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1、专题1 基因工程 1.1 DNA重组技术的基本工具（练）1.基因工程操作所使用的工具中，被称为基因“剪刀”的是（ ）A限制酶 BDNA连接酶CDNA聚合酶 DRNA聚合酶【答案】A2.不属于质粒被选为基因运载体的理由是：（ ）A能复制 B有多个限制酶切点C具有标记基因 D它是环状DNA【答案】D【解析】作为运载体能在受体细胞中友好寄居且自主复制有多个限制酶切点，为了便于检测，常常选择具有标记基因的质粒，至于运载体是不是环状并不重要，所以选D。3.下列关于DNA连接酶的叙述，正确的是（ ）ADNA连接酶连接的是两条链碱基对之间的氢键BDNA连接酶连接的是黏性末端两条链主链上的磷酸和脱氧核糖CDN
2、A连接酶连接的是黏性末端两条链主链上的磷酸和核糖D同一种DNA连接酶可以切出不同的黏性末端【答案】B【解析】解：A、DNA连接酶连接的是两个DNA片段之间的磷酸二酯键，A错误；BC、DNA连接酶连接的是黏性末端两条链主链上的磷酸和脱氧核糖，B正确，C错误；D、DNA连接酶不能切割DNA形成黏性末端，D错误4.属于“分子缝合针”的是（ ）EcoliDNA连接酶 T4DNA连接酶 DNA聚合酶 解旋酶 RNA聚合酶A B C D【答案】B【解析】Ecoli DNA连接酶是在两个DNA片段之间形成磷酸二酯键，正确；T4DNA连接酶是在两个DNA片段之间形成磷酸二酯键，正确；DNA聚合酶能将单个脱氧核
3、苷酸加到已有的核苷酸片段上，形成磷酸二酯键，错误； 解旋酶能使DNA双链解开，断裂的键是氢键，错误；RNA聚合酶能催化转录过程，形成磷酸二酯键，合成的是mRNA，错误。5.限制酶能识别特定的DNA序列并进行剪切，不同的限制酶可以对不同的核酸序列进行剪切。现用E、H、P三种不同的限制酶对一段大小62kb的线状DNA进行剪切后，用凝胶电泳分离各核酸片段，实验结果如图所示，这3种不同的限制酶在此DNA片段上相应切点的位置是（ ）【答案】D6.下图为DNA分子的某一片段，其中分别表示某种酶的作用部位，则相应的酶依次是（ ）ADNA连接酶、限制性内切酶、解旋酶B限制性内切酶、解旋酶、DNA连接酶C解旋酶
4、、限制性内切酶、DNA连接酶D限制性内切酶、DNA连接酶、解旋酶【答案】C【解析】处为氢键，是解旋酶的作用部位；处为磷酸二酯键，是限制酶的作用部位；处为两个DNA片段的缺口，是DNA连接酶的作用部位。7下图表示一项重要生物技术的关键步骤，X是获得外源基因并能够表达的细胞。下列有关说法不正确的是（ ）AX是能合成胰岛素的细菌细胞B质粒是细胞核或拟核外能自主复制的小型环状DNAC目的基因与质粒的重组只需要DNA连接酶D该细菌的性状被定向改造【答案】C【解析】根据题意和图示分析可知：重组质粒导入的是细菌细胞，所以X是能合成胰岛素的细菌细胞，A正确；质粒是一种常用运载体，是在细胞核或拟核外能自主复制的
5、小型环状DNA，B正确。基因与运载体的重组需要限制性核酸内切酶和DNA连接酶，C错误。基因工程的特点是能够定向改造生物的性状，D正确。8在基因工程中用来修饰改造生物基因的工具是（ ） A限制酶和DNA连接酶 B限制酶和水解酶C限制酶和运载体 DDNA连接酶和运载体【答案】A9下列有关基因工程的叙述正确的是（ ）A质粒上的目的基因必须整合到受体细胞的DNA上才能不被分解B以蛋白质的氨基酸序列为依据合成的目的基因与原基因的碱基序列相同C没有与目的基因重组的质粒也可以进入受体细胞D质粒运载体可能是从细菌或者病毒的DNA改造的【答案】C【解析】用质粒作为运载体时，质粒上的目的基因不需要整合到受体细胞的
6、DNA上，用病毒或噬菌体作为运载体时，目的基因需整合到受体细胞DNA上，A错误；由于一种氨基酸的密码子可能有多种，所以以蛋白质的氨基酸序列为依据合成的目的基因与原基因的碱基序列不一定相同，B错误；没有与目的基因重组的普通质粒也可以进入受体细胞，C正确；病毒是非细胞结构的生物，没有质粒，D错误。10如图所示，若用两种识别切割序列完全不同的限制酶E和F从基因组DNA上切下目的基因，并将之取代质粒pZHZ1(3.7kb，1kb=1000对碱基)上相应的EF区域 (0.2kb)，那么所形成的重组质粒pZHZ2（ ）A既能被E也能被F切开 B能被E但不能被F切开C既不能被E也不能被F切开 D能被F但不能
7、被E切开【答案】 A【解析】由于限制酶具有特异性，同种限制酶切割形成的黏性末端相同因此由题意可知，限制酶E和F分别切割目的基因和质粒后，目的基因上的两个黏性末端与质粒上的两个黏性末端分别完全相同，因此形成重组质粒后，仍然具有这两种酶的识别序列，所以既能被E也能被F切开11下图所示为某质粒被BamHI切割后得到一个线性载体DNA，经过末端核苷酸转移酶作用将多个相同的脱氧核苷三磷酸（dATP或dTTP或dCTP或dGTP）连续加到切割后的两个黏性末端上。相关说法错误的是（ ）末端核苷酸转移酶+dATPA末端核苷酸转移酶作用时不需要模板链B末端核苷酸转移酶的作用是催化形成磷酸二酯键C末端核苷酸转移酶
8、的作用特点与DNA连接酶相同D该技术的重要意义是防止线性载体DNA自身环化【答案】CC、末端核苷酸转移酶的作用是将多个相同的脱氧核苷三磷酸连续加到切割后的两个黏性末端上,而DNA连接酶是将具有相同黏性末端的DNA片段连接起来,两者的作用特点不同,C错误;D、末端核苷酸转移酶的作用是将多个相同的脱氧核苷三磷酸连续加到切割后的两个黏性末端上,这样可以防止线性载体DNA自身环化,D正确.12基因工程中，需使用特定的限制性核酸内切酶切割目的基因和质粒，便于重组和筛选。已知限制性核酸内切酶I的识别序列和切点是一GGATCC一，限制性核酸内切酶的识别序列和切点是一GATC一，根据图示判断下列叙述正确的是(
9、 )A用限制性核酸内切酶切割获得目的基因时，有2个磷酸二酯键被水解B质粒用限制性核酸内切酶I切割，形成2个黏性末端C目的基因用限制性核酸内切酶切割，有8个氢键被破坏 D酶I和酶切割后获得的黏性末端相同，只能用T4DNA连接酶来连接【答案】B13如表所示列出了几种限制酶识别序列及其切割位点，图1、图2中箭头表示相关限制酶的酶切位点下列说法错误的是（ ）A一个图1所示的质粒分子经Sma切割后，含有4个游离的磷酸基团B用图1中的质粒和图2中的目的基因构建重组质粒，不能使用Sma切割C图2中为防止酶切后单个含目的基因的DNA片段自身连接成环状，不能使用EcoRD为了获取重组质粒，最好用BamH和Hin
10、d同时切割质粒和外DNA【答案】AC、由于同种限制酶切割形成的黏性末端相同，图2中为防止酶切后单个含目的基因的DNA片段自身连接成环状，不能使用EcoR，C正确；D、使用BamH和Hind两种限制酶同时处理质粒、外源DNA，各自会有不同黏性末端，能防止自身环化，D正确14下图所示，若用两种识别切割序列完全不向的限制酶E和P从基因组DNA上切下目的基因,并将之取代质粒pZHZl（37kb, lkb=1000对碱基）上相应的EF 区域（02kb）V，那么所形成的重组质粒 pZHZ2 （ ）A既能被E也能被F切开 B能被E但不能被F切开 C既不能被E也不能被F切开 D能被F但不能被E切开【答案】A【
11、解析】由于限制酶具有特异性，同种限制酶切割形成的黏性末端相同因此由题意可知，限制酶E和F分别切割目的基因和质粒后，目的基因上的两个黏性末端与质粒上的两个黏性末端分别完全相同，因此形成重组质粒后，仍然具有这两种酶的识别序列，所以既能被E也能被F切开。15人们试图利用基因工程的方法，用乙种生物生产甲种生物的一种蛋白质生产流程是：甲生物的蛋白质mRNA目的基因与质粒DNA重组导入乙细胞获得甲生物的蛋白质，下列说法正确的是（ ）A过程需要的酶是逆转录酶，原料是A、U、G、CB要用限制酶切断质粒DNA，再用DNA连接酶将目的基因与质粒连接在一起C如果受体细胞是细菌，可以选用枯草杆菌、炭疽杆菌等D过程中用
12、的原料不含有A、U、G、C【答案】B故选：B16现有一长度为1000碱基对(by）的DNA分子，用限制性核酸内切酶Eco R1酶切后得到的DNA分子仍是1000 by，用Kpn1单独酶切得到400 by和600 by两种长度的DNA分子，用EcoRI、Kpnl同时酶切后得到200 by和600 by两种长度的DNA分子。该DNA分子的酶切图谱正确的是（ ）A. B. C. D. 【答案】D【解析】试题分析：A、A选项中的DNA用Kpnl单独酶切会得到600by和200by两种长度的DNA分子，与题意不符，A错误；B、B选项中的DNA用EcoRI单独酶切会得到800by和200by两种长度的DN
13、A分子，与题意不符，B错误；C、C选项中的DNA用EcoR1酶切后得到200by和800by两种长度的DNA分子，与题意不符，C错误；D、D选项中的DNA用EcoR1酶切后得到的DNA分子是1000by，用Kpn1单独酶切得到400by和600by两种长度的DNA分子，用EcoRI、Kpnl同时酶切后得到200by和600by两种长度的DNA分子，与题意相符，D正确17将ada（腺苷酸脱氨酶基因）通过质粒pET28b导入大肠杆菌并成功表达腺苷酸脱氨酶下列叙述错误的是（ ）A每个大肠杆菌细胞至少含一个重细胞质粒B每个重组质粒至少含一个限制性核酸内切酶识别位点C每个限制性核酸内切酶识别位点至少插入
14、一个adaD每个插入的ada至少表达一个腺苷酸脱氨酶分子【答案】CD、题中提出腺苷酸脱氨酶得到成功表达，因此每个大肠杆菌的ada至少表达一个腺苷酸脱氨酶分子，D正确18下图1表示某细菌的抗除草剂基因的部分片段，其中a、b、c分别表示该基因片段中特定的碱基对。图2表示该细菌细胞内DNA自我复制及控制多肽合成的过程。下列有关说法正确的是（ ）A图2中的分别指的是复制、转录和翻译，在真核细胞内，只能发生在细胞核内B过程需要DNA聚合酶的催化C完成时，一般在一条mRNA上会结合多个核糖体，其意义是提高翻译的效率（短时间内合成大量蛋白质）D若将此抗除草剂基因转入大豆根细胞中，欲检测转基因是否成功，应将转入目的基因的细胞培养在含青霉素的全营养固体培养基中【答案】 C19.中国科学院成都生物研究所发现了“一种剪切DNA的DNA酶”，命名为脱氧核酶，并获国家知识产权局发明专利，脱氧核酶是利用体外分子进化技术合成的一种具有催化功能的单链DNA片段，具有高效的催化活性和结构识别能力，与限制酶类似。据此，下列说法正确的是（ ）A. 脱氧核酶的化学本
