《【最新word论文】酶联免疫法与胶体金法结合判断HBsAg准确性的探讨【临床医学专业论文】》由会员分享，可在线阅读，更多相关《【最新word论文】酶联免疫法与胶体金法结合判断HBsAg准确性的探讨【临床医学专业论文】（3页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、1酶联免疫法与胶体金法结合判断 HBsAg 准确性的探讨【关键词】 酶免疫测定 胶体金 肝炎表面抗原 乙型现在乙型肝炎表面抗原(HBsAg)的检测已经非常普遍，但由于受检测方法的限制和乙肝感染的病程及标本的采集、操作等因素的影响，经常出现 HBsAg 检测的假阳性和假阴性现象1 。目前 HBsAg 的检测方法临床实验室中多采用胶体金法（GIA）和酶联免疫法（EIA） 。为提高检测的准确性，笔者对 HBsAg 的检测方案作了探讨，通过近一年的实践总结，酶联免疫试剂与胶体金试剂相结合对检测HBsAg 的准确性大有提高，几乎避免了假阳性和假阴性的发生，现报告如下：1 材料与方法1.1 标本 来源于
2、2006 年 112 月我院住院和门诊病人送检的 HBsAg 和乙肝两对半血液标本，不抗凝，保证正确处理血液标本得到待检血清，共计 5819 份。1.2 试剂酶联免疫试剂盒：科华、新创生产（选用年报批量前 3 名的试剂） ；胶体金试剂：新创生产（通过对比几个厂家，选用灵敏度最好的） ；HBsAg 确认试剂：雅培（Murex）公司生产；所有试剂均按说明书进行操作。1.3 仪器酶标仪：芬兰 MK-3 雷勃酶标仪；洗板机：科华 ST-36W 洗板机1.4 方法 所有初检标本先选用一个厂家的酶联免疫试剂检测，以酶标仪读数为准，按S/C.O.分类：S/C.O.1 的标本即 EIA 法阳性者，再用胶体金试
3、剂测试，若亦为阳性者即报告阳性；若为阴性者，则再用两种酶联免疫试剂做双孔复检，两种试剂均重复为阳性者则报告阳性；反之，建议做中和确认试验或 PCR 检测 HBV-DNA 来报结果。对于 S/C.O.介于 0.51 的标本，再用两种酶联免疫试剂做双孔复检，两种试剂均重复为阳性者则报告阳性；反之，建议做中和确认试验或PCR 检测 HBV-DNA 来报结果。对于 S/C.O.0.5 的标本直接报告为阴性。1.5 其他如果受检者须在极短的时间内得到检测结果或标本出现严重溶血、脂血等状态而无法重新采集时，则直接选用胶体金试剂进行检测。在检测结果中必须注明检测方法为 GIA，必要时通知重新采样再用酶联免疫
4、试剂复检。2 结果22.1 酶联免疫试剂初检 5819 份标本，其中 S/C.O.1 为阳性者 426 份； S/C.O.介于 0.51 者 28 份；S/C.O.0.5 为阴性者 5365 份。2.2 对 S/C.O.1 为阳性者 426 份再次用胶体金试剂全部重复检测，重复阳性者有 411 份直接报告阳性，还有 15 份为阴性者。2.3 对以上 S/C.O. 介于 0.51 者 28 份和酶联免疫试剂阳性而胶体金试剂阴性者 15 份共计 43 份，再用两种酶联免疫试剂做双孔复检。2.4 再同时用 HBsAg 中和确认试剂复检。结果见表 1。 表 1 EIA 与 GIA 检测结果（略）3 讨
5、论尽管 EIA 的灵敏度和特异性比较高，但影响酶联免疫试剂检测结果的因素较多，如：血液样本的处理、加样操作、温育洗板、比色判读、质控的好坏、试剂盒的质量直接决定了结果的准确性，也就是说检测过程中偶然误差出现机率较大，在此不做讨论；通过采用敏感性和特异性均低于 EIA 的 GIA 复检，其偶然误差大大低于 EIA，相互结合、优势互补，经济、快速、准确2 。有资料证明3 ，在我国的乙型肝炎病毒感染人群中，有一部分血清HBsAg 呈低水平状态存在，HBsAg 蛋白的决定簇结构突变，造成不同的 HBsAg 试剂对突变株的检测能力不同，这些不同可能造成不一致的检测结果；血液中某些因子或药物的干扰，造成标
6、本出现用酶联免疫试剂检测 S/C.O.值介于 0.51 之间，及酶联免疫试剂阳性而胶体金试剂阴性者。对于用酶联免疫试剂检测 S/C.O.值介于 0.51 之间的标本，及酶联免疫试剂阳性而胶体金试剂阴性者，通过两种酶联免疫试剂盒的双孔复检核对，HBsAg 检测的准确性大大提高4 。对于一些疑难特殊的标本可作 HBsAg 中和确认试剂得到可靠结果。在本观察中，S/C.O.介于 0.51 者 28 份，双孔复检和中和确认均检出 2 份阳性；酶联免疫试剂阳性而胶体金试剂阴性者 15 份，双孔复检出 11 份阳性，中和确认结果 10 份阳性，二者检测结果基本相符。两者联合，使检测结果的准确度大为提高，值得在临床推广。【参考文献】1陈宏伟.两种方法检测 HBsAg 假阳性和假阴性影响因素的探讨J.华北煤炭医学院学报，2006，8(5)：641.2肖征，董立.乙肝表面抗原检测中的偶然误差及对策J.中华医院感染学杂志，2003，13(3)：292-294.3Peng Yin.乙型肝炎病毒编码 HBsAg 区基因突变对免疫检测的影响3J.中华检验医学杂志，2005，28(7)：687-689.4骆抗先.乙型肝炎的基础与临床J.2 版.北京：人民卫生出版社，2001.
