《子生物学的研究方法-电泳、杂交》由会员分享，可在线阅读，更多相关《子生物学的研究方法-电泳、杂交（53页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、笺五章分子生物学序:重组DNA技术回顾第一节DNA基本操作技术第三节RNA基本操作技术一RNA提取第三节DNA与蛋白质互作第四节基因组技术第五节蛋自质组技术第六节基因克隆技术究的主要方法一口DNA提取分离口核酸的凝胶电泳DPCR基因扩增口基因定点诱变口核酸序列分析回核酸分于杂交DDNA分子切割与连接仁王生物学_要北师大生科院-序:重组DNA技术回顾口重组DNA技术的诞生(一)重组DNA技术诞生的理论基础140年代明确了遗传的物质基础是DNALve心一一nodhdensHestkiedsnoothbacenaUye1IoughbaderaMeturefHeathledsnaothbadeDyeM
2、IoughbaclenaEdadDNAAddioeroughbaderiaCD。Tansfomaton2、50年代揭示了DNA分子的双螺旋结构模型和半保留复制TRANSCRIPTIONTRANSLATIONRKEPLICAIi0仪N仁才生物学_要北师大生科院-(三)关键性实验技术问世为重组DNA技术萸定基础DNA分子的切割与连接技术DNA序列分析载体构建和大肠杆转化体系的建立Southem杀志、和根合酶链式反应、核酸凝胶电泳。9ee口重组DNA技术的定义及步骤(一重组DNA技术T、重组DNA技术(recombinantDNAtechnology):按照人的意愿,在体外对DNA分子进行重再将重组
3、分子导入受休细胞,使其在一定地增殖、表达,以大量获得相关基因万或新品种新产物。胞P稳2.克隆(clone):指由一个细胞通过无性繁殖以后形成的与亲代完全相同的子代群体。分子克隆(molecularcloning):构建DNA重组体并导入宿主细胞建立无性繁殖体系。仁王生物学_要北师大生科院-重组DNA技术的二航步骤目的基因获得功能研究转化载体转入受体细胞1滨液I溶菌液:溶菌酶:蒋萄概,增加溶液的粘度,维持渗透压,防止DNA受机械剪切力作用EDTA:“CD墅合Mg2十、Ca2十等,披制脱氯核糠核酸酶;(2)有利于溶菌酶的作用,国为洙养醴的反应要汉有绞低的离子强度的环境。2.溶波IINaOH一SDS波:NaOH:核酸在pH大于5,小于9的溶波中,是稳定的。SDS:(D滨解膜脂质与蛋白。(2解聚细胞中的核蛋白。(3)与虾自质结合成为R-0-S03-.R十-蛇白质的复合物,使蛋白质变性。10
