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1、1外植体用于组织培养（离体培养）的植物材料，如根、茎、叶、花药、胚珠等。2离体培养指从植物体分离符合需要的组织，器官或细胞（包括去壁后的原生质体、离开花药的花粉细胞等）等作为外植体，通过无菌操作，在人工控制条件下进行培养，以获得再生的完整植株或生产具有经济价值的其他生物产品的一种技术。3不定芽在植物离体培养中，由外植体脱分化形成愈伤组织，继而形成一些分生细胞，分化形成一些芽丛，这些芽即是不定芽。4细胞全能性一个完整的植物细胞拥有形成一个完整植株所必需的全部遗传信息，植物细胞在适宜条件下具有发育成完整植株的潜在能力。5胞质杂种所谓胞质杂种（Cybrid）是指一个物种的细胞质（不包括核基因组）基因
2、与另一个物种的细胞质和胞核基因融合为一体的体细胞杂种产物。6继代培养组织培养中，培养物培养一段时间后，为了防止培养的细胞团老化，或培养基养分利用完而造成营养不良及代谢物过多积累毒害等的影响，要及时将其转接到新鲜培养基中进行培养。7胚状体所谓胚状体（embryoid）：指在组织和细胞培养中产生的在形态结构上与合子胚相类似的结构。对称体细胞胚（Somaticembryo），简称体胚。8原生质体培养原生质体就是除去细胞壁后的裸露细胞，经分离纯化的原生质体作为外植体，在适当的培养基和培养条件下进行组织培养的方法。9.体细胞杂交体细胞杂交（Somatichybridisation），或称原生质体融合，是
3、以植物体细胞原生质体为亲本进行融合而获得杂种后代的一种细胞工程技术10.愈伤组织培养答：是一团没有分化的可以持续旺盛分裂的细胞团，是组织培养过程中经常出现的一种组织形态。有致密和疏松两类之分。11.单倍体育种答：通过花药或花粉培养获得的单倍体植株，经过秋水仙素等加倍成纯合二倍体。12.灭菌答：组织培养中，器皿和培养基可以分别采用干热灭菌和湿热灭菌。器皿一般可以用酒精灯火焰灼烧等高温灭菌；而培养基则通常采用高压灭菌锅121灭菌1825分钟。植物材料用升汞灭菌。13.玻璃化现象答：试管苗生长异常，叶、嫩梢呈透明或半透明的水浸状，整株矮小肿胀，失绿，叶片皱缩成纵向卷曲，脆弱易碎。14.植物生长调节物
4、质答：对植物外植体愈伤组织的诱导和根、芽等器官分化，起着重要的调节作用。包括生长素类（IAA、NAA、2，4-D等）、细胞分裂素类（ZT、KT、BA等）、以及赤霉素、脱落酸等。15.无菌操作答：在超净工作台中，切割植物材料、接种外植体等，尽可能避免细菌、真菌的污染的操作过程。16.脱分化答：一个已停止分裂的成熟细胞转变为分生状态，并形成未分化的愈伤组织的现象称为脱分化。17.母液答：便于实验操作，从而配置的高于工作液浓度若干倍的贮液。例如，MS培养基的母液：可以配浓度是实际培养基中浓度的50-100倍的6种母液。另外BA和NAA等激素也可以配成激素母液。18.再分化：原分化状态的细胞去分化培养
5、后再次的分化。19.植板率：植板率（%）=每平板新形成的细胞团数/梅平板接种细胞数10020.超低温保存：指低于-80的低温，主要是在液氮（-196）条件下保存植物材料。21、低温保存法：0-5左右低温下组织培养，以低温限制生长从而保存培养材料的方法。低温保存又称最小生长法。是20世纪70年代发展起来的技术。是将外植体所再生的试管苗在低温条件下，结合某些特定的培养基，例如增加蔗糖浓度、添加甘露醇、山梨醇、脱落酸（ABA）等生长延缓因子，辅以培养环境的控制，从而抑制或者延缓生长，延长寿命，达到保存种质的目的。保存物处于缓慢生长或者无生长的状态下，需要时可迅速恢复生长。22、悬浮细胞培养：是指把离
6、体的植物细胞悬浮在液体培养基中进行无菌培养的技术，它是从愈伤组织的液体培养技术基础上发展起来的一种新的培养技术，此项技术目前已发展到全自动控制的大容积发酵罐大规模工业生产的连续培养。23、单细胞培养：是指从植物器官或愈伤组织游离出的单个细胞的无菌培养。24、培养基：是供微生物、植物和动物组织生长和维持用的人工配制的养料，一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐（包括微量元素）以及维生素和水等。25、子房培养：即指离体条件下子房的无菌培养技术，子房既可是已授粉的，也可是未授粉的。二填空题（每空1分）1培养基一般采用 湿热灭菌 。2连续培养有开放式连续培养和封闭式连续培养两种方式。3 试管受精可以利
7、用子房培养和胚珠培养。4培养皿消毒常用干热法。5单细胞的培养方法主要有看护培养法、微室培养法、平板培养法。6原生质体是指除去细胞壁后的裸露细胞。7茎尖培养的意义有脱毒、快繁、形态建成研究、和育种应用中的研究四个方面。8原生质体融合的主要方法有化学融合法；物理融合法。9培养室的光照因子有光照强度、光照时间、光质三个方面。10消毒剂HgCl2常用的浓度是0.1-0.2%。11.离体培养中最常用的生长素是_NAA_。12.离体培养中最易诱导愈伤组织的生长素是 2，4D 。13.形态发生的途径有_器官_发生和_胚胎_发生两条主要途径。14.母液的配制可减少_称量的误差_，也可减少_工作量_。15.二倍
8、体植株花粉培养可以获得_单_倍体植株，胚乳培养可以获得_三_倍体植株。16._Haberlandt_创造性地提出了细胞全能性观点。17.胚状体必须具备_两_极性，不定芽具备_单_极性。18.培养室的温度一般控制在_25_左右。19生根时要求无机离子浓度较_低_。20子房培养的主要目的是_试管授精_。21 二倍体子叶离体培养产生的植株是_2_倍体。22用于单倍体人工加倍的常用药剂是_秋水仙素_。23.植物种质资源离体保存的主要方式有_超低温_保存和_低温_保存。24.由二倍体胚乳培养可以获得_三_倍体植株，经秋水仙素处理可以获得_六_倍体植株。25.不同的灭菌剂其灭菌的机理一般不一样，次氯酸钙和
9、次氯酸钠都是利用分解产生_氯气_来杀菌的；升汞是靠_重金属_Hg_离子_来达到灭菌目的。26.在组织培养中，不耐热的物质用_过滤灭菌_法灭菌，而培养基常用_湿热灭菌_法灭菌。27.6-BA/NAA的高低决定了外植体的发育方向，比值_低_促进根的生长，这时_生长素NAA_占主导地位；比值_高_促进芽的生长，这时_细胞分裂素BA_占主导地位。28.花药培养是_器官_培养，花粉培养属于_细胞_培养，但二者的培养目的一样，都是要诱导花粉细胞发育成单倍体细胞，最后发育成_纯合二倍体_。29.一个已停止分裂的成熟细胞转变为分生状态，并形成未分化的愈伤组织的现象称为_脱分化_。30.愈伤组织的形态发生有_致
10、密_和_疏松_两种情况。31.原生质体的分离有_机械法_和_酶解法_两种方法。32.植物组织培养过程中，最常用的培养基是MS、，培养基的pH因外植体的来源不同而异，常用HCL和NaOH调节pH，大多数植物的pH要求调节在5.66.0范围内。、33.可以通过适宜外植体、最佳的培养基、连续转接、加抗氧化剂、加活性炭等措施预防褐变的发生。34.植物组织培养时，外植体可以是器官、组织、细胞、去掉细胞壁的原生质体35.茎尖微繁殖过程一般包括五个阶段，即无菌砧木、茎尖准备、嫁接、嫁接苗培养、移植36.组织培养植株的再生途径有两条：一是器官发生，另一是、胚胎发生。37.在配制培养基时，可以在培养基中添加活性
11、炭，利用其吸附能力，可以降低褐变的发生，但它对物质的吸附、无选择性。38.培养基的高压灭菌温度为12139.组织培养中常用的生长素有吲哆乙酸（IAA），2，4-二氯苯氧乙酸（2，4-D），吲哆丁酸（IBA），萘乙酸（NAA），它们的作用强弱顺序为2，4-D、NAA、IBA、IAA40.无菌外植体的建立、芽的增殖、中间繁殖体的增殖、诱导生根、试管苗的移栽。41、茎尖分生组织培养的目的主要是脱毒，其茎尖一般取0.1毫米。为了使脱毒效果更好，可以将茎尖分生组织培养与热处理结合起来。脱毒处理的试管苗，在用于生产之前，必须进行病毒检。42.细菌、真菌三判断题（每题1分） 1 纤维素酶可以用高压灭菌。（）
12、 2 通过愈伤组织形成的植株不易产生变异。（） 3 2，4-D一般容易诱导愈伤组织的产生。（） 4 生根培养基中必须加入较高浓度的细胞分裂素。（） 5 由于细胞具有全能性，很老的组织也能容易再生植株。（） 6 原生质体融合也叫体细胞杂交。（） 7 变异体就是突变体。（） 8 核内有丝分裂是组织培养中染色体加倍的重要原因之一。（） 9 接种室常用的消毒剂是0.2%的HgCl2。（） 10 培养室的温度常控制在25左右。（） 11 茎尖培养可以达到脱毒的目的。（） 12 脱毒苗不等于抗病毒苗。（） 13 DMSO是较常用的冷冻保护剂。（） 14 酶的灭菌多采用过滤灭菌。（） 15 人参皂苷可以通过
13、大规模的细胞培养产生。（） 16 离体培养和组织培养是相同的意思。（） 17 茎段培养也是细胞培养。（） 18 器官培养主要是用于离体受精。（） 19 经HgCl2消毒后的材料要冲洗12次。（） 20 根部细胞不具备细胞全能性。（） 21 光质对组织培养没有什么影响。（） 22 为了诱导根的发生在培养基中主要应加BA。（） 23 所有的细胞分裂素都是天然存在的。（） 24 愈伤组织没有明显的结构。（） 25 所有的离体培养再生植株都是必须经过愈伤组织途径。（） 26 超净工作台在工作情况下台内100%无菌。（） 27 培养室的温度控制主要靠光照的强弱。（） 28 灭菌室一般应有干热灭菌和湿热灭菌两种方式。（） 29 在接种时镊子和解剖刀一般应准备两套。（） 30 材料灭菌时可用70%乙醇浸泡5分钟。（） 31 环境的相对湿度可以影响培养基的水分蒸发，一般要求80-90的相对湿度。32 幼年细胞和组织比成年细胞和组织诱导愈伤组织容易。 33 一般的说，PH值高于6.5时，培养基会完成凝固。 34 在配制6-BA母液时，要先加少量的1mol/L的HCl溶解，再加蒸馏水定容。 35 未成熟胚较小，易培养；成熟胚较大，不易培养。 36 MS培养基无机盐浓度低，适合生根培养。 37 由性细胞发育而成的胚叫做胚状体，而由体细胞发育而成的胚叫做合子胚。
