,化合物在含水溶剂中大致有以下规律： 1. 形成氢键的基团数目：越多，越强。 2. 形成氢键的基团所处的位置： 处于易形成分子内氢键者，减弱。 3. 分子中芳香化程度：高，增强。,影响吸附力的因素,42
11、,43,4.各种溶剂在聚酰胺柱上的洗脱能力 水 甲醇 乙醇 氢氧化钠水溶液 甲酰胺 二甲基甲酰胺 尿素水溶液,弱,强,影响吸附力的因素,常以浓度渐高的含水醇梯度洗脱，如EtOH-H2O,44,二、天然药物有效成分的分离与精制,分离依据：共存成分的性质差异 1. 溶解度差异 2. 分配比不同 3. 吸附性差异 4分子大小差异 5离解程度不同,45,4根据物质分子大小差异进行分离,透析法 超滤法 超速离心法 凝胶滤过法：也称为凝胶渗透色谱、分子筛滤过,46,凝胶滤过法,凝胶三维网状结构的分子筛作用； 按分子量由大到小的顺序分离。,常用凝胶种类为葡聚糖凝胶,47,二、天然药物有效成分的分离与精制,分
12、离依据：共存成分的性质差异 1. 溶解度差异 2. 分配比不同 3. 吸附性差异 4分子大小差异 5离解程度不同,48,离子交换法 1. 步骤及原理,离子交换树脂为固定相，用水、或含水溶剂装柱； 含水流动相通过树脂； 可交换离子与树脂上的交换基团交换，吸附到树脂上； 中性及无交换离子的成分流出； 用适当溶剂将吸附到柱上的成分洗脱下来。,49,球形颗粒，不溶于水，可在水中溶胀；,母核（苯乙烯通过二乙烯苯交联而成的大分子网状结构） 离子交换基团,由两个部分组成：,2. 离子交换树脂的结构和性质,50,阳离子交换树脂：强酸性（-SO3-H+） 弱酸性（-COO-H+） 阴离子交换树脂：强碱性（-N+
13、（CH3）3Cl-） 弱碱性（-NH2，-NH-，-N=）,3. 离子交换树脂的种类,第一课件网 （ ）,51,不同电荷离子的分离； 如水提液中酸性、碱性、两性化合物的分离,4. 离子交换树脂的应用,52,水提液中酸性、碱性、两性化合物的分离,53,不同电荷离子的分离； 如水提液中酸性、碱性、两性化合物的分离 相同电荷但解离程度不同离子的分离。 如碱性不同的生物碱的分离,4. 离子交换树脂的应用,54,； http:/www.99dyw.co/ 九九电影网 http:/www.99dyw.tv/ 九九电影网 http:/youhuijuan.co/ 淘宝优惠券网 天堂网2014 天堂网2014 天堂网2014 天堂网2014 天堂网2014 天堂网2014 天堂网2014 天堂网2014 天堂网2014 天堂网2014 天堂网2014 天堂网2014 天堂网2014 天堂网2014 天堂网2014 天堂网2014 天堂网2014 天堂网2014 天堂网2014 天堂网2014 天堂网2014 天堂网2014 天堂网2014 天堂网2014 天堂网2014 天堂网2014 天堂网2014 天堂网2014 天堂网2014 天堂网2014 天堂网2014 天堂网2014 天堂网2014 天堂网2014,
