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1、环境毒理学鱼类毒性试验,环境毒理学鱼类毒性试验,主要内容,环境毒理学鱼类毒性试验,1 前言,鱼类是水生食物链的顶级生物，也是水体中最为重 要的经济动物。在污染水体中，当污染物达到一定浓 度时，就会引起鱼类各种中毒反应。在人为控制条件 下，进行各种鱼类毒性实验，不仅用于化学品毒性强 度测定、水体污染程度、废水及其处理效果检查，而 且也为制定水质标准、评价环境质量和管理废水排放 提供科学依据。,环境毒理学鱼类毒性试验,2 目的与要求,通过本实验，熟悉和掌握鱼类急性毒性试验的设 计、条件、操作步骤，以及试验结果的计算、分析和 报告拟写等全过程。,环境毒理学鱼类毒性试验,3 实验原理,污染物浓度达到一
2、定程度,环境毒理学鱼类毒性试验,3 实验原理,确定半数致死浓度（24h LC50、48h LC50、72h LC50和96h LC50），并记录无死亡的最大浓度和导致鱼类全部死亡的最小实验浓度。鱼类急性毒性试验不仅用于测定化学物质毒性强度、测定水体污染程度、检查废水处理的有效程度，也为制定水质标准、评价环境质量和管理废水排放提供环境依据。,表3-1 不同溶液浓度和不同培养时间下鱼类的死亡率,返回,环境毒理学鱼类毒性试验,4 实验材料与实验条件,4.1 实验鱼的选择与驯养,原则,斑马鱼是国际上通用的鱼类急性毒性实验鱼种。本实验以斑马鱼为实验鱼。建议的实验温度21-25，建议实验鱼的全长2.01.
3、0cm。 试验前必须驯养（健康选择）：相同水质水温的水体中至少驯养7d（2个月）、每天换水、每天喂食1-2次、试验前一天应停止喂食、驯养期间试验鱼死亡率不得超过5。,环境毒理学鱼类毒性试验,4 实验材料与实验条件,4.2 实验仪器设备,（1）实验容器 实验容器一般用玻璃或其他化学惰性材质制成 的水族箱或水槽。容器的深度必须超过16cm，水体表面积越大越 好。同一实验应采用相同规格和质量的容器。为防止鱼类跳出容 器，可在容器上加上网罩。实验容器使用后，必须彻底洗净，以 除去所有毒性残留物。 （2）其他 溶解氧测定仪、溶解氧控制仪、水硬度计、温度控 制仪、pH计、分析天平、分光光度计（六价铬：二苯
4、碳酰二肼分 光光度法）、抄网。,环境毒理学鱼类毒性试验,4 实验材料与实验条件,4.3 实验溶液的制备,以重铬酸钾为实验毒物，实验溶液的母液由蒸馏水 配制而成。母液最好每日配各1次，比较稳定的物质也 可以两日配制1次，配好后，最好低温保存。配制好的 母液可以稀释为进行毒性实验的溶液， 以等比或等对 数间距设置浓度系列，相临浓度比值不得超过2.2（母 液3L，50g/L重铬酸钾）。,环境毒理学鱼类毒性试验,4 实验材料与实验条件,4.4 实验用水（稀释水）,高质量的自然水,标准稀释水,天然湖水、河水或地下 水，需要过滤等处理。,实验方法配制,环境毒理学鱼类毒性试验,4 实验材料与实验条件,4.4
5、 实验用水（稀释水）,溶液中钙离子和镁离子的总和是2.5mmol/L。 Ca: Mg为4: 1， Na : K 为10:1。必要时，用氢氧化钠溶液或盐酸调节pH，使其稳定在7.80.2。稀释用水需经曝气直到氧饱和为止，然后储存备用，在使用前不必再曝气。,环境毒理学鱼类毒性试验,4 实验材料与实验条件,4.5 水质条件,环境毒理学鱼类毒性试验,4 实验材料与实验条件,4.6 实验液更换方式,每隔一定时间更换一次试验药液。适用于试验浓度在更换试验药液的时间内保持相对稳定的物质。,试验期间不需更换试验液，限于测定那些化学性质比较稳定的物质。,试验药液连续更新，可用于大多数物质，包括水中不稳定的物质。
6、,静水式,换水式,流水式,环境毒理学鱼类毒性试验,5 实验步骤,第六页,设置跨度较大 的浓度范围,第一阶段预处理：为正式实验确定浓度范围。,第二阶段正式实验：确定不同溶液浓度和不同培养时间下鱼类的死亡率，找出24h、48h、72h、96h时的LC50值。,环境毒理学鱼类毒性试验,6 实验报告,6.1 数据处理,用直线内插法或常用统计程序计算出 24h、48h、72h、96h的半致死浓度（LC50）值，并计算95的置信限。 如果试验数据不适于计算LC50，可用不引起死亡的最高浓度和引起100死亡的最低死亡浓度估算LC50的近似值，即这两个浓度的几何平均值。,环境毒理学鱼类毒性试验,6 实验报告,6.2 毒性分级（结果评价）,表6-1 1990年国家环保局 环境监测技术规范,表6-2 1994年国家环保局 新化学物质危害评估准则,环境毒理学鱼类毒性试验,6 实验报告,6.3 实验报告拟写,在实验报告中应包括：试验名称、目的、试验原理、试验的准确起止日期，还有如下几项：,环境毒理学鱼类毒性试验,7 实验注意事项,谢谢观赏！,
