激光共聚焦步骤.docx

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激光共聚焦步骤：1. 细胞用4%的多聚甲醛固定20min（时间不宜太长），用PBS洗3遍。2. 用0.1%曲拉通-100透膜10min（摇动），用PBS洗三遍。3. 用5%的BSA封闭1h或过夜（摇动），用PBS洗三，加一抗孵育2h，用PBST洗三遍，加二抗孵育1h，碧云天DPAI5min（不宜过长）洗三遍（可多洗几次每次5min）。4. 封片，看片。