药敏试验及CLSI标准更新

《药敏试验及CLSI标准更新》由会员分享，可在线阅读，更多相关《药敏试验及CLSI标准更新（93页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。

1、药敏试验及药敏试验及 CLSI标准更新标准更新 药敏试验一般知识药敏试验一般知识 药敏试验药敏试验 药敏试验定义：药敏试验定义：使用使用体外体外方法测定抗菌药方法测定抗菌药 物物抑制病原微生物生长的效力。抑制病原微生物生长的效力。 主要目的：主要目的：预测体内抗菌效果预测体内抗菌效果 评价参数：评价参数：MIC(最低抑菌浓度最低抑菌浓度) 在体在体 外能够抑制细菌生长的外能够抑制细菌生长的最低最低抗菌药物浓度。抗菌药物浓度。 抗菌药物在体内的情况抗菌药物在体内的情况 不同给药方式，药物浓度不同不同给药方式，药物浓度不同（药物的吸收）（药物的吸收） 不同组织，药物浓度不同不同组织，药物浓度不同（

2、药物的分布）（药物的分布） 不同时间，药物浓度不同不同时间，药物浓度不同（药物的清除）（药物的清除） 研究抗菌药物在体内吸收、分布和清除的动 力学过程 研究抗菌药物在体内吸收、分布和清除的动 力学过程药代动力学药代动力学(PK)。 研究体内药物研究体内药物浓度浓度与药物抗菌与药物抗菌效果效果关系关系 药效动力学药效动力学(PD) 体外试验与体内情况有什么不同？体外试验与体内情况有什么不同？ 体外：体外： 药物浓度药物浓度 固定不变固定不变 T1/2 Cmax AUC 体内：体内： 药物浓度药物浓度 随时间改变随时间改变 细菌细菌MIC位于什么水平临床治疗有效？位于什么水平临床治疗有效？ 时间时

3、间 Cmax MIC T MIC Cmax / MIC AUC / MIC AUC Cmax/MIC AUC/MIC TMIC 浓度浓度 MIC 体外试验与体内情况的关联（体外试验与体内情况的关联（PK/PD参数）参数） 各类抗菌药物PK/PD参数 各类抗菌药物PK/PD参数 时间依赖性 时间依赖性 与时间有关，但抗菌活性持与时间有关，但抗菌活性持 续时间较长 续时间较长 对致病菌的杀菌作用 取决于峰浓度 对致病菌的杀菌作用 取决于峰浓度 抗菌作用与 同细菌接触时间密切相关 抗菌作用与 同细菌接触时间密切相关 时间依赖且 PAE或T1/2较长 时间依赖且 PAE或T1/2较长 氨基糖苷类、氟喹

4、诺酮类、 酮内酯类、两性霉素B、 daptomycin、甲硝唑 氨基糖苷类、氟喹诺酮类、 酮内酯类、两性霉素B、 daptomycin、甲硝唑 多数多数 -内酰胺类、 林可霉素类 恶唑烷酮类、氟胞嘧啶 -内酰胺类、 林可霉素类 恶唑烷酮类、氟胞嘧啶 链阳霉素、四环素、 碳青霉烯类、糖肽类、 大环内酯类、唑类抗真菌药 链阳霉素、四环素、 碳青霉烯类、糖肽类、 大环内酯类、唑类抗真菌药 Cmax/MIC 10 Cmax/MIC 10 TMIC 50%50% AUC/MIC 125 浓度依赖性 浓度依赖性 药敏试验中抗菌药物的选择药敏试验中抗菌药物的选择 自自1998年以来卫生部将年以来卫生部将CL

5、SI制定的药敏标制定的药敏标 准定为我国的部颁标准。依照（准定为我国的部颁标准。依照（CLSI）所）所 制定的药敏试验执行标准作为选药指南制定的药敏试验执行标准作为选药指南 针对每一菌群所选择的药物具有确切临床疗效针对每一菌群所选择的药物具有确切临床疗效 （天然耐药不做药敏试验）（天然耐药不做药敏试验） 测定的药物具有可靠的体外试验方法和结果测定的药物具有可靠的体外试验方法和结果 测定药物具有代表性或指示性。测定药物具有代表性或指示性。 CLSI推荐药物的取舍可根据本单位抗菌药物种推荐药物的取舍可根据本单位抗菌药物种 类确定类确定 药敏试验条件（如葡萄球菌）药敏试验条件（如葡萄球菌） 药敏试验

6、条件药敏试验条件 肠杆菌科细菌、非发酵菌、葡萄球菌、肠肠杆菌科细菌、非发酵菌、葡萄球菌、肠 球菌属等：球菌属等：Mueller-Hinton（MH）琼脂）琼脂 链球菌属：链球菌属： 5%脱纤维羊血（马血、兔血）脱纤维羊血（马血、兔血） MH琼脂琼脂 淋病奈瑟球菌：淋病奈瑟球菌：GC培养基培养基1特定的生特定的生 长添加剂长添加剂 脑膜炎奈瑟菌：脑膜炎奈瑟菌： 5%脱纤维绵羊血脱纤维绵羊血 药敏试验条件药敏试验条件 菌悬液制备菌悬液制备 肠杆菌科、假单胞菌属、不动杆菌属等：肠杆菌科、假单胞菌属、不动杆菌属等： 生长法或直接菌落悬液法生长法或直接菌落悬液法 葡萄球菌属、肠球菌属、苛氧菌：葡萄球菌属

7、、肠球菌属、苛氧菌：直接直接 菌落悬液法菌落悬液法 药敏试验条件药敏试验条件 孵育（温度、气体、时间）孵育（温度、气体、时间） 温度：温度：35 2 气体：空气，气体：空气， 5%CO2（ （ 溶血性链球菌、 溶血性链球菌、 肺炎链球菌、奈瑟氏菌属等）肺炎链球菌、奈瑟氏菌属等） 时间：时间： 16-18小时，小时，20-24小时小时 药敏试验最低限度的质控建议药敏试验最低限度的质控建议 纸片扩散法纸片扩散法 与与MIC法质控法质控 菌株不同菌株不同 药敏试验结果判读药敏试验结果判读 必须使用推荐的体外药敏试验方法必须使用推荐的体外药敏试验方法 根据根据CLSI所公布的最新判断标准进行所公布的最

8、新判断标准进行 结果判断结果判断 解释标准取决于特定的给药方案和感解释标准取决于特定的给药方案和感 染部位（必须与临床医师交流）染部位（必须与临床医师交流） 肺炎链球菌对青霉素敏感性肺炎链球菌对青霉素敏感性 肺炎链球菌对青霉素敏感性肺炎链球菌对青霉素敏感性 敏感敏感 中介中介 耐药耐药 注释注释 青霉素注射剂青霉素注射剂 （非脑膜炎）（非脑膜炎） 2 4 8 S:肾功能正常成人每肾功能正常成人每 4h静脉给药至少静脉给药至少200 万单位，每天至少万单位，每天至少 1200万单位万单位 青霉素注射剂青霉素注射剂 （非脑膜炎）（非脑膜炎） 0.06 - 0.12 需用最大剂量静脉给需用最大剂量静

9、脉给 药治疗（如肾功能正药治疗（如肾功能正 常成人每常成人每4h静脉给静脉给 药至少药至少300万单位万单位 口服青霉素口服青霉素 0.06 0.12-1 2 药敏试验结果的报告药敏试验结果的报告 报告方式报告方式 药敏试验结果以敏感、中介和耐药表示药敏试验结果以敏感、中介和耐药表示 有些细菌对某种抗菌药物没有或罕见有耐有些细菌对某种抗菌药物没有或罕见有耐 药菌株，如药菌株，如-溶血性链球菌对万古霉素，溶血性链球菌对万古霉素， 当这些细菌检测的当这些细菌检测的MIC高于敏感临界值或高于敏感临界值或 抑菌圈直径小于敏感临界值时，则应报告抑菌圈直径小于敏感临界值时，则应报告 为非敏感。出现这种情况

10、应证实细菌鉴定为非敏感。出现这种情况应证实细菌鉴定 和药敏试验结果，随后将菌株保存并递交和药敏试验结果，随后将菌株保存并递交 到参考实验室。到参考实验室。 流感嗜血杆菌流感嗜血杆菌 药敏试验结果的报告药敏试验结果的报告 特殊情况下的药敏试验及结果报告特殊情况下的药敏试验及结果报告 特殊细菌特殊细菌 特殊情况下的药敏试验及结果报告特殊情况下的药敏试验及结果报告 特殊部位特殊部位 对分离于对分离于脑脊液中的细菌脑脊液中的细菌，下列抗菌药物，下列抗菌药物 不不作为选择药物进行常规作为选择药物进行常规报告报告，因为用这，因为用这 些药物治疗某些细菌引起的脑脊液感染可些药物治疗某些细菌引起的脑脊液感染可

11、 能无效，这些药物包括：能无效，这些药物包括： 仅通过口服途径给药的仅通过口服途径给药的 和和代头孢菌素代头孢菌素( (头孢呋辛钠除外头孢呋辛钠除外) ) 克林霉素克林霉素 大环内酯类大环内酯类 四环素类四环素类 氟喹诺酮类氟喹诺酮类 特殊情况下的药敏试验及结果报告特殊情况下的药敏试验及结果报告 特殊部位特殊部位 下列药物一般不适宜治疗尿道感染：下列药物一般不适宜治疗尿道感染： 阿齐霉素阿齐霉素 氯霉素氯霉素 克拉霉素克拉霉素 克林霉素克林霉素 红霉素红霉素 CLSI M100-S17 (M2-DD, M7-MIC) 37 药敏试验结果报告药敏试验结果报告 罕见耐药菌株的处理和报告罕见耐药菌株

12、的处理和报告 如果解释标准中仅给出“如果解释标准中仅给出“S”的标准，那的标准，那 是由于某些细菌是由于某些细菌/抗菌药物组合，尚不存抗菌药物组合，尚不存 在或在或罕见罕见耐药菌株。如金黄色葡萄球菌，耐药菌株。如金黄色葡萄球菌， 肺炎链球菌对利奈唑烷，万古霉素出现耐肺炎链球菌对利奈唑烷，万古霉素出现耐 药药 应证实细菌鉴定和药敏试验结果应证实细菌鉴定和药敏试验结果 保藏菌株保藏菌株 递交到参考实验室证实其结果递交到参考实验室证实其结果 药敏试验结果报告药敏试验结果报告 处方注释报告处方注释报告 严重的肠球菌感染如：严重的肠球菌感染如：心内膜炎，通常需要氨心内膜炎，通常需要氨 苄西林、青霉素或万

13、古霉素（敏感株）加上一种苄西林、青霉素或万古霉素（敏感株）加上一种 氨基糖甙类联合治疗，除非证实对庆大和链霉素氨基糖甙类联合治疗，除非证实对庆大和链霉素 高水平耐药高水平耐药 CLSIthe Clinical and Laboratory Sdandards Instituste M02-A11纸片扩散法（纸片扩散法（2012） M07-A09 稀释法（稀释法（2012） M11-A07厌氧菌稀释法（厌氧菌稀释法（2007） M100-S23每年更新一次每年更新一次 药敏测定方法药敏测定方法 与方法相对应的判断标准折点与方法相对应的判断标准折点 专家系统（天然耐药、获得性耐药）专家系统（天然耐

14、药、获得性耐药） 质控指南质控指南 M100每年修订，每年修订，M02,M07每三年更新一次每三年更新一次 近年来近年来CLSI重要的变化重要的变化 增加天然耐药增加天然耐药 判断折点（更新、删除）判断折点（更新、删除） 检测方法改变检测方法改变 增加新的抗菌药物增加新的抗菌药物 删除某些药物删除某些药物 增加给药方案增加给药方案 2011年增加天然耐药附表年增加天然耐药附表 2013细菌的固有耐药附录细菌的固有耐药附录B 肠杆菌科表格肠杆菌科表格 删除了克氏枸橼酸杆菌对阿莫西林删除了克氏枸橼酸杆菌对阿莫西林/克拉维酸、克拉维酸、 氨苄西林氨苄西林/苏巴坦苏巴坦R 进一步阐明进一步阐明 非肠杆

15、菌科细菌非肠杆菌科细菌新增新增 葡萄球菌葡萄球菌新增新增 肠球菌肠球菌新增新增 M100-S23 page 176-179 固有耐药性 金黄色葡萄球菌（附录B） 注1：革兰阳性菌对氨曲南，多粘菌素B /粘菌素和萘啶酮酸也有固有耐 药性 固有耐药性 肠球菌（附录B ） *警告：对于肠球菌，头孢菌素类、氨基糖甙类（除可能出现高水平耐药 筛选）、克林霉素和SXT在体内具有活性，但是在临床上使用无效时， 不应报告敏感。 注1：革兰阳性菌对氨曲南，多粘菌素 /粘菌素和萘啶酮酸也有固有耐药 性 主要病原菌主要病原菌CLSI药敏试验变更药敏试验变更 葡萄球菌的天然耐药和获得性耐药葡萄球菌的天然耐药和获得性耐

16、药 葡萄葡萄 球菌球菌 天然耐药天然耐药 万古霉素耐药，非常罕见万古霉素耐药，非常罕见 获得性耐药获得性耐药 氨曲南氨曲南，奈啶酸，奈啶酸 替莫西林，多粘菌素替莫西林，多粘菌素 头孢他啶头孢他啶 青霉素耐药，约青霉素耐药，约95 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌，约耐甲氧西林金黄色葡萄球菌，约50 耐甲氧西林血浆凝固酶阴性葡萄球菌约耐甲氧西林血浆凝固酶阴性葡萄球菌约 80 葡萄球菌属葡萄球菌属青霉素青霉素 90的葡萄球菌对青霉素“的葡萄球菌对青霉素“ R ” 青霉素很少用来治疗金黄色葡萄球菌感染青霉素很少用来治疗金黄色葡萄球菌感染 但是如果青霉素已知是“但是如果青霉素已知是“S ”时，它可能会被用来治疗需要较长