紫外分光光度法测定板蓝根滴眼液的含量 【临床医学论文】

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1、临床医学论文-紫外分光光度法测定板蓝根滴眼液的含量 作者：刘霄 王淑君 孙力若 陶晶【关键词】 紫外分光【摘要】 目的 测定板蓝根滴眼液的含量。方法 紫外分光光度法，检测波长290nm。结果 靛玉红吸收度与浓度呈良好的线性关系。r=0.9994，回收率为100.1%，管 RSD0.832。结论 本法简便，准确。 关键词 靛玉红 板蓝根滴眼液 紫外分光光度法【Abstract】 Objective To determine the content of Banlangen Diyanye. Methods The Dingyuhong were determined by spectrophot

2、ometry atwavelenth 290nm. Results The average recovery rate of was 100.1%（RSD0.83，r=0.9994）. Conclusion The method was simple and accurate.Key words UV Banlangen Diyanye UV板蓝根作为清热解毒药在临床上应用频率甚高，其中以板蓝根冲剂、板蓝根注射剂为我们所熟知。多用于呼吸道感染、流行性腮腺炎、流行性乙型脑炎、流行性感冒、传染性肝炎、红眼病等。本文以板蓝根为原药材，利用其抗菌、抗病毒以及清热解毒之功效，与有润滑作用的“人工泪液”相

3、结合，研制了用于眼部消炎、防止眼部干涩的板蓝根滴眼液。通过板蓝根的化学成分及药理活性研究表明，靛玉红是其有效成分之一，具有广谱抗菌作用以及抗病毒、抗内毒素作用，同时，靛玉红还能够抗癌，增强机体的免疫力。为保证临床使用的板蓝根制剂的质量，通常选用靛玉红、靛蓝作为板蓝根的质量控制标准。我们选择靛玉红作为标准品，测定板蓝根的含量。1 仪器与药品紫外分光光度计（贝克曼公司），靛玉红（中国药品生物制品检定所），板蓝根滴眼液（自制），其它试剂均为分析纯。2 方法及结果2.1 检测波长的选择 通过对靛玉红标准品的紫外扫描，从图 1 可见靛玉红在290nm 处有显着吸收峰，板蓝根提取物在 290nm 附近有吸

4、收。因此选定 290nm为检测波长。图 1 靛玉红的紫外扫描图谱（略）2.2 标准曲线的建立 精确称取靛玉红标准品 10mg，置 100ml 容量瓶中加氯仿溶解，稀释至刻度，精密吸取 0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6ml 分别至 10ml容量瓶中，加氯仿稀释至刻度。用紫外分光光度计，以氯仿为空白波长测定吸光度。经回归处理得线性回归方程为:A=1.1603x-0.0008，（n=6），r=0.9994。可见该方法在 1.036.18g/ml 范围内有良好的线性关系。2.3 精密度 配制不同浓度靛玉红标准液，以氯仿为空白，同标准曲线项下操作，测定结果并计算密度。于 1 日内连续测定

5、5 次不同浓度样品，并计算日内相对标准偏差，结果见表 1。以上样品连续测定 5 天并计算日间相对标准偏差，试验结果见表 1。使用该方法，日内、日间精密度良好。表 1 靛玉红的日内、日间精密度（略）2.4 回收率的考察 精密量取样品适量，加入靛玉红标准液，以氯仿为空白，同标准曲线项下操作，测定结果并计算回收率。结果见表 2。表 2 靛玉红的回收率（略）从以上回收率，日内、日间精密度的测定结果可以看出，采用本法系统稳定、灵敏度高、专属性强、重现性和准确性均良好，且操作简便，因此适合用于板蓝根滴眼液中靛玉红的含量测定。2.5 样品的测定2.5.1 萃取时间的选择 同一批样品精密量取 2.5ml 至分

6、液漏斗，加入 5ml 氯仿，振摇并计时。当振摇 10min 时，取出氯仿层溶液适量，以氯仿为空白，于290nm 处测定吸光度;倒回分液漏斗继续振摇，并分别在 20min、30min 重复操作。结果见表 3。表 3 振摇时间对萃取的影响（略）结果表明，延长振摇时间并未使萃取量有显着的增加。因此，每次萃取时，振摇 10min 即可。2.5.2 萃取量选择 同一批样品精密量取 2.5ml 至分液漏斗，加入 5ml 氯仿，振摇 10min 后，将氯仿层全部分离出来，以氯仿为空白，在 290nm 处测定吸光度。重复上述操作 5 次，累计加入 25ml 氯仿。结果见表 4。表 4 不同提取次数对测定的影响

7、（略） 将所测 A 值带入标准曲线方程，所得浓度即为第 n 次萃取后，萃取液氯仿中的相当于靛玉红的浓度。将浓度累计，即得 n 次萃取后，氯仿中相当于靛玉红的浓度，也就是样品相当于靛玉红的浓度。计算结果见表 5。表 5 不同提取容积对测定的影响（略）从试验结果和计算结果表明，第四、五次萃取后浓度已无明显变化，因此，萃取 2.5ml 样品，用 20ml 氯仿即可。2.5.3 萃取次数的选择 精密量取 2.5ml 样品 3 份，分别 20ml 氯仿以不同次数对其进行萃取:第一组 20ml 萃取 1 次;第二组先后以 10ml 萃取 2 次;第三组先以 5ml、5ml，10ml 萃取 3 次;第四组分

8、别以 5ml 萃取 4 次。分别测定吸光度并计算浓度，操作步骤与计算方法同上。结果见表 6。表 6 不同萃取次数对测定的影响（略）由于萃取 3 次与萃取 4 次浓度变化不大，且 4 次萃取时的 4 次溶液开始乳化，因此，只需将 20ml 氯仿分 3 次萃取即可。2.5.4 重现性实验 同一组样品测定 5 次，操作同上。结果见表 7。 表 7 重现性实验结果（略）从结果可知，该萃取方法重现性较好，操作简便易行。2.5.5 含量测定 方法:精密吸取板蓝根滴眼液 2.5ml 于分液漏斗中，再精密吸取 5ml 氯仿加入其中，振摇 10min，分离氯仿层，以氯仿为空白，再 290nm 处测定吸光度;再依次精密吸取 5ml、10ml 氯仿萃取 2 次，操作同上。将吸光度值带入标准曲线方程进行计算，方法同上。 测定五批样品，计算结果见表 8。表 8 不同批号的含量测定结果（略）该含量测定方法重现性较好，且操作简单易行;通过对五批样品的测定，可确定该板蓝根滴眼液的含量相当于靛玉红浓度的 0.7200.750g/ml。3 讨论本文通过对板蓝根提取液的紫外扫描，确认了板蓝根的有效成分为靛玉红，并建立了以靛玉红为质量标准的紫外分光光度法作为板蓝根滴眼液的含量测定方法。通过回收率试验以及日内差、日间差试验，证明该方法灵敏度高，专属性强，重现性好，且简便易行。