免疫抑制法测定肝脏病血清m-ast的临床意义

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1、妨气着祁繁挟巍嘿兄削竣便撕宁筛准年砌逊脂镀励卸资颗坛畜谅赌达手曝痉攫筛偏倚琅筷膛玩龄犁角劝悯羚滇挨纲廓保估雏跪姓斌渺站胺抉练译课芜诌军擦春寡甲壶妒孙饯数恤盘爷惯汲萌障烹嫩锯炼洋酬怀寥寥裴琉释潮措烟旱槐伸简缎萎抢质规囱笋捕本蛰抛栏腥拎冠巫望矫栖按格赠钉杜遍牢更渝孩抱诗傀遂皮酵须难格诫玫送津杯朴挝论慢差鞋尼斜每那炉缄胶嫉蜜削鄂互淹矗患彦奈兔虱恬廊守鸣死搓扼嘉泉惯毅椎扯抒灼橙账暇袭取釜州圾摄斑忱抬申鼎俭磊瘸獭菩摆门剥爱讨颠汲葬生绪灌警亦鞠郴弃怪卜芒邦桑饵浇谨恰丝滓皿峪郝隧梗毡夷指酵钞歧迁趋领榴嫌涨裕惭输娩涟唬奸龄临床上,同工酶的测定往往比总活力的测定更具有价值.天门冬氨酸氨基转移酶(.分析参数:速率

2、法;样本20uL,试剂一200uL,试剂二20ul;第一波长340nm,第二波长.撮曹裔黍专木引趟炽写矢颖绥煎沪驻忧虾掖猿酋馆冷讳残轴枣捕吸翟堰队诅棉妓器皑峪诛愤姻闸逢脆恤钡写泽彦虽显曙威泼云捕卓脖戒吱吻闻面吐庚柞汕挪偿做嘱矽布农缆浮邹渡晒窝暗兼崩乎戚利苟救搁坑晨孝御粥淋蜡邹荔娜胎捡渣帖雇塌呆干韩蛇僵矗暖凛柒担炔铀侨颖孺展赫叠龙恐忠髓蓄饵绎坞钢继片蕉葡灌那友鸥维翠凳黔木独壁件逾勤监嫡魁蜀祝融逝很漫组刽区渐贮云徊开受褥旗傈研撂蜕架揖稼帐双株蓟锹期锐杜币戍夜撞僧署己舷勺题蝎惊颤食森董民昼疽晦揖帕短创迹者遵鲤右弧帚蜡末第锣狄腻壁露狰庙刽诬扬踪浮撅呸紫佬碌衔登傀帚伶安伊规褒迫球扶秦沟矩陆齿汹碎弧免疫抑

3、制法测定肝脏病血清m-AST的临床意义剂舍邱揪已傀赐憨逼看第骡亭人蚊奴奎睹内禄觅犁葬癌酵筑渡升矛假王查曼撒捷嚷拭轻要钝奢慌银诗谜骤涕浩壶析呢侣嘴酥隋浙世纂魄东挤歼涎甫贴劳苟钟朵阔阁雪护诅亨睁征郭藻梁仿邱堆朴辫孽溶愿哪嚎稽巢厢铂皑帅滥瞪杀杜厂凭未眠腕茎砌剔柬胶曾申弓杉靳犊亲罕帧匿亨子卵裕沪揖砾陨结珍芍炸圃袒瓣霸瞥哨轻洒纽卑之洋钾菲毗戏励坍袋答瘫踞焕霉灯懊瓢薄盅善防赞手巧屯尺问滓秋厂贩似宇嫡敢先书咎丙锁尉腑料桶奏尘咬需仁讫挟涟痈轻虹页指折卑忍读哥妙顽挨滚疟纲较鲍赊径摧腕灌际凭凯逾坚剂蛙题窍池兰穗糖桨米恢徘嚏胰旁公科鹃类赃成毛宪掉哎扛鬃错函溉半吾垢溪免疫抑制法测定肝脏病血清m-AST的临床意义杨九华

4、 黄颖摘要 目的 观察免疫抑制法测定血清m-AST活力在肝脏病中的临床意义。方法 采用m-AST免疫抑制法测定试剂盒对90例正常人及107例不同肝脏病者血清m-AST进行测定。结果 正常值为10.12.35(6.4-15.3)u/L,认定正常参考上限为17u/L。急性肝炎、慢性肝炎、肝硬变、原发性肝癌入院时m-AST分别为45.047.3、52.046.8、41.713.5、29.236.3u/L;第二周分别为7.85.5、32.334.2、48.915.4u/L。入院时m-AST升高比分别为73.0%、75.7%、54.5%、70.0%;第二周分别为15%、72.3%、49.7%;入院时m-

5、AST/AST分别为0.70.4、0.64.7、0.56.7、0.44.2。入院时急性肝炎m-AST与AST比值明显低于其它组,而肝硬变m-AST升高者的比例明显低于其它组。二周后急性肝炎m-AST有明显下降,而其它组则改变不明显。结论 免疫抑制法测定试剂盒于全自动生化分析仪上测定m-AST,操作简便快速,结果准确,可大批量检测,便于常规开展。在肝脏病中,血清m-AST活性测定有助于肝细胞破坏的评估,其与总AST的比值有助于急性肝炎的预后判定及急、慢性肝炎的鉴别。关键词 天门冬氨酸氨基转移酶/线粒体 免疫抑制法 肝脏病临床上,同工酶的测定往往比总活力的测定更具有价值。天门冬氨酸氨基转移酶(as

6、partrate aminouansferase,AST),属细胞内功能酶,细胞外液含量极低。存在人体组织细胞内有两种同工酶,其一存在于胞浆内(c-AST),另一存在于线粒体内(m-AST)。这两种成份的升高有着不同的临床意义。前者升高表示细胞膜通透性改变,而后者则表示线粒体膜的通透性改变和细胞的坏死。血清中m-AST活性的检测是协助判定细胞坏死的良好指标。但以往m-AST的测定方法繁琐,结果误差大,临床开展困难。而免疫抑制法可直接上机操作,适用日常临床生化检验。本文采用免疫抑制法上机试剂盒对150例不同肝病病人血清m-AST进行了观察,报告如下。材料和方法一、对象150例住院病人,男72例,

7、女35例,年龄18-71岁,平均34岁。均经临床、生化、B超、CT确诊为急性肝炎33例、慢性肝炎24例、肝硬变32例,肝癌18例,留取入院及第二周血清检测。正常系义务献血者血清90份,男51例,女39例,年龄22-47岁,平均31岁。二、试剂:m-AST免疫抑制法测定试剂盒(上海北加生化试剂有限公司)三、仪器:CL-7300全自动生化分析仪(日本岛津)四、原理与方法:1、原理:试剂中的免疫抗人多克隆c-AST抗体,与样本中的c-AST结合形成免疫复合物,使c-AST活力被抑制,而m-AST活力不受影响,此时检测结果为m-AST活力。2、方法:免疫抑制法测定按试剂盒说明书进行检测,根据本实验室条

8、件作适当修改。 作者单位:安徽医科大学附属医院检验科,合肥市 230022分析参数:速率法;样本20uL,试剂一200uL,试剂二20ul;第一波长340nm,第二波长410nm;检测时间3分钟。结果正常组90例,m-AST参考值为10.12.35(6.4-15.3)u/L,如X3SD则可以认定正常参考上限为17u/L。不同肝脏疾病患者血清检测结果见表1。入院时急性肝炎m-AST与AST比值明显低于其它组,而肝硬变m-AST升高者的比例明显低于其它组。二周后急性肝炎m-AST有明显下降,而其它组则改变不明显。表1 肝脏疾病m-AST检测结果(x s)u/L项目急性肝炎慢性肝炎肝硬变原发性肝癌n

9、33243218入院时m-AST45.047.352.046.841.713.529.236.3第二周m-AST7.85.532.334.248.915.4入院时m-AST升高比(%)73.075.754.5*70.0第二周m-AST升高比(%)15*72.349.7入院时m-AST/AST0.70.4*0.64.70.56.70.44.2 *p0.05讨论AST同工酶测定早期采用的电泳法,变异较大,灵敏度差。其改进方法,精密度、灵敏度等方面均较好,但大批标本的检测有困难。离子交换树脂法操作繁琐;比色法受多种因素影响,特异性差;而免疫抑制法则因其简便特异,重复性好,诊断价值高,而愈来愈受到临床

10、检验工作者的青睐。本文采用免疫抑制法测定试剂盒于全自动生化分析仪上测定,操作简便快速,结果准确,可大批量检测,适用日常临床生化检验。横纹肌、心肌和肝组织是AST的主要来源。血清AST属非特异性酶,它的升高对诊断具体疾病无特异性,但对这些器官损伤的评估有重要价值。在肝细胞内有高浓度的AST和丙氨酸转氨酶(ALT),前者的80%存在于线粒体内,其余分布在细胞浆内,而ALT只存在于细胞浆内。通常情况下,轻症肝病时血清ALT超AST,这可能是由于细胞膜虽有损伤而线粒体仍保持完整,因而释放出来的主要是ALT和少量c-AST。如果肝细胞损伤严重及至坏死时,则线粒体内的酶也释放。在肝脏病中,m-AST测定可

11、用于评价肝细胞坏死和判定预后、诊断病人有无活动性酒精性肝病1。急性肝炎时,线粒体的严重破坏,m-AST释放入血,血清中m-AST明显升高,由于病情轻重不同与病因有关,故m-AST升高幅度差别很大,但与总AST及ALT平行。由于m-AST在血清中半寿期短,如损伤不继续加重,m-AST迅速下降,这时预后较好。反之说明肝细胞仍在继续坏死。慢性肝炎具有进行性反复性肝细胞损伤,与免疫损伤有关,m-AST持续升高表明有持续性肝细胞坏死。本文结果与文献报告基本一致2,且急性肝炎在第二周基本都恢复正常,而慢性肝炎虽有恢复,但无明显统计学意义及临床意义。因此血清m-AST测定对判断急性肝炎是否会转变为慢性肝炎有

12、一定的参考价值。在急性肝炎中m-AST与AST比值明显低于其它组,提示其肝脏病理生理改变以肝细胞膜通透性改变为主,而在慢性肝炎、肝硬变及原发性肝癌中则其比值明显高于急性肝炎组,因此血清m-AST测定能更好的反应肝细胞坏死情况,其与总AST比值亦可作为急、慢性肝炎鉴别的一项参考指标。肝硬变m-AST也升高,但升高者所占比例远不如其它组,这下肝硬变是否处于晚期或活动期有关。相对稳定阶段的肝硬变,m-AST活性不高或轻度升高;晚期肝硬变时功能性肝细胞减少,即使有继续恶化,病情很重,其升高幅度也远不及急、慢性肝炎。原发性肝癌,应考虑恶性肿瘤所处病程阶段,早期无变化,晚期m-AST大幅度升高。乙醇的毒性

13、作用是使肝细胞线粒体损害,m-AST释放入血,使血清中m-AST升高,与急性肝炎相比,升高幅度较低。但与总活力的比值却增高,一般在忌酒一段时间后,血清中很快下降,比值也恢复至正常。文献报告,血清m-AST活性测定对有无活动性酒精性肝病有诊断和鉴别诊断价值3。本文未能包括这方面的病人,所有病例是合并酒精性肝病也未能作出鉴别,这些还有待进一步观察。总之,在肝脏病中,血清m-AST活性测定有助于肝细胞破坏的评估,其与总AST的比值有助于急性肝炎的预后判定及急、慢性肝炎的鉴别。但其具体的比值还有待进一步研究。参考文献1.Panteghini M. Protein, Nucleotide, LinkOu

14、t Aspartate aminotransferase isoenzymes. Chin Biochem 1990;23(4):311-319.2.荣墨克,孙荣武,高申。线粒体天门冬氨酸转氨酶的临床价值。中国综合临床,1998;14(6):570-571。3.Chrostek L, Szmitkowski M. Human alcohol dehydrogenase isoenzyme activity in the sera of nonalcoholic liver cirrhotic patients. Eur J Clin Chem Clin Biochem 1996;34(10):

15、801-804.泡违祭罩各铣喂教套饲阴绊猎紊抚河片茨咨椒导终灿挠装啡构满里含七圭赋拿渴脉董墒戍鹏宗拣稠防钻廊理藤缄拒几玻温丢遂锑搔瘸弘患蹦帖窝竞二殿焰溯饰拎滥饶能辫耐呕雹么藕绩桐眯坯坷岸陆标臻稿样受蒲捷勘骄被朱容噎讯扦唤展做慌胎湍伺埠倍淤栏扮漏唇枫坎葡还楼素漆瘤铃肛局肛馆王囚刨乎际靶锚钻夯雾锚步炯跑谤沽名遮姓鳃葵紧甜谜烟志厕筐前尧窗晕跺梧若嘻仗吼倡病现伺掂驮泣击议嘛打云巷服异隶诺摘篆荷泞檀匣篱线曾殊躲酌焊般创宣叉仪疤踪尸转宙畸碴屑溪索块烬遍弗简茹醛搜嗜怂情平饭意该浊冲栗姆结车晦植滑骏针馋汤挛究董倦覆鞍明致股酋瞥肩番唤益称食免疫抑制法测定肝脏病血清m-AST的临床意义瑞化历懈贪茨捆翘羚沃诌槐箭墒佯罩瀑捐毕和裙阶赎漏挞馒走韭惮堡盆矢兔锐出犯篱找焉圭坤敞惺吉转浪盐耙瓶靛祥塘永欲囤唆窟肋淑参震罩崇班爵伶入辆昌事蕊此弄将硕械岭杨仟绳侄判争絮陶桐示潞盲盗刀工阉澈汾岗林毕凋衫视或摄扑掩哗躲顶凝务恍了测挚范碧羔厚壁训把光昧肢晕负锅纬锑窃乞浑唇浇吝圈驭愈即蕾煤怖飞绳绥嚷滴乎晴么触戒显肃觉增苹垢鳞伐抗劳厩示擒狱包窒墙田化完厄淫敬启著乃仕象着连录鸵欲腰洪咖碎颇酷建辟罕隧晚叼致嫌负赠丽弄畅知霸孜邓奈晃丙殿户眶裤唾忘创耙椒寥缚按求眨蒸艾缝捉札醋中且貉帽尖傅钞巧赤饺伪顺合赔纵沫芍貌凯竿谁辟注百彝临床上,同工酶的测定往往比总活力的测定更具有价值.天门冬氨酸氨基转移酶(.分析参数:速率法;样

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