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1、第三节 动物的克隆,动物细胞的培养和克隆形成,（1）离体的动物细胞能否正常的生活、表现出正常的生命活动？,只要条件适合就能表现出正常的生命活动，如细胞的分裂、生长等,（2）是不是所有的动物细胞都能在离体的情况下表现出生命活动？,不是，越是幼嫩的细胞越容易培养并表现出正常的生命活动，因此在细胞培养时一般选择幼嫩的细胞,（3）细胞离体培养时，表现出什么样的生命活动？,生长、分裂（繁殖）至接触抑制,（4）离体的动物组织能否像离体的动物细胞一样表现出体外培养的特征？,动物组织在离体的情况下，也能培养并表现出正常的生命活动；但与细胞培养也有不同的地方：在得到离体的组织后，需要机械处理或胰蛋白酶处理得到分
2、散的细胞再进行细胞培养，同时动物组织培养过程中可以伴随组织分化。,（5）动物组织培养具体是如何实现的？,动物组织培养的发展历史,什么是原代培养？什么是传代培养,动物组织培养时，培养细胞能不能 无限制地存活下去,阅读教材,1.过程：,（一）动物细胞培养,动物胚胎或幼龄动物的组织、器官,胰蛋白酶,单个细胞,加培养液,制成,细胞悬浮液,细胞系、细胞株,细胞增殖,去掉组织间蛋白,动物细胞培养不能 最终培养成生物体,原代培养,传代培养,如何界定原代培养和传代培养；细胞株和细胞系？,细胞悬浮液,转入特殊培养液中培养,分瓶培养,原代培养,传代培养,细胞系（可传代的细胞）,连续细胞系：,有限细胞系：,二倍体细
3、胞,发生转化的细胞系（遗传物质发生了改变，具不死性）,细胞株：,从原代培养物或细胞系中获得用单细胞分离培养或通过筛选的方法，由单细胞增殖形成的细胞群，称细胞株。遗传物质未变,（5）如何获得纯系的细胞系？,采用细胞克隆,什么是克隆培养法。,细胞克隆的最基本要求是什么？,什么细胞容易进行克隆培养,阅读教材,如何提高细胞克隆形成率？,克隆培养法的主要用途是什么？,1.过程：,物理法：,化学法：,生物法：,灭活仙台病毒,聚乙二醇,电刺激等,（二）动物细胞融合,1.过程：,灭活的病毒颗粒黏附于细胞表面,细胞膜被病毒颗粒穿通,细胞膜连接,细胞融合，形成杂种细胞,主要用于制备,单克隆抗体,获得杂种植株,用途
4、,物理、化学方法,（同左）,灭活的病毒,物理（离心、振荡、电刺激）,化学（聚乙二醇）,诱导方法,使细胞分散后诱,导细胞融合,去除细胞壁后诱,导原生质体融合,细胞融合的方法,细胞膜的流动性,细胞膜的流动性、,植物细胞全能性,原理,动物细胞融合,植物体细胞杂交,比较项目,植物体细胞杂交、动物细胞融合的比较,1.其由何种细胞产生？ 2.主要分布在哪里？ 3.如何得到抗体？,(三）单克隆抗体 动物细胞融合的重要应用,抗体,1、抗原 动物体内,抗原不纯,抗体不纯,2、特异性差、纯度低；,产量低、反应不够灵敏,设计方案： 一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体 小鼠骨髓瘤细胞能无限增殖,单克隆抗体的优点：化学
5、性质单一 特异性 灵敏度高,杂种细胞,2.制备过程： （1）给小鼠抗原注射的目的是什么？ 诱导小鼠体内的特异性免疫应答，分化出浆细胞。 （2）两次筛选的目的相同吗？ 不同，第一次筛选是为了筛选杂交瘤细胞，第二次筛选是做抗体检验，筛选产生特异性抗体的细胞。 （3）最后培养有几种方案？ 两种，体内培养和体外培养。,多莉,克隆猴,四、动物的克隆繁殖,1、动物细胞全能性的表现程度：,全能干细胞 多能干细胞 单能干细胞 2、动物难以克隆繁殖的根本原因： 细胞分化使得细胞发生了基因的差异性表达，有的基因开放，有的基因关闭。体细胞基因组中的基因活动很不完全，不能像受精卵那样发挥细胞的全能性。,细胞核移植,多莉羊的培育过程,克隆动物的研究意义,1.用于生物学和医学研究的实验动物 2.改良动物品种 3.治疗人类疾病 4保护濒危动物,6.世界上第一只克隆绵羊“多莉”的培育等程序如图所示。请仔细看图后回答问题：,写出 、所指的细胞工程各称： 。 实施细胞工程时，所需的受体细胞大多采用动物卵细胞的原因是： 。 多莉面部的毛色是 ，判断依据： 。 继植物组织培养之后，克隆绵羊培育成功，证明动物细胞也具有 。 请举例说明克隆绵羊培育成功的实际意义： 。,
