《2018-2019学年高中生物 专题1 基因工程 1.2《基因工程的基本操作程序》课件 新人教版选修3》由会员分享,可在线阅读,更多相关《2018-2019学年高中生物 专题1 基因工程 1.2《基因工程的基本操作程序》课件 新人教版选修3(21页珍藏版)》请在金锄头文库上搜索。
1、,专题一 基因工程,1.2基因工程的基本操作程序,提取目的基因的方法 目的基因导入受体细胞的途径。 基因工程基本操作程序的四个步骤。 从基因文库中获取目的基因。 利用PCR技术扩增目的基因。 简述基因工程的原理和基本步骤。,通过回顾上节课关于基因工程各工具及作用的相关知识,导入本节课的学习,教学整体思路采用从“整体-部分-整体”的教学思路,首先引用基因工程案例使学生从整体上了解基因工程的四个步骤,接着采用分步探究的形式帮助学生理解各个步骤的原理、方法和过程及注意事项, 最后教师引导学生用概念图将所学的知识从整体上再次整合。 本节课的重难点为将目的基因导入受体细胞,可通过教材上的图示,以及相关动
2、画,分别阐述将目的基因导入植物细胞、动物细胞和微生物细胞不同的条件和注意事项,形象直观,重点介绍将目的基因导入植物细胞部分。,一、基因工程别名、操作对象、操作水平、操作环境、实质或原理各是什么 二、限制酶的作用 三、DNA连接酶的作用 四、运输基因的载体必须具备的条件 五、 DNA连接酶与DNA聚合酶的异同,目的基因的获取,基因表达载体的构建,将目的基因导入受体细胞,目的基因的表达和检测,一、基因工程的基本操作程序,1.获取目的基因的方法有哪些? 2.什么叫基因文库,它包括哪些种类? 3.用PCR技术扩增基因需要哪些原料?,1、从基因文库中获取(序列未知),2、利用PCR技术扩增(序列已知),
3、基因文库,基因组文库,部分基因文库如:cDNA文库,聚合酶链式反应,(一)目的基因的获取,3、人工合成,(基因比较小,序列已知),反转录法 根据已知的氨基酸序列合成DNA,(1)从基因文库获取目的基因,返回,根据目的基因的有关信息,如: 基因的已知核苷酸序列; 基因的功能; 基因在染色体上的位置; 基因的转录产物mRNA; 基因的表达产物蛋白质; ,(2)利用PCR技术扩增目的基因,原理:DNA双链复制的原理 过程: 变性(90 95)退火:引物与单链互补结合(55 60) DNA聚合酶作用下延伸(70 75) 条件:DNA模板、引物、DNA聚合酶、四种脱氧核苷酸、能量。,1、基因表达载体包括
4、哪些必需组分? 各成分的作用是什么? 2、转化的概念,将目的基因导入植物、动物、微生物细胞的方法分别有哪些?,(二)将目的基因导入受体细胞,农杆菌转化法 基因枪法 花粉管通道法,受体细胞,植物cell,动物cell,微生物cell,显微注射技术,感受态法,1、将目的基因导入微生物细胞 原核生物特点:繁殖快、单细胞、遗传物质少 方法:,用Ca2+处理细胞 感受态细胞 表 达载体与感受态细胞混合 感受态细胞吸收DNA分子,DNA分子杂交,(三)目的基因的检测和鉴定,基因探针,是一段带有检测标记,且序列已知的,与目的基因互补的核酸序列。 基因探针通过分子杂交与目的基因结合,产生杂交信号,能从浩翰的基
5、因组中把目的基因显示出来。,1、探针需带有一定的标记,可以用什么方法? 2、基因探针有哪些用途?,接种实验,抗原抗体杂交法,DNA-RNA分子杂交法,DNA分子杂交法,1.获取目的基因 从基因文库 利用PCR技术 人工合成,基因工程的基本操作程序,2.构建基因表达载体 目的基因、启动子、终止子、标记基因,3.将目的基因导入受体细胞 农杆菌转化法、基因枪法、花粉管通道法、显微注射法,4.目的基因的检测与鉴定 检测:是否插入、转录、翻译 鉴定:是否有转基因特性,1.以下说法正确的是( ) A、所有的限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列 B、质粒是基因工程中唯一的运载体 C、运载体必须具备的条件之一是
6、:具有多个限制酶切 点,以便与外源基因连接 D、基因控制的性状都能在后代表现出来,C,2.不属于质粒被选为基因运载体的理由是( ) A、能复制 B、有多个限制酶切点 C、具有标记基因 D、它是环状DNA,D,3.有关基因工程的叙述中,错误的是( ) A、DNA连接酶将黏性末端的碱基对连接起来 B、 限制性内切酶用于目的基因的获得 C、目的基因须由运载体导入受体细胞 D、 人工合成目的基因不用限制性内切酶,A,4.有关基因工程的叙述正确的是 ( ) A、限制酶只在获得目的基因时才用 B、重组质粒的形成在细胞内完成 C、质粒都可作为运载体 D、蛋白质的结构可为合成目的基因提供资料,D,5.基因工程
7、是在DNA分子水平上进行设计施工的。在基因操作的基本步骤中,不进行碱基互补配对的步骤是 ( ) A、人工合成目的基因 B、目的基因与运载体结合 C、将目的基因导入受体细胞 D、目的基因的检测和表达,C,练习1:为扩大可耕地面积,增加粮食产量,黄河三角洲等盐碱地的开发利用备受关注。我国科学家应用耐盐基因培育出了耐盐水稻新品系。 (1)将重组DNA分子导入水稻受体细胞的常用方法有农杆菌转化法和 。 (2)由导入目的基因的水稻细胞培养成植株需要利用 技术,该技术的核心是 和 。 (3)为了确定耐盐转基因水稻是否培育成功,既要用放射性同位素标记的 作探针进行分子杂交检测,又要用 方法从个体水平鉴定水稻植株的耐盐性。,基因枪法(花粉管通道法),植物组织培养,脱分化(去分化),耐盐基因(目的基因),一定浓度盐水浇灌(移栽到盐碱地中),