临床医学论文-高效液相色谱法测定复方磺胺甲口恶 唑片中磺胺甲口恶 唑和甲氧苄啶含量【摘要】 目的 采用高效液相色谱法测定复方磺胺甲口恶唑片中磺胺甲口恶唑和甲氧苄啶含量方法 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，Hypersil C18 柱（5μm,4.6mm×250mm），用冰醋酸调节水-乙腈-三乙胺（80：20:0.2）pH 值至 5.90±0.10 为流动相，流速为 1.0ml/min 检测波长为 240nm结果 制剂中磺胺甲口恶唑和甲氧苄啶峰面积与含量的相关系数分别为 0.99999 和0.99999，回收率在 100.1%和 100.5%结论 该方法分离效果好，适于制剂的质量控制 【关键词】 复方磺胺甲口恶唑片 高效液相色谱法 磺胺甲口恶唑 甲氧苄啶 含量复方磺胺甲口恶唑为磺胺类抗菌制剂，具有普遍的确定的临床疗效原含量测定的方法［1］较复杂，步骤较多，故将其方法改进为高效液相色谱法，可快速准确分离两组分，检测结果满意现报告如下1 实验材料安捷伦（美国）HP1100 高效液相色谱仪，G1311A 四元泵，G1315B 紫外检测器，G1316A 柱温箱，G1313A 自动进样器，G1379A 托气机。
磺胺甲口恶唑、甲氧苄啶对照品为中国药品生物制品检定所提供，批号分别为 100025-199503、100031-200304，纯度均为 100.00%复方磺胺甲口恶唑片及辅料（吉林恒河药业股份有限公司）；乙腈（美国进口色谱纯），三乙胺和冰醋酸均为分析纯；实验用水为适合色谱条件的去离子水2 色谱条件与系统适用性实验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-水-三乙胺（20：80：0.2）用冰醋酸调节 pH 值至 5.90±0.1,0.45μm 有机滤膜抽滤为流动相；检测波长为240nm，理论塔板数按磺胺甲口恶唑峰计算，应不低于 13000，磺胺甲口恶唑峰与甲氧苄啶峰的分离度应不低于 12色谱图见图 13 含量测定试验方法与结果3.1 线性试验 精密称取磺胺甲口恶唑对照品 76.18mg 与甲氧苄啶对照品16.02mg 置 25ml 量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取 5ml 置50ml 量瓶中，加流动相至刻度，摇匀作为对照品溶液，分别进样1、3、5、10、15、20、25μl，记录色谱图结果表明磺胺甲口恶唑进样量在0.3047～7.6175μg 范围内与其峰面积呈良好线性关系，其线性方程为Y=1708.6X+22.6701,r=0.99999（n=7），甲氧苄啶进样量在0.0641～1.6025μg 范围内与其峰面积呈良好线性关系，其线性方程为Y=3282.09X-6.2949,r=0.99999（n=7）。
3.2 稳定性试验 取对照品溶液与供试品溶液于室温下立即测定与放置4、8、12、24h 测定，其峰面积几乎无变化对照品溶液磺胺甲口恶唑峰面积的积分值的 RSD 为 0.13%（n=5）、甲氧苄啶峰面积的积分值的 RSD 为0.32%（n=5），供试品溶液磺胺甲口恶唑峰面积的积分值的 RSD 为0.24%（n=5）、甲氧苄啶峰面积的积分值的 RSD 为 0.49%（n=5）说明本品的测定溶液在 24h 内稳定3.3 精密度试验 取对照品溶液与供试品溶液，测得峰面积，对照品溶液中磺胺甲口恶唑与甲氧苄啶的 RSD 分别为 0.17%和 0.33%（n=6），供试品溶液中磺胺甲口恶唑与甲氧苄啶的 RSD 分别为 0.26%和 0.41%（n=6）3.4 重复性试验 精密称取同一批号（20040529）的样品 6 份，按“ 3.6”项下的方法对样品测定，结果磺胺甲口恶唑与甲氧苄啶的含量平均值分别为 95.4%和 96.4%，RSD 分别为 0.17%和 0.41%（n=6）3.5 加样回收试验 精密称取磺胺甲口恶唑对照品 150mg 和甲氧苄啶对照品 30mg 置 25ml 量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀。
分别量取对照品溶液和辅料溶液（按处方量精密称取混合辅料 17.25mg，置 50ml 量瓶中，加甲醇适量，超过 10min 使溶解，加甲醇稀释至刻度摇匀，滤过，弃去初滤液，取续滤液，即得）1、1.5、2、2.5ml 分别置 50ml 量瓶中，加流动相置刻度，摇匀（每个浓度取 3 份），分别进样 10μl另取上述对照品溶液 2.5ml，置 50ml量瓶中，加流动相置刻度，摇匀作为对照品溶液，同法测定按外标法以峰面积计算，即得测定结果：磺胺甲口恶唑平均回收率为100.1%,RSD=0.58（n=12），甲氧苄啶平均回收率为100.5%，RSD=0.34%（n=12）3.6 样品含量测定 取 3 批样品，分别精密称取适量（约相当于磺胺甲口恶唑 150mg），置 50ml 量瓶中，加甲醇 40ml，超声 10min 使溶解，加甲醇稀释至刻度，摇匀滤过，精密量取 10μl，注入液相色谱仪，记录色谱图；另精密称取磺胺甲口恶唑对照品 150mg 与甲氧苄啶对照品 30mg 置同一 50ml 量瓶中，加甲醇 40ml，同法操作与测定按外标法以峰面积计算，即得3 批样品用本方法和药典法测定结果比较见表 1。
表 1 样品含量测定结果4 讨论本实验提出的方法简便、灵敏、准确、线性关系良好，回收率磺胺甲口恶唑为 100.1%，RSD=0.58%；甲氧苄啶为 100.5% ，RSD=0.34%本方法测得的结果与原方法基本一致，但更加高效快捷。