《实验、大肠菌群的检验》由会员分享，可在线阅读，更多相关《实验、大肠菌群的检验（28页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、实验、大肠菌群的检验Jinchutou.cCom实验目的“掌握鉴别大肠菌群的方法。*掌握以最大标率数法测定大肠菌群数量的方法。实验原理大肠菌群指一群能发酵乳糖、产酸产气、需氯和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽孢杆该菌主要来源于人畜粪便,以此作力粪更污染指标来评价食品的卫生质量,-推断食品有否被肠道致病菌污染。食品中大肠菌群以100ml检样内大肠菌群最可能数(MPN)表示。检验程序Ga6xUECatda0hE产气伊红顺蓉骆服平松Gi8ath心帕关匹职余罗英其余8F一一3t革笑民限性M一招杜广一不产气大胺幽脱明悦FaryTTT3大脱国砚刑体技告L_洁定实验设备*恒温培养箱:(36土1C*显微镜*培养*诚管
2、、移液管*-不角烧瓶、小倒管旦豪是三Z*载玻片实验试剂“乳糖胆盐发酵管:20g蛋白胡、59猪胆盐及10g乳糖溶于1L水中,校正pH为7.4,加25ml溴甲酚紫指示液(0.4g/L),分装每管20ml,并放入一个小倒管,115“C高压灭菌20min。“伊红美蓝琼脂平板:109g蛋白陈、2gK,HPO4及17g琼脂溶解于1L水中,校正pH至7.1,分装于锥形瓶内,121KC高压灭菌15min。临用时加人10g乳糖并加热溶化琼脂,冷至50一55C。加人20mL伊红溶液(20g/L)和10ML美蓝溶液(6.5g/L)摇匀,倾注平板。“乳糖发酵管:将20g蛋白陈和10g乳糖溶于1L水P,校正pH至7.4
3、,加入25mL溴甲酚紫指示液(0.4g/L),按检验要求分装,并放人一个小倒管,加热至115C高压灭菌15min。灭菌生理盐水:0.9%f“革兰氏染色液:D结晶紫染色液:19结晶紫溶于20mL95%乙醇,与80mL草酸铰溶液(10g/)混合,摇匀。荣兰氏碘液:19碌不29候化钾混合后,用少量水溶解,稀释至300mL。沙黄复染液:0.259g沙黄溶于10ml95%乙醇中,H水稀释,混匀。然后用90ml实验内容与步骤1检样稀释(无菌操作)GO将25mL(或g)检样置于含225mL灭菌生理盐水的灭菌玻璃瓶,充分振摇(固体检样用匀浆器,用8000一10000rImin的速度处理1min)制成1:10的均匀稀释液,用1mL灭菌股管吸取1:,I0梓释液imL,注入含有9mL灭菌生理盐水的试管内,混匀,制成1:100的稀释液。另取ImL灭菌试管,按G)操作依次做10倍递增稀释液,每稀释一次,换用一支1mL灭菌试管。2乳糠发酶实验接种2mL待检样品于乳糖胆盐发酵管内。糖胆盐发酵管都不产气,见菌群阴性,如有产气者,贝淑种3个稀释度,每一稀释度接种3管,署(36土1C混箱内培养(24土2)h如所有乳可报告为大肠杆则按下列程序进行。
