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1、课时作业40微生物的培养与应用 时间：45分钟满分：100分 一、选择题(每小题5分，共60分) 1下表是对四种生物的能源、碳源、氮源、新陈代谢类型的描述，正确的一组是()硝化细菌乳酸菌根瘤菌衣藻A能源NH3乳酸N2光能B碳源CO2糖类等糖类等CO2C氮源NH3N2N2NOD代谢类型自养 需氧型异养 厌氧型自养 需氧型自养 需氧型解析：本题综合考查了不同微生物的代谢类型及营养要求。从能源来看，乳酸菌需糖类等有机物供能；从氮源看，乳酸菌需要NH、NO；从代谢类型看，根瘤菌为异养需氧型；从碳源看，硝化细菌与衣藻需CO2，乳酸菌和根瘤菌需要糖类等有机物。 答案：B 2下列操作与消毒灭菌无关的是()
2、A接种前用火焰灼烧接种环 B接种前用酒精擦拭双手 C将平板倒置，放入培养箱中培养 D接种在酒精灯的火焰旁完成 解析：接种用具、器皿、空气中都存在大量微生物，必须严格地消毒灭菌。A、B、D三项都是实验操作过程中灭菌或防止杂菌污染的措施。将平板倒置，放入培养箱中培养与灭菌无关。 答案：C 3.下列关于微生物分离和培养的叙述，错误的是() A微生物培养前，需对培养基进行消毒 B测定土壤样品中的细菌数目，常用菌落计数法 C分离土壤中不同的微生物，要采用不同的稀释度 D分离能分解尿素的细菌，要以尿素作为培养基中的惟一氮源 解析：微生物培养前，需对培养基进行灭菌，而不是消毒；测定土壤样品中的细菌数目，常用
3、菌落计数法；分离土壤中不同的微生物，要采用不同的稀释度，以便能从中选择出菌落数在30300的平板进行计数；分离能分解尿素的细菌，要以尿素作为培养基中的惟一氮源。 答案：A 4用来判断选择培养基是否起到了选择作用需要设置的对照是() A未接种的选择培养基 B未接种的牛肉膏蛋白胨培养基 C接种了的牛肉膏蛋白胨培养基 D接种了的选择培养基 解析：将菌液稀释相同的倍数，在牛肉膏蛋白胨培养基上生长的菌落应明显多于选择培养基的数目，因此，用牛肉膏蛋白胨培养基作为对照。对照的原则是单一变量，所以与选择培养基一样接种、培养。 答案：C 5无菌技术包括以下几个方面的叙述，其中错误的是() A对实验操作的空间、操
4、作者的衣着和手进行灭菌 B将用于微生物培养的培养皿、接种用具和培养基等进行灭菌 C为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行 D实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围物品相接触 解析：无菌操作技术的第一方面是：对实验操作的空间，操作者的衣着和手进行清洁和消毒。第二、三、四方面分别是选项B、C、D。 答案：A 6为了保持菌种的纯净需要进行菌种的保藏，下列有关叙述不正确的是() A对于频繁使用的菌种，可以采用临时保藏的方法 B临时保藏的菌种一般是接种到试管的斜面培养基上 C临时保藏菌种容易被污染或产生变异 D对于需要长期保存的菌种，可以采用低温4保藏的方法 解析：对于需要长
5、期保存的菌种，可采用甘油管藏法，即在3mL甘油瓶中加入1mL甘油后灭菌，将1mL培养的菌液转移到甘油瓶中，与甘油充分混匀后，放在20 的冷冻箱中保存。 答案：D 7有关平板划线操作的叙述不正确的是() A第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养物 B每次划线前，灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后，接种环上残留的菌种 C在第二区域内划线时，接种环上的菌种直接来源于菌液 D划线结束后，灼烧接种环，能及时杀死接种环上的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者 解析：纯化大肠杆菌的平板划线中，接种环取菌种前灼烧的目的是避免接种环可能存在的微生物污染培养物，以后每次划线前灼烧接种环为了杀死上
6、次划线后残留的菌种，划线结束仍需灼烧接种环，是避免细菌污染环境和感染操作者，从第二次划线开始，每次划线时接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端。 答案：C 8(2011衡阳模拟)下列关于大肠杆菌的培养中叙述不正确的是() A在大肠杆菌培养过程中，除考虑营养条件外，还要考虑pH、温度和渗透压等条件 B在微生物培养操作过程中，为防止杂菌污染，需对培养基和培养皿进行消毒 C若用稀释涂布平板法计数大肠杆菌活菌的个数，要想所得估计值更接近实际值，除应严格操作、多次重复外，还应保证待测样品稀释的稀释度 D使用过的培养基及其培养物必须经过灭菌处理后才能丢弃 解析：本题主要考查微生物培养和无菌操作的相关知识。
7、培养过程中，除营养条件要满足需要外，还要考虑温度、酸碱度和渗透压等条件是否适宜；灭菌是使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，所以，对培养基和培养皿进行灭菌而不是消毒；使用稀释涂布平板法时要保证样品稀释比例合适，这样才会有更科学的数据；有的大肠杆菌会释放一种强烈的毒素，并可能导致肠管出现严重症状，所以使用过的培养基及其培养物必须经过灭菌处理后才能丢弃，以防止培养物的扩散。 答案：B 9在对纤维素分解菌进行选择培养时用液体培养基的目的是() A用液体培养基可获得大量菌体 B纤维素分解菌适宜在液体培养基上生长 C用液体培养基可以充分利用培养基中的营养物质 D用液体培养基可获得高纯度的纤维素分解
8、菌 解析：液体培养基有利于纤维素分解菌的生长和繁殖。 答案：A 10若某一稀释度下，平板上生长的平均菌落数为90，稀释液的稀释倍数为105，则每克样品中的活菌数约为() A9108B9107 C9105 D9106 解析：每克样品中的活菌数某一稀释度下平板上生长的平均菌落数(为90)涂布平板时所用的稀释液的体积稀释倍数。涂布平板时所用的稀释液的体积在没有给出具体数时一般按0.1 mL计算。 答案：B 11微生物的接种方法最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法，关于两者的区别下列说法正确的是()比较方面平板划线法稀释涂布平板法需在无菌下操作不需无菌操作培养皿要靠近酒精灯培养皿不需靠近酒精灯不可计算
9、菌液中的活菌数可计算菌液中的活菌数需要接种环需要涂布器A.、 B、 C、 D、 解析：稀释涂布平板法所取菌液的体积及所稀释的倍数是已知的，所以能计算出菌液中的活菌数；平板划线法需要接种环进行划线，稀释涂布平板法需要涂布器在培养基上进行涂布。 答案：B 12分离出的微生物还要进行鉴定，而微生物的鉴定需要鉴别培养基，下列不是鉴别培养基的是() A加入酚红的培养基 B加入刚果红的培养基 C加入伊红美蓝的培养基 D加入纤维素粉的培养基 解析：鉴别培养基是根据微生物的代谢特点在培养基中加入一些指示剂配制而成的，如酚红、伊红美蓝、刚果红等，而纤维素粉不是指示剂。 答案：D 二、简答题(共40分) 13(9
10、分)下面是分离分解尿素的细菌所用的培养基配方法：KH2PO4Na2HPO4MgSO47H2O葡萄糖尿素琼脂蒸馏水1.4g2.1g0.2g10.0g1.0g15.0g定容至 1000mL请根据以上配方，回答下列问题： (1)该培养基含有微生物所需要的_类营养物质。其中最主要的碳源是_，氮源是_。 (2)该培养基按物理性质划分是_培养基；按培养基的作用划分是_培养基。 (3)该培养基具有选择作用的原因是_。 (4)在该培养基中，可通过检测pH的变化来判断尿素是否被分解，依据的原理是_。 (5)若用该培养基来鉴定某种细菌是否能分解尿素，可在培养基中加入_指示剂，尿素被分解后指示剂变_色。 答案：(1
11、)4葡萄糖尿素 (2)固体选择 (3)该培养基中，惟一的氮源是尿素，只有能分解尿素的微生物才能在该培养基上生长和繁殖 (4)在细菌分解尿素的化学反应中，细菌合成的脲酶将尿素分解成氨，氨会使培养基的碱性增强，pH升高 (5)酚红红 14(11分)选择培养是微生物学中最强有力的技术手段之一。主要是指利用不同微生物间生命活动特点的不同，制定环境条件，使仅适应该条件的微生物旺盛生长，从而使其在群落中的数量大大增加，人们能够更容易地从自然界中分离到所需的特定微生物。选择条件可根据所需分离的微生物的特点，从物理、化学、生物及综合多个方面进行选择，如温度、pH、紫外线、高压、光照、氧气、营养等许多方面。如下
12、图描述了采用选择方法从土壤中分离能降解酚类化合物对羟基苯甲酸的微生物的实验过程。 (1)本实验所需培养基为_，碳源为_。 (2)实验原理是_。 (3)重复培养的目的是_。 (4)的菌落中大部分是降解_的微生物。 (5)为_组，为_组，设置的目的是_ _。 (6)采用_法，接种到的培养基中，在操作过程中为防止污染应注意的事项是_。 答案：(1)选择培养基对羟基苯甲酸 (2)利用以对羟基苯甲酸为惟一碳源的选择培养基，经选择培养，选择出能降解酚类化合物对羟基苯甲酸的微生物 (3)增大分解对羟基苯甲酸微生物的浓度 (4)对羟基苯甲酸 (5)对照实验说明通过选择培养的确得到了欲分离的目标微生物 (6)单
13、菌落挑取接种环在火焰上灼烧灭菌，烧红的接种环在火焰旁冷却，同时打开皿盖挑取菌落接种到试管中，并塞好棉塞，接种环在火焰上灼烧，杀灭残留物 15(20分)为了研究微生物的抗药性突变是自发产生的还是在环境因素的作用下产生的，1952年Lederberg夫妇利用大肠杆菌设计了一个影印培养法实验。 影印培养法的实验原理是：把长有数百个菌落的细菌母种培养皿倒置于包有一层灭菌丝绒布的木质圆柱体(直径略小于培养皿平板)上，使其均匀地沾满来自母种培养皿平板上的菌落，然后通过这一“印章”把母板上的菌落“忠实地”一一接种到不同的其他培养基上。 下图就是利用影印培养技术证明大肠杆菌产生抗链霉素突变基因的实验。具体方法是： 首先把大量对链霉素敏感的大肠杆菌涂布在不含链霉素的平板1的
