《凝集抑制试验快速测定循环免疫复合物》由会员分享，可在线阅读，更多相关《凝集抑制试验快速测定循环免疫复合物（5页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、凝集抑制试验快速测定循环免疫复合物中华医药杂志2005年第5卷第10期【关键词】 多株类风湿因子【摘要】 目的 推荐一种操作简便、快速的常规定量测定循环免疫复合物的方法。方法 用多株类风湿因子（pRF）乳胶凝集法定量测定血清中免疫复合物。结果 共测定30例健康献血员和各种病人200例。正常人的平均含量为79.431.95g/ml,系统性红斑狼疮病人的平均含量为526.42.28g/ml,该值显著高于正常人对照组（P0.01）。结论 本法不需特殊分析仪器，操作简便迅速，重复性及稳定性好,是临床常规定量测定循环免疫复合物的使用方法。【关键词】 多株类风湿因子；快速；定量测定；循环免疫复合物 Rap
2、id determination of circulatory immune complex from inhibitive agglutination testXU Zhi-Yi.Health School Affiliated Shanghai Second Medical University, Shanghai 200092,China【Abstract】 Objective To introduce a rapid and easy method of routine quantitative determination of circulatory immune complex.M
3、ethods Quantitative determination of immune complex in serum from inhibitive agglutination test with polystrain rheumatoid factor (pRF) emulsion.Results Determination was carried out from 30 healthy persons and 200 various cases. Average value of normal people is 79.431.95g/ml and that of systemic l
4、upus erythematosus (SLE) sufferers is 526.42.28g/ml which is evidently higher than that of normal people（P0.01）.Conclusion With this method of determination no special analytical apparatus is needed. It is easy to master and can give results rapidly. Besides, it shows good repeatity and stability an
5、d provides a practical means of clinically determining circulatory immune complex routinely.【Key words】 polystrain rheumatoid factor;rapidity;quantitative dermination;CIC 免疫复合物(IC)系指由抗原与其相应抗体结合而成的复合体。正常情况下，体内IC的形成可清除异物，起到有利的免疫保护作用，但在某些情况下，也可导致免疫复合物病。其关键除机体因素外，也取决于IC的大小和溶解度。体内形成的IC一般有3种形式：一是大的IC(19s)
6、，可被吞噬细胞吞噬去除；二是中等大小的IC(约19s)，往往易沉着于局部导致组织损伤；三是小的IC(r0.05,P0.05）。造成相关性不够理想的原因可能是和复合物的大小、组成、性质及补体反应能力等有关。有人认为，各试验所测的CIC之间有着质和量的差别13。见表2。表2 各试验结果间的相关性略2.4 关于方法学 众所周知，循环免疫复合物的测定方法众多，但各有欠缺。1981年WHO国际免疫学会曾统一推荐9固相或液相C1q法、固相胶固素结合试验、Raji细胞放射免疫法、单株或多株类风湿因子抑制试验等方法。有人认为10，目前循环免疫复合物的测定方法中最敏感的是固相胶固素结合试验和Raji细胞放射免疫
7、法，其次是C1q结合试验和固相mRF抑制试验。但作为理想的循环免疫复合物测定法，除了要有高度的敏感性外，还须具备相对特异性、检测范围广、重复性好、简便、适用于常规应用等条件。前3种的共同特点是只能测较大的免疫复合物（检测小的CIC更有意义）和依赖补体的免疫复合物，且需要同位素的特殊检测仪等。此外，固相胶固素结合试验仅对C3b的短寿命中间片段C3bi敏感，所测的循环免疫复合物就更局限，且EDTA和含乙胺酰基的糖类会抑制胶固素的反应。Raji细胞法需维持细胞株，且细胞培养条件对结果影响很大，难以做到标准化。死的Raji细胞可释放核抗原、胞浆，会导致假阳性。血标本中若有抗淋巴细胞抗体或抗补体抗体也可
8、导致假阳性，过量补体可抑制该反应。C1q法不能检测IgG4及旁路激活补体的免疫复合物，另外C1q对DNA及其他多聚阴离子物质非常敏感，试验中干扰因素较多，而且C1q含量少，不易精制和保存。至于单株类风湿因子(mRF)，其虽敏感度高、受内源性RF干扰小，但mRF很难获得。可见上述方法作为常规测定均有不同的缺陷，而pRF胶乳凝集抑制试验恰恰能弥补以上方法之不足，且敏感性与它们相比毫无逊色。多株类风湿因子（分子量约100万）主要属于19sIgM，是类风湿性关节炎、各种胶原性疾病及多种慢性疾病时出现的一种多株性变性IgG的自身抗体与循环免疫复合物和热凝聚IgG的亲和力很高，与单体IgG几乎不结合。与单
9、株类风湿因子相比更具取材方便的优点。本法的敏感性较高（10g/ml）、重复性好（变异系数为4%）、稳定、且可测大至19s以上，小到8s的免疫复合物，后者更是胶固素、Raji细胞、C1q等敏感方法所不能及的。此外，作为常规测定法，本法更具有不需特殊设备、操作简便、成本低、不必考虑补体因素，适于大批量标本检查等优点。然而，其也非十全十美，某些因素的存在有时会影响试验的结果。2.5 影响因素 部分病人血清中存在内源性RF会干扰试验，因而须将其去除才能提高检出的阳性率。国外有不少去除内源性RF的方法，如二硫苏糖醇(DTT)法及亲和层析法2、2-巯基乙醇法5等。本文采用的二硫苏糖醇(DTT)法虽简便，但
10、仍无法避免IgG型RF造成的假阴性。尽管RF一般与单体IgG的亲和力极小，但由于Ig类别不同，RF的抗体活性也很不均一，因此不同的RF在与CIC反应时，可受单体IgG不同程度的抑制。当血清中有大量单体IgG并存时，所选择的RF对聚合的IgG(包括AHG和CIC)亲和力越高，则受单体IgG的干扰越小，试验的敏感性与特异性越高。换言之，试验的特异性与敏感性是受所选择RF的影响7。pRF法的另一不足是不能检出IgG型以外的CIC。另外，当室温下降（15）时，pRF试验反应较慢，可能会影响结果的判断。为了获得准确的结果，每次试验要同时做阴性和阳性对照。2.6 关于正常值 我们对30例健康献血员进行了免疫复合物定量测定，平均含量为79.431.95g/ml。有报道135个实验室同时用pRF测定40例正常人，其平均含量为83.67.56g/ml,可见结果相近。正常血清中存在着微量凝聚IgG。国外学者2也认为正常血清中存在非特异性抑制因子。本法所测IC量可能包括上述物质，然而本文以正常X+2SD为正常值，所测各病例的结果与临床诊断有较好的一致性。
