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1、,克隆羊多莉,伊恩维尔莫特与克隆羊多利,动物细胞工程常用的技术手段,基础,动物细胞培养 动物细胞核移植 动物细胞融合 生产单克隆抗体等,2.2 动物细胞工程,2.2.1 动物细胞培养和核移植技术,重点 动物细胞培养的过程及条件。 用动物体细胞核移植技术克隆动物的过程。 难点 用动物体细胞核移植技术克隆动物的过程。,大面积烧伤怎么办？,一、动物细胞培养,动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后，放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。,动物胚胎或幼龄动物的组织、器官,细胞悬浮液,10代细胞,传代培养,无限传代,单个细胞,加培养液,（分解弹性纤维）,过程：,动物组织细
2、胞间隙中含有一定量的弹性纤维等蛋白质，将细胞网络起来形成具有一定弹性和韧性的组织和器官。,关键词: 细胞贴壁 接触抑制 原代培养 传代培养 细胞株 细胞系,补充合成培养基中缺乏的物质,动物细胞培养条件,1、无菌、无毒的环境 （添加一定量的抗生素，定期更换培养液）,2、营养 （葡萄糖、氨基酸、无机盐、微量元素、动物血清、血浆等。）,3、温度和PH 36.5 +0.5度 ；PH为7.2-7.4。,4、气体环境： O2和CO2（95%空气和5% CO2 ）,（1）生产蛋白质生物制品：病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体等。 （2）获得大量自身的皮肤细胞，用于植皮。 （3）用于检测有毒物质 （4）用于生理、病
3、理、药理等方面的研究，为治疗和预防疾病提供理论依据,动物细胞培养技术的应用,细胞的全能性,细胞株、细胞系,植物体或组织,培养结果,快速繁殖、培育无病毒植株等,培养目的,葡萄糖、动物血清,蔗糖、植物激素,培养基特有成分,液体培养基,固体培养基,培养基性质,细胞增殖,原理,动物细胞培养,植物组织培养,比较项目,试一试,二、动物细胞核移植技术和克隆动物,概念：动物核移植是将动物的一个细胞的细胞核，移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成 一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育为动物个体。也称克隆动物。,核移植分为：胚胎细胞核移植和体细胞核移植两类。,解决某些妊娠时间长、每胎产子数量少的优良种
4、畜的繁殖速度问题。,动物细胞核移植技术和克隆动物,重组细胞,早期胚胎,另一头母绵羊(C)子宫,克隆绵羊“多莉”,母羊（B） 乳腺细胞核,母羊（A） 去核卵细胞,体细胞核移植（克隆动物）过程,供体细胞（供核）,细胞培养,体细胞,卵巢卵母细胞（M中期：供质）,去核,无核卵母细胞,注入,细胞融合,重组细胞,构建重组胚胎,胚胎移植,代孕母体,生出与供体奶牛遗传基础相同的犊牛,归纳: 1.共分成两大阶段：核移植和胚胎移植 2.取卵细胞作受体细胞的原因是:它是最大的细胞,易操作,它发育可直接表达性状 同时其可为细胞核的全能性表达提供物质基础 3.严格来说新个体有卵母细胞的细胞质所以有两个亲本的性状,核移植
5、过程,原理：细胞核的全能性,体细胞核移植技术的应用前景,1、改良动物品种 2、保护濒危动物 3、克隆动物作为生物反应器，生产医用蛋白 4、治疗人类疾病，作为供体,体细胞核移植技术的应用前景,体细胞核移植技术存在的问题,1、成功率非常低； 2、许多克隆动物表现出遗传和生理缺陷，如体型过大，异常肥胖，发育困难，脏器缺陷，免疫失调等； 3、克隆动物食品的安全性问题。,知识结构,动物细胞培养 和核移植技术,动物细胞培养,细胞培养的应用和概念,细胞培养的过程,细胞培养的条件,细胞培养技术的应用,动物体细胞核移植 技术和克隆动物,核移植技术和克隆动物的概念,体细胞核移植技术的过程,体细胞核移植技术的应用前
6、景,体细胞核移植技术存在的问题,1、在动物细胞培养过程中遗传物质发生改变的细胞是（ ） A细胞系 B细胞株 C原代细胞 D传代细胞,2、动物细胞工程技术的基础是（ ） A.动物细胞融合 B.单克隆抗体 C.胚胎移植 D.动物细胞培养,A,D,练一练,3、用于动物细胞培养的组织和细胞大都取自胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织，其主要原因是这样的组织细胞 （ ） A.容易产生各种变异 B具有更强的全能性 C.取材十分方便 D分裂增殖的能力强,D,4.动物细胞培养与植物细胞培养的重要区别在于（ ） A.培养基不同； B.动物细胞培养不需要在无菌条件下进行； C.动物细胞可以传代培养，而植物细胞不能； D.动物细胞能够大量培养，而植物细胞只能培 养成植株。,A,
