《2018版高考生物大一轮复习 第十二单元 生物技术实践 第43讲 微生物的培养与应用课件》由会员分享，可在线阅读，更多相关《2018版高考生物大一轮复习 第十二单元 生物技术实践 第43讲 微生物的培养与应用课件（43页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、第43讲 微生物的培养与应用,第十二单元 生物技术实践,考纲点击 1.微生物的分离和培养 2.培养基对微生物的选择作用 3.利用微生物进行发酵来生产特定的产物,第十二单元 生物技术实践,一、微生物的实验室培养 1培养基 (1)概念：人们按照微生物对_的不同需求，配制出供其_的营养基质。 (2)营养构成：一般都含有水、_、氮源和无机盐。此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及_的要求。 (3)种类：按照物理性质可分为_培养基、半固体培养基和_培养基。,营养物质,生长繁殖,碳源,氧气,液体,固体,煮沸消毒法,紫外线消毒法,灼烧灭菌,高压蒸汽灭菌,3大肠杆菌的纯化培养 (1)制备牛肉膏蛋白胨固
2、体培养基 配制步骤：计算_溶化_倒平板。 (2)纯化大肠杆菌 纯化大肠杆菌，其关键的步骤是_。 纯化培养方法：_法和_法。 纯化培养原理：在培养基上得到由一个细胞 繁殖而来的肉眼可见的_，即可获得较纯的菌种。,称量,灭菌,接种,平板划线,稀释涂布平板,菌落,二、土壤中分解尿素的细菌的分离和计数 1分离原理：土壤中细菌之所以能分解尿素，是由于它们能合成_，这种物质在把尿素分解成无机物的过程中起_作用。以尿素为唯一氮源的培养基能促进分解尿素的细菌的生长和繁殖，并抑制或阻止其他微生物的生长，从而将目的菌分离。 2统计菌落数目：统计样品中的活菌一般用_法。 3实验流程：土壤取样制备_微生物的培养与观察
3、细菌的计数。,脲酶,催化,稀释涂布平板,培养基,三、分解纤维素的微生物的分离 1纤维素酶 (1)组成：纤维素酶是一种复合酶，它包括C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶。 (2)作用,2菌种筛选 (1)方法：_。,刚果红染色法,纤维素,纤维素酶,1.(2016北京海淀区期末)培养基中一般都含有水、碳源、氮源和无机盐四种成分。( ) 2.将土壤浸出液涂布在无菌的选择培养基上分离分解尿素的细菌，是否无菌操作影响较小。( ) 3.培养基分装到培养皿后进行灭菌。( ) 4.从有机废水中分离微生物用于废水处理时，接种后的培养皿须放在光照培养箱中培养。( ) 5.外植体消毒的原则是既杀死材料表面的微生物，又减少消毒剂
4、对细胞的伤害。( ),6.(2015高考四川卷T3D)用稀释涂布平板法培养计数，应选择有30300菌落数的平板。( ) 7.(2016山东青岛市期末)筛选能分解尿素的细菌所利用的培养基中，尿素是唯一的氮源。( ) 8.分解尿素的细菌在分解尿素时，可以将尿素转化为氨，使得培养基的酸碱度降低。( ) 9.土壤中纤维素分解菌的筛选流程中的“选择培养”是必不可少的。( ) 10.在富含纤维素的培养基中加入刚果红染色剂，若出现周围存在透明圈的菌落，则说明筛选到了分解纤维素的微生物。( ),考点一 培养基及微生物的纯化培养技术,不加凝固剂,工业生产,加凝固剂(如琼脂),微生物分离、鉴定,活菌计数,菌种保藏
5、,观察微生物的运动、分类、鉴定,培养基中加入某些化学物质,依据某些微生物对某些物质的特殊需求或抗性而设计,从众多微生物中分离所需的微生物,加入青霉素分离得到酵母菌和霉菌,培养基中加入某种指示剂或化学药品,产生特定的颜色或其他变化,鉴别不同种类的微生物,用伊红美蓝培养基鉴别大肠杆菌,较为温和的物理或化学方法,仅杀死物体表面或内部的部分对人体有害的微生物,煮沸消毒法,日常用品,巴氏消毒法,不耐高温的液体,化学药剂消毒法,用酒精擦拭双手，用氯气消毒水源,强烈的理化因素,杀死物体内外所有的微生物,包括芽孢和孢子,灼烧灭菌法,接种工具,干热灭菌法,玻璃器皿、金属工具,高压蒸汽灭菌法,培养基及容器,接种环
6、在固体平板培养基表面连续划线,一系列的梯度稀释; 涂布平板法操作,每次划线前后均需灼烧接种环,稀释度要足够高，为确保实验成功可以增加稀释度,在具有显著的菌落特征的菌落中挑取菌体,从适宜稀释度的平板上的菌落中挑取菌体,可以根据菌落的特点获得某种微生物的单细胞菌落,既可以获得单细胞菌落,又能对微生物计数,不能对微生物计数,操作复杂，需要涂布多个平板,检测培养基平板灭菌是否合格,灼烧,将聚集的菌体逐步稀释以便获得单个菌落,B,溶解氧,营养物质,固氮,自养,异养,解析: (1)为了检测培养基平板灭菌是否合格，可在涂布接种 前，随机取灭菌后的空白平板先行培养一段时间。(2)接种 环、接种针等金属用具可直
7、接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼 烧，以达到迅速彻底灭菌的目的。在第二次及以后的划线 时，总是从上一次划线的末端开始划线，其目的是将聚集的菌体逐步稀释以便获得单个菌落。(3)比较A和B可以看出：A培养基中细菌的分布呈线性，是用平板划线法接种培养后得到的结果；B培养基中细菌均匀分布，是用稀释涂布平板法接种培养后得到的结果。,(4)振荡培养可以提高培养液中溶解氧的含量，还可以使菌体与培养液充分接触，提高了营养物质的利用率，因此振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快。(5)从表格中可看 出，培养基中无氮源，中无碳源，中为完全培养基。由此可知能在中生存的甲只能是固氮微生物，能在中生存的乙是自养微生物，丙
8、只在中存活，为异养微生物。,考点二 微生物的计数方法,当样品的稀释度足够高时,培养基表面生长的一个菌落,来源于样品稀释液中的一个活菌,通过统计平板上的菌落数,就能推测出样品中大约含有多少活菌,利用特定细菌计数板或血细胞计数板，在显微镜下计算一定容积的样品中微生物的数量,每克样品中的菌落数(CV)M C:某稀释度下平板上生长的平均菌落数;V:涂布平板时所用的稀释液的体积(mL);M:稀释倍数,每毫升原液所含细菌数:每小格平均细菌数400104稀释倍数,当两个或多个菌体连在一起时,平板上观察到的只是一个菌落,不能区分细胞死活,比实际值偏小,比实际值偏大,排除非测试因素对实验结果的影响,排除偶然因素
9、对实验结果的影响,空白对照：确定培养基制作是否合格,同一稀释度涂布至少3个平板,7075 煮30分钟(或80 煮15分钟),牛奶的营养成分不被破坏,B,3.4106,偏小,个别菌落可能是由2个或多个细菌形成的,伊红美蓝,(金属光泽的紫)黑色,考点三 微生物的筛选与鉴别,利用以尿素为唯一氮源的选择培养基进行选择培养,利用富含纤维素的选择培养基进行选择培养,只有分解尿素的细菌能够合成脲酶，才能在以尿素为唯一氮源的培养基上生长,因为培养基中含有丰富的纤维素，因此能够分解纤维素的微生物具有更多的生存机会而大量繁殖,在培养基中加入酚红指示剂,指示剂变红说明菌落中的菌体为分解尿素的细菌,刚果红染色法，周围出现透明圈的菌落为分解纤维素的微生物的菌落,涂布平板,选择,B,培养基灭菌、接种过程中进行无菌操作,A、B、C,人工诱变(紫外线照射等)处理菌株，再进行筛选,酚红,刚果红,
