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1、正确认识、理解电泳的临床应用,临床电泳概述,电泳概念: 电泳技术就是利用在电场的作用下, 由于待分离样品中各种分子带电性质以及分子本身大小, 形状等性质的差异, 使带电分子产生不同的迁移速度, 从而对样品进行分离, 鉴定或提纯的技术.,蛋白家族比高低 阴极跑到阳极去 电弱体沉拖后腿 身轻电足跑第一 裁判断电比赛止 赛场排开五兄弟,电泳图形的五个区带，并不是都由单一组分构成，而是分别包括数个成分。,临床蛋白电泳的功能,电泳可用来鉴定体内是否存在异常的蛋白 鉴定血清或尿液中蛋白区带的升高或降低 鉴定单克隆蛋白 鉴定本周氏蛋白,临床中何时需要病人的电泳结果,怀疑有多发性骨髓瘤病(单克隆蛋白) 不明的
2、外周神经病（糖尿病、毒素照射、化疗除外） 根据其他实验室的数据，需要做蛋白电泳 总蛋白异常或白蛋白异常 尿蛋白升高 由于恶变而引起的血钙过多（如临床相关的症状为失重，疲劳，骨痛，异常出血） WBC、RBC升高 临床上出现如下症状时 炎症疾病、自身免疫性疾病、肾病、肝病、 蛋白丢失的相关疾病 总蛋白/白蛋白正常,血清蛋白电泳,从阳极到阴极，电泳区带及其主要成分如下： 前白蛋白区：前白蛋白（Pre A） 白蛋白区：白蛋白（Alb） 1球蛋白区： 1脂蛋白（1LP）、1酸性糖蛋白（1-AG）、1抗胰蛋白酶（1-AT）、1抗糜蛋白酶（1-AC）、C1脂酶抑制物(C1 Inh),血清蛋白电泳,1-2 球
3、蛋白区： GC糖蛋白（GC）、铜蓝蛋白（Cer） 2球蛋白区： 2巨球蛋白（2M）、胆碱酯酶（Che）、结合珠蛋白（Hpt）、2脂蛋白（2LP） 1球蛋白区： 脂蛋白（LP）、运铁血红素（HPX）、转铁蛋白（Tf）、C反应蛋白（CRP）,血清蛋白电泳,2球蛋白区： 纤维蛋白原（Fibr）、抗凝血酶-III(AT-III)、 纤溶酶原（PI）、因子B(FB)、 补体C1q、C1r、C1s、C3、C4、C5 球蛋白区： 免疫球蛋白IgA、IgD、IgE、IgG、IgM,血清蛋白电泳的临床应用,正常血清蛋白图谱,在电泳图谱中，白蛋白、1和带可出现均一且完整的波段；而2和带则是弥散的区带，且带更显强烈
4、一些。,血清蛋白电泳的临床应用,在脱色后的醋纤膜上检测前白蛋白区带很困难。 前白蛋白浓度增加：怀孕，肾病综合症 前白蛋白浓度减少：营养不良、肝病、急性炎症,血清蛋白电泳的临床应用,白蛋白：机体严重失水，如腹泻、呕吐及长时间出汗等。 白蛋白：低白蛋白血症（肝病、遗传缺陷、营养不良、饥饿等），由于肾损伤，严重烧伤或椎管内出血导致蛋白质的丢失。 急性炎症，怀孕和肿瘤可使白蛋白浓度大量减少。,血清蛋白电泳的临床应用,双蛋白区带 白蛋白的遗传性变异，导致在白蛋白区带中出现两个波峰。这两个波段所显示的浓度基本相同。这种情况经常是由一个正常白蛋白（Albn）和一个迁移率较慢的白蛋白（Albsl）所组成，Al
5、bsl区带在白蛋白和1区带之间,它无临床意义。,血清蛋白电泳的临床应用,无白蛋白血症 由于先天因素导致血清中白蛋白浓度极低或缺乏。无白蛋白血症主要特点是白蛋白产生明显减少，其血清水平低于10g/L。虽然血清中白蛋白含量非常低，但病人一般无症状。,血清蛋白电泳的临床应用,1区带 这条区带包括1-抗胰蛋白酶，1-酸性糖蛋白和脂蛋白。普通的染料不能使1-酸性糖蛋白着色，而1-抗胰蛋白酶却很容易被着色，所以1主要是指1-抗胰蛋白酶的浓度。,血清蛋白电泳的临床应用,1区带 正常的1区带在白蛋白和2区带之间，波峰平滑 1-抗胰蛋白酶：在炎症反应中，1-抗胰蛋白酶明显增高，它是急性时相反应蛋白之一。 1-抗
6、胰蛋白酶：肺脏疾病（严重的肺气肿）,血清蛋白电泳的临床应用,1区带 提示： -在血清蛋白图谱中，1区带偶尔会出现双峰现象，它预示着既有单克隆成分存在又有1-抗胰蛋白酶的改变。在一些罕见病例中，1泳带中会出现另一个较宽的波峰，它提示可能有甲胎蛋白存在。 -病人遭受严重创伤后（如手术）1波峰明显升高，同时1-抗胰蛋白酶也会升高。,血清蛋白电泳的临床应用,2区带 2-巨球蛋白（2-M）靠近阳极端，是蛋白酶抑制剂在抑制内生蛋白酶活性过程中起着重要的作用，如胰岛素，血浆酶和激肽释放酶等。,血清蛋白电泳的临床应用,2区带 2-巨球蛋白：在幼年和妊娠期是正常的生理性增高。 病理性增高主要表现在肾病综合症和急
7、性炎症。 2-巨球蛋白：肝病导致的蛋白丢失、类风湿性关节炎、服用一些药物及骨髓瘤。,血清蛋白电泳的临床应用,2区带 结合珠蛋白(Hp) 靠近阴极一端 结合珠蛋白可以防止血红蛋白从肾丢失而为机体有效的保留铁。结合珠蛋白不能结合亚铁血红素和非正常的血红蛋白。,血清蛋白电泳的临床应用,2区带 结合珠蛋白(Hp) 大量的血管内溶血最后会导致血清结合珠蛋白的耗尽，在电泳图谱中，靠近阴极一端的2区带会缺失。 结合珠蛋白：急性或慢性炎症，外科手术，心肌梗塞。 在炎症反应中，由于结合珠蛋白的合成明显增加而导致2电泳区带的波峰增高。 结合珠蛋白：溶血性贫血，肝病（肝硬化，肝炎，肝癌）。,血清蛋白电泳的临床应用,
8、在泳带中可出现 : 转铁蛋白 C3和C4补体成分 脂蛋白 转铁蛋白成分比C3补体的稍多，染色更强一些,血清蛋白电泳的临床应用,区带 脂蛋白 在醋纤膜上产生的是弥散的区带。脂蛋白的电泳迁移率通常与在样品中的浓度有关。在电泳图谱中，不同样品中的脂蛋白表现的迁移率有着明显的不同。脂蛋白可能在转铁蛋白或C3补体区带或在-区间出现。,血清蛋白电泳的临床应用,转铁蛋白 转铁蛋白：妊娠期、缺铁性贫血。 转铁蛋白：肝病，肾病，恶性肿瘤， 慢性炎症，慢性贫血等,血清蛋白电泳的临床应用,C3补体 它在区带中靠近阴极的一端 C3补体：肾小球链球菌性肾炎 系统性红斑狼疮（SLE） 自身免疫溶血性贫血 肝脏疾病,血清蛋
9、白电泳的临床应用,区带 ：高免疫球蛋白血症，肝病，慢性炎症，系统性红斑狼疮（SLE），单克隆或多克隆多发性骨髓瘤，淋巴瘤 ：慢性淋巴性白血病，轻链疾病，丙种球蛋白缺乏症，一些药物的影响等。,血清蛋白电泳的临床应用,血清蛋白电泳的临床应用,肝硬化 影响肝脏的疾病会使白蛋白和1的合成降低，使血清中这两种蛋白的浓度下降。然而，白蛋白血症表现为众多的肝细胞损伤和硬化，导致酒精对蛋白合成的抑制，及激素的改变。IgA合成的增高，并由酒精所引起的肝脏疾病，导致“-”桥的出现。,血清蛋白电泳的临床应用,血清蛋白电泳的临床应用,低丙种球蛋白血症 低丙种球蛋白血症是遗传或获得性疾病，其主要特点是一类或几类免疫球蛋
10、白浓度的减少，而这种缺陷大部分是由遗传引起的，获得性的低丙种球蛋白血症与单克隆丙种球蛋白血症有关，或与再次免疫抑制治疗有关。,血清蛋白电泳的临床应用,血清蛋白电泳的临床应用,单克隆丙种球蛋白病（M.G.） 单克隆丙种球蛋白病所涉及的临床情况较复杂。单克隆丙种球蛋白病（M.G.）的存在并不总是和多发性骨髓瘤病相一致，而是与其不同的的临床表现也表现出一定的相关性。,血清蛋白电泳的临床应用,血清蛋白电泳的临床应用,尿蛋白电泳的临床应用,正常尿液蛋白含量150mg/天 肾小球能够过滤的主要血浆蛋白: 白蛋白、低分子量片段、 免疫球蛋白 其他残余物：来源于尿道 正常尿液电泳带型:微量白蛋白 转铁蛋白（偶
11、尔）,尿蛋白电泳,临床做尿蛋白电泳过程,随机尿蛋白定量10mg/L搜集24小时尿测定尿蛋白总量（如果尿蛋白总量200mg/24h）做高分辨率尿蛋白电泳描述电泳带型结果出报告 根据报告形式如“可见到宽的白蛋白带；高区带；介于2和区域间的成分；2区带”，临床医生可进一步进行其他的定量分析如特定蛋白定量分析和免疫固定实验做出明确的诊断,肾小球性蛋白尿,尿蛋白带型 白蛋白浓染 1区带较宽，着色较深 转铁蛋白着色明显，带宽 血清蛋白带型 白蛋白明显减低 1 酸性糖蛋白和 -1 抗胰蛋白酶明显升高 大分子蛋白升高：2 巨球蛋白， 脂蛋白,肾病综合征严重的蛋白尿,尿蛋白3-5g/天 低白蛋白血症和低脂蛋白血
12、症 大面积的水肿,与肾病综合征相关的疾病,肾小球性疾病 增生性肾小球肾病 其它疾病 -感染 -药物 -肿瘤 -遗传病 -多系统损害性疾病,病历分析 -出现肾小球性蛋白尿的肾病综合征的病人,病史: 糖尿病/肾病综合征 血清蛋白电泳: 前白蛋白、 白蛋白、转铁蛋白 2 巨球蛋白 脂蛋白 尿蛋白： ：白蛋白、1 抗胰蛋白酶、 转铁蛋白、微量前白蛋白、 2区带蛋白成分,肾小管性蛋白尿,正常情况下肾小球滤过的蛋白95-99%由肾小管吸收 肾小管损伤导致的肾小管重吸收能力的下降，引起尿液蛋白的增多 引起肾小管性蛋白尿的原因 重金属（镉、金、铅、水银） 急慢性肾盂肾炎 氨基糖苷类药物引起的毒性反应 Balk
13、an 肾炎,肾小管性蛋白尿,血清蛋白带型 变化小或几乎无变化 尿蛋白带型 白蛋白微弱 2 微球蛋白出现导致2 区域有两条区带 2 微球蛋白出现导致2区域较浓染 游离的轻链导致 区域背景弥散,病历分析 -重金属中毒导致的肾小管性蛋白尿,病人：与重金属接触者 血清蛋白电泳带型： 基本正常 尿蛋白电泳： 微量白蛋白 2微 球蛋白 2微球蛋白,其他类型的蛋白尿,因运动引起的蛋白尿 剧烈的肌肉运动引起高分子量和低分子量的蛋白分泌增多 肾后性蛋白尿 多为偶然性蛋白尿，原因是尿中混有多量血、脓、粘液等成分而导致尿蛋白定性阳性。 溢出性蛋白尿- 尿中出现大量的低分子量的蛋白质如B-J氏蛋白，重链蛋白或其他免疫
14、球蛋白碎片，肌红蛋白及血红蛋白等,病历分析 -败血症引起的溢出性蛋白尿,病人：65岁，高烧、寒战、出汗、 关节和 肌肉疼痛 血清蛋白电泳： 前白蛋白、白蛋白、脂蛋白 和 转铁蛋白 1抗胰蛋白酶、珠蛋白、 C3、 C反应蛋白 尿蛋白： 微量白蛋白和转铁蛋白 酸性糖蛋白 急性时向反应蛋白微弱,尿蛋白电泳小结 高分辨率尿蛋白电泳是对尿液蛋白成分进行初筛实验的一个很好的方法。根据高分辨率尿蛋白电泳的带型，临床医生可进一步做其他的定量分析和免疫固定实验，这才是科学并且合理的尿液蛋白的分析过程。为什么在临床上要开展高分辨率尿蛋白电泳？原因在于此电泳形式可看到尿蛋白分布的全貌，避免临床医生对尿蛋白成分的漏检。定量分析只能对某种成分的蛋白进行定量，然而定量分析尿液蛋白应以尿蛋白电泳做为基础。如果不做尿蛋白电泳而只做尿蛋白的定量分析，往往会造成临床上的漏检。,谢谢！,资料可以编辑修改使用 学习愉快！,课件仅供参考哦， 实际情况要实际分析哈！,感谢您的观看,
