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1、本科毕业论文（设计）( 2013届 ) 题 目：资源植物扶芳藤叶中总黄酮提取物的抗氧化性研究、学 院：生命与环境科学学院 专 业：生物技术 学生姓名： 学号：20909051042 指导教师： 职称（学位）：副教授 合作导师： 职称（学位）： 完成时间： 2013 年 5 月 25 日 成 绩： 综合成绩： 等级： 黄山学院教务处制学位论文原创性声明兹呈交的学位论文，是本人在指导老师指导下独立完成的研究成果。本人在论文写作中参考的其他个人或集体的研究成果，均在文中以明确方式标明。本人依法享有和承担由此论文而产生的权利和责任。声明人（签名）：年 月 日目 录摘要英文摘要1引言12材料与方法32.
2、1材料与设备32.1.1实验材料32.1.2实验试剂42.13实验仪器42.2实验方法42.2.1扶芳藤叶中总黄酮化合物的提取工艺42.2.2扶芳藤叶中总黄酮提取物含量的测定42.2.3扶芳藤叶中总黄酮提取物的总抗氧化能力的测定2.2.4扶芳藤叶中总黄酮提取物超氧阴离子自由基清除能力的测定测定2.2.5扶芳藤中总黄酮提取物羟基清除能力的测定2.2.6扶芳藤中总黄酮提取物清除DPPH自由基清除能力的测定3结果与分析53.1扶芳藤叶中总黄酮提取物的含量53.2扶芳藤叶中总黄酮提取物的总抗氧化能力53.3扶芳藤叶中总黄酮提取物对超氧阴离子自由基的清除能力53.4扶芳藤叶中总黄酮提取物羟基清除能力3.
3、5扶芳藤叶中总黄酮提取物对DPPH自由基的清除能力4结论与讨论7参考文献7致谢8资源植物扶芳藤叶中总黄酮提取物的抗氧化性研究 摘 要：扶芳藤叶片洗净烘干至恒重，粉碎后分别采用石油醚、75%乙醇在索式提取器里回流浸提，然后减压浓缩提取液，得到扶芳藤叶中总黄酮提取物，并分别对其抗氧化总还原能力、对羟自由基，超氧阴离子自由基，脂过氧自由基清除能力进行了实验研究。结果表明：扶芳藤叶总黄酮提取物具有较强的体外抗氧化活性，能有效地清除羟自由基、超氧阴离子自由基和DPPH自由基，且在实验浓度范围内，清除能力随扶芳藤叶中总黄酮提取物浓度的增加而呈上升趋势。扶芳藤叶可加强作为天然抗氧化剂来源的应用。关键词：扶芳
4、藤；总黄酮；自由基；抗氧化性Study on antioxidant of the total flavonoids from Euonymus fortunei leaves (College of Life and Environment sciences, Huangshan University, Huangshan, 245041, China)Abstract: The extraction of flavonoids in Euonymus fortunei was studied and the antioxidant effects of the extract were e
5、valuated as well. Method: Euonymus fortunei leaves were extracted in Soxhlet extractor with petroleum ether and 75% ethanol, and then the extract was concentrated by vacuum, the total flavonoids were gotten from Euonymus fortunei leaves. The reduction capacity and the scavenging capacity to hydroxyl
6、 radicals, superoxide anion radicals, DPPH radicals of total flavonoids extracted from the leaves of Euonymus fortunei were studied. Result: The results showed that total flavonoids extracted from the leaves of Euonymus fortunei had a good anti-oxidant properties, and could effectively scaveng hydro
7、xyl radicals, superoxide anion radicals and DPPH radicals. In the experimental concentration range, its scavenging capacity rised with the increase of the concentration of the total flavonoids. The leaves of Euonymus fortunei would be enhanced development as natural antioxidants to improve economic
8、value of deep processing. Conclusion:The flavonoids from leaves of Euonymus fortunei was found have strong antioxidative activity. Key words: Euonymus fortunei; Total flavonoids; Free radical; Antioxidantion1引 言 扶芳藤（Euonymus fortunei（Turcz）Hand-Mazz）属卫矛科（Celastraceae）卫矛属（Euonymus L.）。扶芳藤四季常绿，耐荫性强且具良
9、好的抗寒能力，在园林绿化方面具有广泛的应用；扶芳藤是民间药材，全株均可入药，性味辛，具有行气活血、舒筋散瘀、止血、补肝肾等功效；摘其茎叶制成茶饮，不仅可以生津止渴，还具保健和药用价值（江苏新医学院，2006）；动物药理实验研究表明：扶芳藤的粗提物具有明显的降压作用（陈一，1993）。因此，扶芳藤是一种集观赏、绿化、饮用、保健和药用价值的资源植物。目前，扶芳藤的开发利用尚处于起步阶段，近年来，对于扶芳藤叶中化学成分及其各种制剂在临床上的应用，已有了一些报道（黄莹娟，1997）（袁晓等，1994），但目前对扶芳藤中总黄酮的提取及其抗氧化性能的研究，却还未见报道。本实验重点研究了从扶芳藤叶中提取的总
10、黄酮的总还原能力、对羟自由基、超氧阴离子自由基和DPPH自由基的清除能力，为扶芳藤作为资源植物的保健药用价值的深入开发提供参考数据。2 材料与方法2.1材料与设备2.1.1实验材料扶芳藤(Euonymus fortunei)植株采自安徽省黄山市黄山学院南区anVVVVVVVVVVVVVVVVVVVVVVVVVVVVVVVVVVVVVVVVVVVVVVVVVVVVVVVVVVVVVVVVVVVVVVVVVVVVVVVVVVVVVVVVVVVVVVVVVVVVVVVVVVVVVVVVVVVVVVVVVVVVV，由黄山学院生命与环境科学学院张慧冲副教授鉴定。2.1.2实验试剂芦丁（纯度99.99%，
11、中国药品及生物制品检定所），乙醇，亚硝酸钠，硝酸铝，氢氧化钠，PBS(磷酸缓冲盐溶液)，硫酸亚铁，DPPH（二苯代苦味酰基自由基）等均为国产分析纯。实验用水为二次蒸馏水。2.1.3实验仪器RE-52D旋转蒸发器（上海青浦沪西仪器厂）、HH-S数显恒温水浴锅（江苏省金坛市医疗仪器有限公司）、PL203电子天平（0.001g）（上海梅特勒-托利多仪器有限公司）、WFZ UV-2100型紫外可见分光光度计（上海尤尼柯仪器有限公司）、SXT-02索式提取器（上海洪纪仪器设备有限公司）及各种实验用玻璃仪器等。2.2 实验方法2.2.1 扶芳藤叶中总黄酮化合物的提取工艺（叶文峰等，2002）（杨新建等，2
12、012）新鲜扶芳藤叶洗净，置于60烘箱中烘干至恒重粉碎成粉末，称取2.500g扶芳藤叶干粉，用滤纸包装捆扎好置于索氏提取器中加入125ml石油醚回流浸提脱脂大约4h至无色取滤纸里滤渣用75%乙醇回流浸提约7h至无色收集提取液用旋转蒸发器减压浓缩浓缩液加水煮沸，过滤得总黄酮化合物提取液（加水定容至250.0ml）待用。2.2.2 扶芳藤叶中总黄酮提取物含量的测定（1）标准曲线的制备（陈飞彪等，2005）（杨俊等，2002）：称取10.000mg芦丁（芸香叶苷三水，烘干至恒重无水），用75%的乙醇定容至100.0ml，制成0.1mg/ml的标准溶液，转移至试剂瓶中保存备用。取上述标准溶液1.0ml、3.0ml、5.0ml、7.0ml、9.0m
