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1、1新生儿缺氧缺血性脑病脐血肌酸激酶脑型同工酶和神经元特异性烯醇化酶变化及临床意义【摘要】 目的 观察新生儿缺氧缺血性脑病（HIE）时脐血肌酸激酶脑型同工酶（CK-BB）及神经元特异性烯醇化酶（NSE）水平变化，早期诊断新生儿缺氧缺血性脑损伤，为临床早期诊断新生儿缺氧缺血性脑损伤及协助 HIE 分度、预后评估提供一定的依据。方法 20 例足月儿，出生后 1 min Apgar 评分9 分的新生儿为对照组，32 例诊断为新生儿缺氧缺血性脑病的新生儿为病例组，生后立即收集脐血，检测 CK-BB 及 NSE 值。结果 新生儿 HIE 组脐血 CK-BB 及 NSE 水平明显高于对照组，差异有非常显著性
2、（P0.01）,且与 HIE 程度呈正相关。结论 新生儿缺氧缺血性脑病组脐血 CK-BB 及 NSE 水平高于对照组，差异有显著性。CK-BB、NSE 水平变化可作为反映早期脑损伤的生化指标，可协助 HIE 分度、预后评估，对 HIE 进行早期干预，具有一定的临床价值。 【关键词】 缺氧缺血性脑病；脐血；神经元特异性烯醇化酶；肌酸激酶脑型同工酶Dynamic changes and clinical significance of creatinkinase-BB and neuron-specific enolase in cord blood of neonatal hypoxic isc
3、hemic encephalopathyAbstract Objective The research was aimed to study the changes of neuron-specific enolase （NSE） ,creatinkinase-BB （CK-BB） in cord blood of newborns with hypoxic ischemic encephalopathy and make out the relationship between hypoxic ischemic encephalopathy （HIE） and the function of
4、 throid.Methods There were 20 neonates without the symptoms of fetal distress and Apgar score 9 in the control group.There were 32 neonates with HIE in the study group.All neonates were measured for CK-BB and NSE levels in umbilical artery at delivery.Results The results showed that the level of NSE
5、、CK-BB in cord blood of neonates with HIE was significantly higher than normal control（P0.01）.Conclusion The levels of NSE and CK-BB in cord blood are the symbol reflecting the early damages of brain.Our findings suggest that the levels of NSE and CK-BB in cord blood are reliable biochemical markers
6、 for early estimates of hypoxic-ischemic brain damage and have great value to judging the stage of HIE correctly.Key words hypoxic ischemic encephalopathy;cord blood;neuron-specific enolase;creatinkinase-BB新生儿缺氧缺血性脑病（HIE）是新生儿窒息的严重并发症，可导致脑瘫、2癫痫、智力低下等神经系统后遗症1 。尽管其发病机制尚不十分明确，但亦取得了重要的进展。目前认为 HIE 是一个多因素介
7、导和参与的过程，缺氧缺血后脑能量代谢衰竭、脑血管自动调节功能受损、兴奋性氨基酸大量释放、细胞内Ca2+超载以及大量氧自由基产生、一氧化氮（NO） 、-内啡肽、中性粒细胞及血小板活性因子等作用，致使神经元损伤、脑细胞凋亡，脑功能不同程度损伤。近年来，多种神经生化标志物如神经原特异性烯醇化酶（NSE）S-100、肌酯激酶脑型同工酶（CK-BB） 、胶原纤维酸性蛋白（GFAP） 、髓鞘碱性蛋白（MBP）等的应用为此开辟了一个新的局面。NSE 可作为中枢神经系统受损的标志物24来评价脑损害程度。肌酸激酶 CK 是细胞代谢过程中的一种重要的催化酶，师蔚等报道5 ，早期血清 CK-BB 活性可作为一种量化
8、的特异性生化指标，在 HIE 发病过程中，脐血中 CK-BB 和 NSE 水平是否有某种关联，在判断脑损伤程度、预后方面的作用尚无相关研究。本研究通过脐血测定 CK-BB 和 NSE 水平并与正常对照组分析，旨在探讨其在 HIE 发病中的意义，早期诊断新生儿缺氧缺血性脑损伤及临床分度，现报告如下。1 资料与方法1.1 一般资料 选择新生儿 HIE 患儿 32 例（HIE 组） ，男女不限，胎龄3840 周，诊断均符合 1996 年 10 月杭州会议修订的新生儿 HIE 诊断标准。对照组 20 例，为同期出生的产前均无胎儿窘迫征象，且出生后 1 min Apgar 评分9 分。1.2 标本收集
9、新生儿出生后第一次哭叫前立即钳夹约 20 cm 长的脐带，将2 ml 脐血挤至抗凝试管中，测 CK-BB，另挤 2 ml 于干试管中，凝血后收集血清保存于-70 的冰箱中，待标本收集结束后测定 NSE 水平。1.3 试验方法 NSE 检测试剂盒购于北京邦定公司。按试剂盒说明进行，CK-BB 的测定由日本 Olympus AU 400 全自动生化分析仪测定于 CK 同工酶琼脂糖电泳膜板上，经电泳测出 CK-MB 峰值的百分比计算出 CK-BB。1.4 统计学方法 实验数据采用均数标准差（xs） ，表示各组间比较采用 t 检验，相关性检验用直线相关分析。2 结果2.1 HIE 组与对照组 CK-B
10、B 与 NSE 水平的比较 见表 1。HIE 组脐血 CK-BB与 NSE 水平明显高于对照组（P0.01） 。表 1 对照组与 HIE 组血中 NSE 及 CK-BB 比较 2.2 HIE 组脐血 CK-BB 与 NSE 水平的相关性分析 见图 1。由图可见 HIE组脐血 CK-BB 与 NSE 水平呈正相关。3 讨论3.1 NSE 与新生儿 HIE 的关系 神经元特异性烯醇化酶是 型烯醇化酶，主要存在于神经元、神经纤维和神经内分泌细胞（APUD）细胞中，占脑内全部可3溶性蛋白的 1.5%，在糖酵解过程中催化 2-磷酸甘油酸与磷酸烯醇式丙酮酸互相转化，缺血缺氧性脑损伤时神经元细胞膜完整性破坏
11、，胞浆内丰富的 NSE 释放至脑脊液和血液中，导致脑脊液和血液图 1 HIE 组脐血 CK-BB 与 NSE 水平的相关性分析NSE 浓度增高。因此测定血或脑脊液中 NSE 浓度可反映脑损伤程度、评价治疗、预测预后。近年来，NSE 作为神经元损伤敏感性的特异性标志其与中枢神经系统疾病的关系己引起了国内外学者的极大关注并逐步用于新生儿疾病。Carcia-Alix6等发现围生期新生儿窒息后血清 NSE 浓度的升高是一个敏感的、可靠的提示较严重脑缺氧缺血损伤的指标。本研究显示，HIE 组患儿脐血 NSE 含量较对照组升高，差异显著。脐血 NSE的变化与 HIE 临床分度基本一致，即脑损伤程度越重，脐
12、血 NSE 水平越高，提示NSE 与脑损伤程度呈正相关。因此我们认为脐血 NSE 水平可作为早期判断 HIE 脑损伤程度灵敏而可靠的指标。3.2 CK-BB 与新生儿 HIE 的关系 CK-BB 是脑细胞能量代谢过程中重要的催化酶，当脑细胞受到损害时，可从细胞内释放。有学者指出，脑脊液中 CK-BB 是脑损伤的特异性指标7，8 ，理论上讲脑脊液 CK-BB 活性改变更直接和准确，但脑脊液的采集需行脑室穿刺或腰穿，这在脑损伤患者要冒手术的风险或诱发脑疝的危险性较强，有研究表明，血清 CK-BB 分析可取代脑脊液 CK-BB 活性检测，且采集方便，易动态监测，与 HIE 近期与远期预后均有较好的相
13、关性。本研究显示，HIE 组患儿脐血 CK-BB 含量较对照组升高，这与许多学者报道的 HIE 新生儿CSF 中 CK-BB 水平变化相类似。因此，HIE 患儿进行 CK-BB 水平测定是早期诊断缺氧缺血性脑损伤，评价病变程度，判断预后的重要指标。3.3 NSE、CK-BB 与新生儿 HIE 的关系 通过本文研究表明，HIE 组脐血 NSE和 CK-BB 升高明显，与其严重程度呈正相关；NSE 反映了神经元损伤、细胞凋亡的存在和程度。两者结合可以有助于判断 HIE 的程度。【参考文献】1 韩玉昆.新生儿缺氧缺血性脑病诊断依据和临床分度.中华儿科杂志，1997，35（2）：99-100.2 Mo
14、kuna K，Kato K，Kwai K，et al.Neuron specific enolase and S-100 protein levels in cerebrospinal fluid of patients with various neurological diseases.J Neurosci，1993,60:443.3 Persson L，Hardemark HG，Gustagsson J,et al.S-100 and neuron specific enolase in cerebrospinal fluid and serumxnarleys of cell dama
15、ge in human central neryous system.Stroke,1987,18:91.4 Marangos PJ.Neuron specific enolase a clinicallyuseful and er 4for neurons and neuroendoorine cells.Annu Rev Neurosci，1987,10:269.5 师蔚，陈泽寰，刘授勋,等.急性颅脑损伤患者脑脊液中脑型肌酸激酶同工酶活性测定的临床意义.中华神经外科杂志,1994,10：117.6 Cacia-Alix A，Cabanas F，Pellicer A，et al.Neuron specific enolase and myelin protein relationship of cerebrospinal fluid concentions to the neurologic condition of asphyxiated fullterm infants.Pediatrics，1994,93（2）:234-236.7 李林，吴鸿勋.颅脑外伤后血清和脑脊液 CK-BB 测定.中华创伤杂志,1991,7:56.8 姚裕家，李顺品，李炜如.缺氧缺血性脑病血和脑脊液 LDH，CK 及同工酶分析和相关性研究.中国围产医学杂志，1999,2:27-29.
