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1、44文件编号：LABOPMY020第 页，共 页 版本：A/0生效日期：2008-02-01XXXXXX 医院检验科免疫室分析项目作业指导书 Elecsys E 170/E 411酸磷酸激酶同功酶 (CK-MB)1. 分析原理采用双抗体夹心法，整个过程18分钟完成。 第1步：15ml标本、生物素标记抗CKMB 单克隆抗体和钌（Ru）标记的抗CKMB单抗混匀，形成夹心复合物。 第2步：加入链霉亲和素包被的微粒，让上述形成的复合物通过生物素与链霉亲和素间的反应结合到微粒上。 第3步：反应混和液吸到测量池中，微粒通过磁铁吸附到电极上，未结合的物质被清洗液洗去，电极加电压后产生化学发 光，通过光电倍增
2、管进行测定。仪器通过2点定标曲线以及试剂条码提供的母定标曲线计算出结果。2. 标本要求 血清：按标准常规方法采集。 血浆：肝素（锂、纳）、EDTA-K3、枸橼酸钠抗凝均可。如用枸橼酸钠抗凝，结果应+10%。标本在18 oC 23oC可稳定4小时，在2 oC 8oC可稳定8小时，-20oC可稳定3个月。只能冻融一次。 CK-MB的稳定性与温度密切相关。标本在32oC放置一小时，CK-MB含量可降低10%以上。含沉淀的标本使用前需离心。不要加热灭活标本。标本和质控液禁用叠氮钠防腐。 标本、定标液和质控品在测定前的温度应与室温平衡；放入仪器后应在2小时内测定以避免蒸发的影响。3. 试剂、校准品、质控
3、品和其他所需材料采用罗氏原装配套试剂。试剂： M：链霉亲和素包被的微粒（透明瓶盖），1瓶，6.5ml。粒子浓度0.72mg/ml，生物素结合能力： 470ng生物素/mg粒子。含防腐剂。R1：生物素标记的抗CK-MB抗体（灰盖），1瓶，10ml。浓度1.2mg/l，磷酸缓冲液 0.1mmol/l，pH7.0。含防腐剂。 R2：钌（Ru）标记的抗CK-MB抗体（黑盖），1瓶，10ml。浓度1.2mg/l，磷酸缓冲液0.1mmol/l，pH7.0。含防腐剂。校准品：Cal 1 阴性定标液（白盖），2瓶，1.0ml/瓶,人血清基质Cal 2 阳性定标液（黑盖），2瓶，1.0ml/瓶,人血清基质质控品
4、： Elecsys PreciControl Cardiac ,货号12018209 PC CARD1:2瓶，22.0ml 质控血清 PC CARD2:2瓶，22.0ml 质控血清其他所需材料：Elecsys通用稀释液货号11732277 Elecsys1010或2010分析仪 Elecsys 系统缓冲液（ProCell）货号11662988 Elecsys测量池清洗液（CleanCell）货号11662970 Elecsys 添加剂液（SysWash）货号11930346 Elecsys 系统清洗液（SysClean）货号112985004. 仪器和校准使用仪器：瑞士罗氏诊断公司生产Elec
5、sys 2010/E 170/E 411全自动电化学发光免疫自动分析仪仪器校准：每批CKMB试剂盒必须用新鲜试剂和CKMB Cal 1,Cal 2定标一次。另外，以下情况 需要再次定标： Elecsys2010： 一个月（同一批号试剂） 7天（放置仪器上的同一试剂盒）各种分析仪均适用的情况：根据要求进行标定：如质控结果超出范围时；根据规定进行多次标定。5. 操作步骤（以E 170为例）5.1 校准操作步骤：在编缉各项目的参数时，已经在ApplicationCalib菜单中定义好了定标类型和几点定标。因此在对各项目进行定标时，只需在定标菜单Calibration中进行即可。3.2进入Calibr
6、ationStatus菜单，用鼠标选择需定标的项目，再根据需要点单点定标（BLANK键）或两点定标（TWO POINT键）、跨距定标（SPAN键）、多点定标（FULL键），再选择其它项目进行相应选择，最后点SAVE，将定标物放入在CalibrationCalibrator中定义好的位置，点Start，再点Start，仪器开始定标。 在CalibrationStatus菜单中看定标结果，点Calibration Result键看定标结果，点Reaction Monitor键看每个定标物的反应曲线。5.2 样本检测程序： 单个样本输入，在主菜单下选择Workplace- Testslection，
7、在Sequence No栏输入标本号，然后选择该标本所需做的单个项目或组合项目，点SAVE键，样本号自动累加。批量常规标本的输入，在主菜单下选择Workplace- Testslection，在Sequence No栏输入起始标本号，然后选择该标本所需做的单个项目或组合项目，点REPEAT，输入该批标本的最后一个标本号，点OK即可。进样分析，将标本按在Workplace菜单中输入的标本号顺序在样本架上排好，放入进样盘内,按START键，输入该批上机标本的起始标本号，再点START键，仪器自动开始推架检测标本。6. 质量控制用Elecsys CKMB质控品1和2 （PreciControl Ca
8、rdiac）。质控品1和质控品2至少每24小时或每一次定标后测定一次。质控间隔期应适用于各实验室的具体要求。检测值应落在确定的范围内，如出现质控值落在范围以外，应采取校正措施。7. 计算方法 对每一个标本，仪器会自动计算含量。单位是ng/ml8. 参考范围 n 中位数 第95%位数女性 760 0.97 2.88男性 628 1.35 4.94如有必要，各实验室应自己测定一个正常值范围。9. 分析性能10. 干扰因素该方法不受黄疸（胆红素34mg/dl）、溶血（血红蛋白1.5g/dl）、脂血（脂质1500mg/dl）生物素5mg/天）治疗的病人，至少要等最后一次摄入生物素8小时后才能采血。不受
9、类风湿因子（1500U/ml）和透析的干扰。CK-MB浓度高达5000ng/ml也不出现钩状效应。50种常用药物经试验对本测定无干扰。 偶尔会遇到抗链酶亲和素抗体的干扰。 Elecsys CK-MB异常病人应结合病史、临床其他检查结果综合起来进行诊断。11. 临床意义肌酸磷酸激酶（CK）是含有两个亚单位的酶。有四种形式：线粒体同功酶和细胞溶质同功酶CK-MM(肌型)、CK-BB(脑型)和CK-MB。检测血清CKMB质量是诊断心血管缺血性损伤的重要指标，如急性心肌梗死、心肌炎等。症状发生3-8小时就可在血中测到CKMB，并可根据病情维持可测水平至较长一段时间。其它一些临床情况，如横纹肌溶解和中风
10、，CKMB也可升高。就实验室诊断而言，检 测 总CK、TnT和/或肌红蛋白就能够对以上疾病作鉴别诊断。CKMB检测的灵敏度取决于标本采集的时间，因此，系列动态检测具有实际意义.12参考文献1. Rozenman Y, Gotsman MS. The earliest diagnosis of acute myocardial infarction. Annu Rev Med 1994;45:31-44.2. Adams JE, Abendschein DR, Jaffe AS. Biochemical markers of myocardial injury: Is MB Creatine k
11、inase the choice for the 1990s? Circulation 1993;88(2):750-763.3. Apple FS. Diagnostic markers for detection of acute myocardial infarction and reperfusion. Laboratory Medicine 1992;23(5):297-322.4. Christenson RH, Vaidya H, Landt Y, Bauer RS, Green SF, Apple FA, Magneson GR, Nag S, Wu AHB, Azzazy HME. Standardization of Creatine Kinase-MB (CK-MB) Mass Assays: The Use of Recombinant CK-MB as a Reference Material. Clin Chem 1999;45(9):1414-1423.5. Bablok W, et al. A General Regression Procedure for Method Transformation. J Clin Chem Clin Biochem 1988;26:783-790.编写： 审核： 批准：批准日期： 年 月 日
