家兔角膜内皮细胞的表达研究硕士论文

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1、家兔角膜内皮细胞的表达研究硕士论文所有动物的饲养及处死均按照nih的实验动物管理及使用指南进行。卡波姆(carbomer一940,美国古立德化学公司);质量分数0.15%地塞米松(江苏连水制药厂);sabc法免疫组织化学试剂盒、aqp一1多克隆抗体(武汉博士德公司);trizol一步法组织总rna提取试剂盒、一步法逆转录聚合酶链反应(one-stepreverse transcription polymerase chain reaction.rt-pc r)试剂盒(美国invitrogen公司)。3o只家兔按完全随机原则分为5组,分别为对照组,2、3、4、5周组,每组6只。家兔经25 g/l

2、异戊巴比妥钠60 mg/kg耳缘静脉注射进行全身麻醉,质量分数0.4% 盐酸奥布卡因滴眼液点眼2次进行表面麻醉,实验组用1 ml消毒空针自家兔左眼角膜缘内1 mm刺入前房,抽出房水0.2 ml,注入0.2 ml复方卡波姆溶液(含质量分数0.3% 卡波姆和0.025%地塞米松)制作高眼压模型。对照组左眼同法注入平衡盐液0.2 ml.术毕,双眼点用氯霉素滴眼液。造模后每日测量眼压1次,裂隙灯下观察眼结膜、角膜及虹膜等的反应。将h艮压升高至22 mmhg(1 mmhg=0.133 kpa),并能持续1周以上者为高眼压模型制作成功。建模后2周,处死对照组和2周组动物,3、4、5周时分别处死相应组动物,摘除左眼眼球。各组取3只眼球储存于一70 冰箱中用于rt-pcr检测;另外3只眼用质量分数4% 多聚甲醛溶液固定,石蜡包埋,用于免疫组织化学检测。

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