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1、Integrated Drug Discovery Proprietary & Confidential Integrated Drug Discovery 重结晶和柱层析重结晶和柱层析 崔文彬 Jul 27, 2011 Integrated Drug Discovery Proprietary & Confidential Integrated Drug Discovery Proprietary & Confidential 2 重结晶重结晶 溶剂的选择溶剂的选择 常用溶剂常用溶剂 常见问题以及解决方法常见问题以及解决方法 柱层析柱层析 层析的概念层析的概念 层析的分类层析的分类 常用柱层
2、析常用柱层析 Integrated Drug Discovery Proprietary & Confidential Integrated Drug Discovery Proprietary & Confidential 3 一一 溶剂的选择溶剂的选择 选择溶剂是结晶的关键，重结晶溶剂的选择原则 : 选择的溶剂应不与欲纯化的化学试剂发生化学反应。 在较高温度时能溶解多量的被提纯物质；而在室温或更低温度时，只能溶解很少量的该种物质；对杂质的溶解 非常大或者非常小。 溶剂的沸点不宜太低，也不宜过高。溶剂的沸点最好比被结晶物质的熔点低50。否则易产生溶质液化分层现 象。溶剂的沸点越高，溶解和析出
3、的温度差异越大，沸腾时溶解力越强，对于高熔点物质，最好选高沸点溶剂 。二氧六环等熔点高，也应注意。 含有羟基、氨基而且熔点不太高的物质尽量不选择含氧溶剂。因为溶质与溶剂形成分子间氢键后很难析出。 含有氧、氮的物质尽量不选择醇做溶剂，原因同上。 无毒或毒性很小，便于操作，价廉易得。 适当时候可以选用混合溶剂。 溶质和溶剂极性不要相差太悬殊。 极性：水甲酸甲醇乙酸乙醇异丙醇乙腈DMSODMF丙酮HMPACH2Cl2吡啶氯仿氯苯THF二氧六环乙醚 苯甲苯CCl4正辛烷环己烷石油醚。 在几种溶剂都适用时，则应根据结晶的回收率，操作的难易，溶剂毒性大小和是否易燃，价格高低等择优选择。 重结晶重结晶 In
4、tegrated Drug Discovery Proprietary & Confidential Integrated Drug Discovery Proprietary & Confidential 4 二二重结晶常用溶剂重结晶常用溶剂 1 单一溶剂 溶剂溶剂沸点（沸点（）易燃性易燃性毒性毒性适应范围适应范围配伍溶剂配伍溶剂附注附注 水水1001000 00 0盐、酰胺、某些羧酸盐、酰胺、某些羧酸 丙酮、醇类、二氧六环、乙丙酮、醇类、二氧六环、乙 腈腈 产物干燥较慢产物干燥较慢 乙醚乙醚34.534.5+一般化合物、低熔点化合物一般化合物、低熔点化合物丙酮、烃类丙酮、烃类可向烧瓶壁上爬
5、升而使沉淀析出可向烧瓶壁上爬升而使沉淀析出 石油醚石油醚3535- -6060+ +烃类烃类 表格中除乙醇和水以外的任表格中除乙醇和水以外的任 何溶剂何溶剂 正戊烷正戊烷36.136.1+ +烃类烃类同上栏同上栏 二氯甲烷二氯甲烷4040+ +一般化合物，低熔点化合物一般化合物，低熔点化合物乙醇、烃类乙醇、烃类产品容易干燥产品容易干燥 丙酮丙酮5656+ + 一般化合物、硝基化合物、溴化一般化合物、硝基化合物、溴化 物物 水、烃、乙醚水、烃、乙醚如不与水配伍，则应加以干燥如不与水配伍，则应加以干燥 醋酸甲酯醋酸甲酯5757+一般化合物、酯一般化合物、酯水、乙醚水、乙醚 氯仿氯仿61.761.7
6、0 0+一般化合物、氯化物一般化合物、氯化物乙醇、烃类乙醇、烃类产品易于干燥产品易于干燥 甲醇甲醇64.564.5+ + 一般化合物、酯、硝基化合物、一般化合物、酯、硝基化合物、 溴化物溴化物 水、乙醚、苯水、乙醚、苯 正己烷正己烷6969+ +烃类烃类同石油醚同石油醚 四氯化碳四氯化碳76.576.50 0+非极性化合物、酰氯、酸酐非极性化合物、酰氯、酸酐乙醚、苯、烃类乙醚、苯、烃类 能与某些含氮碱基反应，具有累积能与某些含氮碱基反应，具有累积 毒性毒性 醋酸乙酯醋酸乙酯77.177.1+ +一般化合物、酯一般化合物、酯乙醚、烃类、苯乙醚、烃类、苯 表1 Integrated Drug Di
7、scovery Proprietary & Confidential Integrated Drug Discovery Proprietary & Confidential 5 表1 （续） 乙醇乙醇78.378.3+0 0同甲醇同甲醇水、烃类、醋酸乙酯水、烃类、醋酸乙酯 苯苯80.180.1+芳香化合物、烃类、分子络合物芳香化合物、烃类、分子络合物乙醚、乙酸乙酯、烃类乙醚、乙酸乙酯、烃类有累积毒性有累积毒性 环己烷环己烷80.780.7+ +烃类烃类同石油醚同石油醚 乙腈乙腈81.681.6+极性化合物极性化合物水、乙醚、苯水、乙醚、苯 石油英石油英9090- -110110+ +烃类烃类
8、乙酸乙酯、苯、二氯甲烷乙酸乙酯、苯、二氯甲烷 痕迹量的乙醇有时能显著增加其溶解痕迹量的乙醇有时能显著增加其溶解 能力能力 正庚烷正庚烷98.498.4+ +烃类烃类同石油醚同石油醚 二氧六环二氧六环102102+酰胺酰胺水、苯、烃类水、苯、烃类可与某些醚形成溶剂化物可与某些醚形成溶剂化物 吡啶吡啶115.6115.6+高熔点的难溶化合物高熔点的难溶化合物水、甲醇、烃类水、甲醇、烃类 溶解性能力与其干燥力度有关，难以溶解性能力与其干燥力度有关，难以 出尽出尽 乙酸乙酸118118+ +盐、酰胺、某些羧酸盐、酰胺、某些羧酸水水难以除去，刺激性强难以除去，刺激性强 甲基溶纤剂甲基溶纤剂 （甲氧基乙醇
9、（甲氧基乙醇 ） 124124+糖类糖类水、苯、乙醚水、苯、乙醚 Integrated Drug Discovery Proprietary & Confidential Integrated Drug Discovery Proprietary & Confidential 6 除了使用单一溶剂进行重结晶外，使用溶剂组合（通常是两种，即所 谓“溶剂对”）常能得到更好的效果。 一般常用的混合溶剂有：乙醇和水、乙醇和乙醚、乙醇和丙酮、乙醇 和氯仿、二氧六环和水、乙醚和石油醚、氯仿和石油醚等等（表 2）。 建议先试：石油醚（正己烷）、 乙酸乙酯、乙醇、水，再试：丙酮、 甲醇、乙腈、苯、氯仿、乙酸、
10、吡啶等。如果还不行，就只好混合了。 丙酮如不与水配伍，应加以干燥。 使用溶剂对的操作程序是：先将样品在加热下溶于易溶的溶剂，趁热 向其中加入（样品在其中）难溶的溶剂，直至出现混浊。重新加热至 澄清；冷却结晶。另一种程序是，在出现混浊后再加入数滴易溶溶剂， 使其澄清，然后冷却结晶。这些操作可以在室温下进行。使用溶剂对 更便于除去不溶性的杂质（将样品在前一溶剂中的非饱和溶液加以过 滤，然后加第二种溶剂）。但需警惕后一溶剂不能加得太多，否则溶 解性的杂质将与产品一同沉淀出来。 2 2 混合溶剂混合溶剂 Integrated Drug Discovery Proprietary & Confident
11、ial Integrated Drug Discovery Proprietary & Confidential 7 重结晶常用混合溶剂重结晶常用混合溶剂 常见混合溶剂常见混合溶剂 Acetic acid: with chloroform, ethanol, ethyl acetate, acetonitrile, petroleum ether, or water. Acetone: with benzene, butyl acetate, butyl alcohol, carbon tetrachloride, chloroform, cyclohexane, ethanol, ethyl
12、 acetate, methyl acetate, acetonitrile, petroleum ether or water. Ammonia: with ethanol, methanol, pyridine. Aniline: with acetone, benzene, carbon tetrachloride, ethyl ether, n-heptane, methanol, acetonitrile or nitrobenzene. Benzene: with acetone, butyl alcohol, carbon tetrachloride, chloroform, c
13、yclohexane, ethanol, acetonitrile, petroleum ether or pyridine. Butyl alcohol: with acetone or ethyl acetate. Carbon disulfide: with petroleum ether. Carbon tetrachloride: with cyclohexane. Chloroform: with acetic acid, acetone, benzene, ethanol, ethyl acetate, hexane, methanol or pyridine. Cyclohex
14、ane: with acetone, benzene, carbon tetrachloride, ethanol or diethyl ether. Diethyl ether: with acetone, cyclohexane, ethanol, methanol, methylal (dimethoxymethane), acetonitrile, pentane or petroleum ether. Dimethyl formamide: with benzene, ethanol or ether. Dimethyl sulfoxide: with acetone, benzen
15、e, chloroform, ethanol, diethyl ether or water. Dioxane: with benzene, carbon tetrachloride, chloroform, ethanol, diethyl ether, petroleum ether, pyridine or water. Ethanol: with acetic acid, acetone, benzene, chloroform, cyclohexane, dioxane, ethyl ether, pentane, toluene, water or xylene. 表表2 Inte
16、grated Drug Discovery Proprietary & Confidential Integrated Drug Discovery Proprietary & Confidential 8 表 2 （续） 表表 2 （续）（续） 常见混合溶剂常见混合溶剂 Ethyl acetate: with acetic acid, acetone, butyl alcohol, chloroform, or methanol. Glycerol: with ethanol, methanol or water. Hexane: with benzene, chloroform or ethanol. Methanol: with chloroform, dieth
