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1、实训二：植物细胞周期观察一、 实验目的掌握染色体的制片方法，观察染色的动态变化。二、 实验原理。有丝分裂是细胞分裂的主要方式，通过有丝分裂增加细胞的数量而使植物有机体不断生长。植物种类不同，植物细胞的周期所需要的时间不同。每天都有细胞分裂的高峰时间，此时把根尖或茎尖固定，经过染色和压片，利用显微镜进行观察，可以观察细胞周期的各个时期和染色体的动态变化。三、 器材与试剂1、 用具：载玻片、盖玻片、小烧杯、镊子、吸水纸等。2、 药品：无水乙醇、冰醋酸、浓硫酸、改良的苯酚品红、蒸馏水等。3、 仪器：显微镜。四、 实验步骤(一) 材料培养把剥好皮的大蒜置于盛有水的杯子上、待定根长出2cm时，进行预处理
2、。(二) 预处理预处理可以降低细胞质的黏度，是染色体缩短分散，防止纺锤丝形成，是更多的细胞处于分裂中期，一般在分裂高峰期前把根尖放在药剂中处理34h。(三) 取材固定将预处理后的根尖剪下，放入比例为3:1的无水乙醇和冰醋酸的固定液中，固定224h并放在冰箱里保存。(四) 制片1) 水洗：将从保存液中取出根尖用水中洗干净；2) 解离及制片：解离的目的是使分生组织细胞间的果胶质分解，细胞壁软化或部分分解。是细胞和染色体容易分散压平3) 酸解法：用浓盐酸和乙醇的混合液（比例1：1），室温下处理根尖56min。根尖高分生组织经过酸解和压片后，都呈单层细胞，但是大部分分裂细胞的染色体还包在细胞壁中间。用
3、蒸馏水漂洗酸解后的根尖，放在载玻片上。将伸长区以上部位切除，保留分生组织细胞，并将生长点细胞切成碎片组织的大小，一般每一根尖可制片34片，加上一滴改良的苯酚品红染色液，染色68min。根尖着色后即压片观察。(五) 压片与观察：一个解离良好的材料，只要镊子尖轻轻地敲打盖玻片，分生组织细胞就可铺成薄薄的一层，再用毛边纸把多余的染色液吸于，经显示器观察检查后，选择理想的分裂细胞，再在这个细胞附近轻轻地敲打，是重叠的染色体渐渐分散，就能得到理想的分裂相。选择细胞分散，分裂相较多以及染色体形态舒展的制片进行观察。五、结果与分析1、 实验中所取压片材料要少，避免细胞紧贴在一起，致使细胞和染色体没有伸展的余地。2、 解离时间不可以过长，以免染色体结构受损。3、 用镊子敲打盖玻片时，用力要均匀，若在压片时稍不留神，会使个别染色体丢失，而被迫放弃一个良好的分裂相得细胞。4、 根尖培养：记录根尖培养的温度，时间及各时间段根尖的变化情况。根尖培养时要做两组对照，一组用黑纸将小烧杯包住，另一组不醉处理，看两组长根情况是否有显著差异。 大蒜根尖细胞周期分裂图如下：（从左到右观察）可看到细胞的间期、前期、中期、后期、末期。
