《【最新word论文】放射免疫法与FQPCR法检测乙型肝炎病毒相关性探讨【临床医学专业论文】》由会员分享，可在线阅读，更多相关《【最新word论文】放射免疫法与FQPCR法检测乙型肝炎病毒相关性探讨【临床医学专业论文】（3页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、1放射免疫法与 FQPCR 法检测乙型肝炎病毒相关性探讨作者：崔峰 任炜 刘金禄 卢成【摘要】 目的：探讨乙型肝炎病毒检测放免法、聚合酶链反应法两者的相关性。方法：323 份血清标本分别采用放免法、聚合酶链反应法进行检测。结果：放免法两对半大三阳中，HBVDNA 定量阳性率为 100%;两对半小三阳中，HBVDNA 定性阳性率为 44.92%;两对半 HBsAg、HBcAb、HBeAg、HBeAb 阳性中，HBVDNA 定性阳性率为 98.08%;两对半 HBsAg、HBcAb 阳性中，HBVDNA 定性阳性率为 50%;两对半 HBsAb、HBcAb、HBeAb 阳性中，HBVDNA 定性阳
2、性率为 0%;两对半 HBcAb、HBeAb 阳性中，HBVDNA 定性阳性率为 12.12%;两对半 HBcAb 阳性中，HBVDNA 定性阳性率为 0%;两对半五项全阴性中，HBVDNA 定性阳性率为 0%。结论：荧光定量 PCR 法检测 HBVDNA 是乙型肝炎病毒复制最直接的可信指标，可反映 HBV 真实感染和复制状态，特别是低复制状态，结合 RIA 法检测HBVm ，具有重要临床意义。 【关键词】 肝炎病毒/乙型;血清标志物;放射免疫法;脱氧核糖核酸;荧光定量聚合酶链反应【ABSTRACT】 Objective:To investigate the relationship betw
3、een HBVDNA determined by the polymerase chain reaction(PCR)assay and HepatitisB markers by RIA method.Methods:The serum samples from 323 cases with 8 different positive models were tested by Fluorescence quantitative PCR assay(FQPCR)and also by RIA to compare the results.Results:Among the patients,t
4、he positive rate of HBVDNA for the patients with positive HBsAg、HBcAb and HBeAe was 100%;the positive rate of HBVDNA for the patients with positive HBsAg、HBcAb and HBsAb was 44.92%;the positive rate of HBVDNA for the patients with positive HBsAb、HBcAb、HBeAe and HBeAb was 98.08%;the positive rate of
5、HBVDNA for the patients with positive HBsAb and HBcAb was 50%;the positive rate of HBVDNA for the patients with positive HBsAb、HBcAb and HBeAb was 0%;the positive rate of HBVDNA for the patients with positive HBcAb and HBeAb was 12.12%;the positive rate of HBVDNA for the patients with positive HBcAb
6、 was 0%;the positive rate of HBV DNA for the patients with all negative HBVm was 0%.Conclusione:HBVDNA determined by PCR assay is much more corrct and sensitive than HBVmarkers by RIA assay.FQPCR could be used as a excellent monitor for the state of HBV infection and its complication,especially for
7、the state of low complication.【KEY WORDS】 Hepatitis B virus,Serum markers,Radioimmunity 2method,DNA,FQPCR目前，医学检验技术水平随着医学事业的迅猛发展也在不断提高，为了满足临床工作的需要，检测方法由血清学、分子生物学向更精确的基因组学延伸，乙型肝炎病毒的检测已不局限于以往的酶免法(ELISA)，先后出现了放免法(RIA)，化学发光法和聚合酶链反应法(PCR)等检测方法，为临床疾病的诊断、疗效观察以及预后提供了可靠的依据。现将乙型肝炎病毒检测的放免法(RIA)和荧光定量聚合酶链反应法(FQPC
8、R) 两种方法的相关性加以比较。1 材料与方法1.1 标本来源 标本均系 200811 200903 月河北北方学院附属第一医院肝病门诊患者，乙肝两对半呈阳性者 316 例(其中包括大三阳 15 例，小三阳 187例，HBsAg、HBcAb、HBeAg、HBeAb 阳性 52 例，HBsAg、HBcAb 阳性 8 例,HBsAb、HBcAb、HBeAb 阳性 15 例,HBcAb、HBeAb 阳性 33 例，HBcAb 阳性 6 例)，全阴性 7 例。1.2 试剂和仪器乙肝两对半(放免法)试剂由潍坊 3V 公司提供，仪器为美国 FJ2008r 计数器。乙肝 PCR(HBVDNA) 试剂由中山大
9、学达安基因股份有限公司提供，仪器为瑞士罗氏公司 Lightcyce 全自动荧光定量 PCR 仪。1.3 方法乙肝两对半(放免法)和 HBVDNA 由经过专业培训的检验人员严格按操作规程和试剂盒说明书进行操作。2 结果323 例血清聚合酶链反应法 HBVDNA 定量和放免法乙肝五项的检测结果比较见表 1。2009 年 10 月崔 峰等：放射免疫法与 FQPCR 法两种检测乙型肝炎病毒相关性探讨3 讨论从表 1 中可以看出：对乙肝两对半大三阳 HBVDNA 定量检测平均值5.218107IU/mL，阳性百分率 100%;HBsAg、HBcAb、HBeAg、HBeAb 阳性 52 例中HBVDNA
10、定量检测平均值 3.110107IU/mL，阳性百分率 98.08%，以上这两种模式以高拷贝为主，反映 PCR、RIA 两者高度相关，病毒复制活跃、传染性强，应引起医生和患者的高度重视。对两对半小三阳 187 例中 HBVDNA 阳性 84 例，阳性百分率 44.92%，且以低拷贝为主，即乙型肝炎病毒两对半小三阳 HBVDNA定量阳性率低，反映一部分人病毒复制趋于停止，传染性弱，但仍有 44.92%患者具有传染性，不能掉以轻心。对乙肝两对半 HBsAg、HBcAb 阳 8 例中 HBVDNA阳性 4 例，阳性百分率 50%，即乙型肝炎病毒 HBsAg、HBcAb 阳性者 HBVDNA 定量阳性
11、率较高，反映 HBsAg、HBcAb 阳性者一部分患者仍有传染性，病毒仍在复3制，仍然需要治疗14 。以上结果表明乙肝病毒检测法 PCR 法、放免法两者高度相关，在乙肝病毒诊断方面具有较高的一致性、互补性。两对半大四阳模式中，HBVDNA 定量有 1 例103IU/mL，笔者认为有以下可能性存在：乙肝病毒发生了变异;病人在药物治疗中，药物抑制了病毒的复制;病毒复制量达不到阳性测定线。从我们所测八种乙肝病毒血清标志物模式中 HBVDNA 定量的百分率，可以看出不仅乙肝大三阳具有极强传染性和复制活跃，而且部分小三阳、HBsAg、HBcAb 阳性者仍然具有传染性和复制状态存在。故提示病人和临床医生应
12、将两者同时检测、综合分析，以进行科学合理的诊断和治疗。全阴性 PCR 法检出率在 12.5%2和 13.3%3，我们检测 7 例全部未检出，可能与检测标本少或试剂盒灵敏度有关。乙型肝炎病毒传统的检测方法酶免法“两对半”只能定性，即阴性或阳性，无法观察病人在治疗过程中的疗效情况，而放免法实际是一种半定量的实验方法，它可以从阳性数字的下降反映治疗的有效性。聚合酶链反应法(PCR)是模拟 DNA复制反应，能快速、准确地从少量标本中特异性的检测出体内病毒量的指标，直接反应 HBV 复制状态及传染性情况，对 HBV 感染的诊断和疗效观察具有重要的意义。【参考文献】1 丁静娟，张莉莎，田苗，等.乙型肝炎病毒 DNA 定量检测及意义分析J.贵州医药，2001，25(12)：105910612 张玉凤，于永兴，管永清，等.PCR 检测 HBVDNA 与放免法测定 HBVm 在临床中的应用J.临床医学，1997，17(5)：46473 赖一荣，陈坚梅.多聚酶链反应检测乙型肝炎 DNA270 例分析J.医学理论与实践，1998，11(4)：1761774 张滢洁,田忠社.三种检测乙型肝炎病毒方法相关性探讨J.实用医技杂志,2006,13(4):533534
