《t细胞斑点试验》ppt课件

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1、伟“结核病是全球严200万人死于结核。E的公共卫生问题之一。据WHO统计,全球约有20亿人感染结核分枝杆菌,每年有约伟_我国是世界上22个结核病高负担国家之一,结核感染导致的死亡人数是其他传染性疾病总死亡人数的2倍以上。伟结核菌素皮试:低敏感性:免疫力低下人群中其敏感性大大降低。低特异性:与卡介苗接种和其他环境分枝杆菌有交叉,易造成“假阳性“结果。伟细菌学检查:常规培养:2月;快速培养;1周;阳性率取决于采集标本中细菌数量,不利于早期诊断。伟病理学检查:阳性率低,对取材标本有较高要求,有创伤,对肉芽肿性病变需进一步鉴别。令结核感染的免疫应答反应以细胞免疫为主,结核感染后体内长期存在抗原特异性的

2、记忆性T细胞仪当再次遇到抗原刺潘时,能迅速活化增殖,释放r干扰之I干扰素是T-SPOT.TB技术:仪利用结核杆菌感染者外周血单个核细胞(PBMC中存在结核特异性T细胞,这些淋巴细胞在受到结核特异抗原刺激后分泌r干扰素而设计的T细胞免疫斑点试验。之检测外周血中受结核牺异拗原刻激释放r平扰素的T淋$免疫显色后,通过ELISPOT分析系统对斑点进行计数,1个斑点代表一个细胞,计算出抗原特异性细胞的频率。粼基于T淋巴细胞检测结核感染的原理pnAa林AgAs颂4astrewe)RixuptEEE晓yecozA7wgn万一2|COn冉Etsmenanan根据抗原A或/和抗原B孔的反应判断结果:=囱性对照孔

3、斑点数为05,阳性样本*(抗原A或抗原B斑点数)-(阮性对照孔斑点数)6.一当阴性对照孔斑点数尹6spots,阳性样本应为:*抓原A或抗原旦斑直数)仁2X(园性对照孔赓点数如果阳性对照孔结果良好,但抗原A或抗原B均达不到阳性样本判断标准,则结果为阴性。阳性结果说明患者体内存在针对结核杆菌的效应T淋巴细胞。阴性结果提示患者可能不含针对结核杆菌的效应T淋巴细胞。之空自对照孔内于20时视为试验有效数小于10且阳性对照孔内斑点数大怀T-SPOT.TB试验结果用御106PBMCs中班点形成细胞(SFCs)的数目来描述,即SFCs/105PBMCs哈T-SPOT.TB高灵敏度。T-SPOT.TB检测单个反应细胞-可以检测样品中每一个反应的T细胞免疫功能低下的患者,只要单个的T淋巴细胞有反应,世同样可以被检出T-SPOT.TB检测所有类型的T细胞亚型:CD4和CD8T细胞均被检测-即使HIV患者中CD4T细胞被清除,只要CD8细胞有针对抗原的反应,也同样被检出

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