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1、图 5：（A）在 COVASP-LB 实验氟化钙基板上和在 IRRAS 实验中，表面压力对DPPC 中 CH2 的不对称振动频率的依赖性；（B）在 COVASP-LB 实验氟化钙基板上和在 IRRAS 实验中，表面压力对 DPPC中 CH2 的对称振动频率的依赖性， （C ）在 COVASP-LB 实验氟化钙基板上和在IRRAS 实验中的水表面上，表面压力对半宽度 DPPC 中 CH2 对称伸缩的依赖性（C）畴结构的 DPPC COVASP 薄膜的荧光显微：域形成的研究萤光配合上述的红外测量，通过对单分子层之间的凝聚和扩大地区差别的探针分布的直接观察，包含有一丝荧光标记的脂质列入允许的压缩对膜
2、的横向结构的影响评价，我们以前曾表明，转移到玻璃或云母片上不会改变薄膜的微观结构和对界面 DPPC 如萤光或原子力显微镜研究。图 6：（A）DPPC 单分子层的压缩 - A 等温线，未扰动的（实线） ，转移到玻璃片时获得的（虚线） （B）含 1（摩尔）NBD-PC 的 DPPC 薄膜纤维图像，左边是恒压下转移到玻璃支架上的；右边是压缩到目标压力中央指示的规模时，在同一条件下转移到玻璃片上的。右边的图像由同一条件下单组含有 NBD-PC 的 DPPC 的图像组成。所有实验都在以下条件下进行，5mm Tris，PH=7,和 150mmNaCl。图 6a 比较了 24下分别由非干扰界面和同时提取但放
3、到 LB 玻璃片上的含1%（摩尔）NBD-PC 的 DPPC 的 - A 等温线，在图 6a 中的两个等温线都非常相似，包括在 75-78 2/molecule 间的起始压力以及在 12 mN/m 条件下一个由液体扩大到液体浓缩的显著的过渡平衡。由于与COVASP 移送红外测量，以氟化钙的膜，它是安全的玻璃上得出结论，该膜萃取片并没有显著改变等温线的主要特点，连续压缩驱动重组的脂质分子在压缩过程中与该界面保持一致。图 6b 介绍的是含有1%NBD-PC 的 DPPC 膜转移到玻璃片上的显微图像。这些数据比较了两个支持的 DPPC 类型膜的微观结构。左边的帧对应于从压缩和传输过程中保持恒定的压力
4、定义的表面薄膜转移制备的薄膜显微图像。因此，这些图片的每一个，是从一个不同的 DPPCfilm，压缩到指定的压力，然后转移到一个玻璃支撑，形成十分均匀结构的 LB 膜作为在显微镜下观察到的。这是用于在literature25 准备支持脂质膜的传统的方式。另一方面，在图 6b 中右侧所示的图像已组成，由重叠的转移后，这是与收购的压缩等温线同时准备了singlesupported 膜拍摄的照片。图 7：在恒定压力下或不断改变的压力下的 LB 膜，或直接观察现实中水气界面膜计算出的 DPPC 膜的冷凝曲线。阴影区占总面积的平均百分比是表面压力的的表现。在 25下，含有 1（摩尔）nbd PC 的薄膜
5、总是不断的形成并压缩，数据点代表平均在每个压力后获五帧的均值和标准差。因此，转移到垫片上的膜各个部分的表面压力沿着转移路线是不断变化的。这个在显微镜下的观察揭示了 LB 膜沿轴转移不同，是逐渐改变着形态的。图 6B 型面压力刻度表示相应的由不同的膜（右帧）或在其提取时间的膜片段（图片左）的表面压力。因此，在压缩过程中提取的膜，可以用电脑获得的传输过程中位置和表面压力的数据来校准，以确定每个膜片段表面压力的转移。膜在压缩过程中的结构转移，说明沿转移轴取样等温线眼线发生 DPPC 单膜和脂质的核浓缩领域的增长，压缩。与此相反，图像采样垂直方向的转移生产线生产的电影画面的速度相同压力，因此可以被平均
6、或比较，分析在任何定性或定量的形式给出表面压力的膜结构。而常规 LB 技术要求编制和许多不同的膜转移到分析在几个定义的压力给定的界面系统结构，本（COVASP）- LB 膜允许在一个单一的完整的等温线的结构特征观察实验中，随着采样任何沿等温线所需的部分给予表面压力的可能性。图 7 比较完整的压缩驱动的冷凝计算恒压 LB 或从任一曲线 COVASP-LBDPPC/NBD-PC 膜，请注意，从COVASP- LB 膜凝结曲线可以很容易地准备以多点取样，与刚才在许多不同位置沿传输线的同一膜所需的，正如从图像质量上推断，这个膜是 10-20的浓缩时，同时转让时相比，分析了不同的独立不变的压力。此外，观
7、察在COVASP- LB 膜高密度点方便的 LC- LE 的过渡近 10 mN/m。根据从COVASP- LB 膜凝结获得的数据点也包括横向误差线，这表明在表面压力分配错误帧到任何特定的凝结。由于压力不断变沿传输线中的每一个定量分析框架包括凝结在一个范围内的压力，这同样是沿等温线范围内的信息。有趣的是，凝结曲线从 COVASP-LBfilms 获得合理与从记录到在气液界面的单分子层，直接压缩图像计算一（参见图 7 黑点） 。这些结果证实，凝结程度更为敏感的时期存在的平衡比前转让的转让过程本身，而且有效地捕捉 COVASPLB 过程定性和定量的压力相关的功能在发生界面膜的支持。（D）初步生物应用
8、的 COVASP 磅红外：单层到多层跃迁 Four-Component Lung Surfactant 模型。肺表面活性物质，脂类，蛋白质复合体在空气位于/哺乳动物的肺泡里，在体内的功能，以防止在呼气表面张力降低到接近零值肺泡塌陷。在以前的研究中，压缩后 5,6,8,19,26,27 超分子结构变化进行观察，模仿电影中的肺泡衬里层。阿四分量模型 DPPC/ DPPG，胆固醇表面活性剂膜，肺表面活性蛋白SP 的具体- C 的（DPPC/DPPG 摩尔比4:1，胆固醇，7 mol时，SP 的- C中，用 4 mol）表现出生物有关从膜表面的可逆转换到相关的高度压缩后，在多层膜表面的压力。在我们以前
9、的研究中，19 对 LB 膜原子力显微镜测量验证了多层膜的形成，而IRRAS 是用来评价的结构和 SP 的- C的方向。一种是在一 COVASP 磅实验系统等温线显示在图 8 插页，并揭示在低压力的普遍扩大了膜一个近 54Mn/m 的水平地区开始，形成了多层发病的指标。事先对process19 可逆性的研究表明，在影片中排除有毒物质进入单层 respreads 扩大后薄膜。COVASP 磅红外范围超过 23-56 分钟/米几面压力谱如图 8 所示。优异的光谱质量许可证于 16 时 55 cm - 1 处，除了磷脂酰胺 I 带的模式（图 8 为标记）检测先前提到。几个负责调查的多层膜的形成有关的
10、光谱参数是在绘制图 9 和 10。在图 9A，压力诱导的甲基对称伸缩强度的变化显示了一个清晰的 54mN/m 发病压力/在与水平线附近，在等温线（图 8，外型出色的插图协议大幅增加， ） 。类似的行为是表现出了亚甲基的不对称伸缩振动和lipidCdOstretch（未显示） 。此外，对称CH2 的伸缩频率展品（图 9b）之间的 54和 56mN/m（0.1 厘米- 1） ，但significantdecrease 米该带的强度增加（图 9A）与作为被审问的红外线光束形成多层脂质分子的数目一致的是在多层的存在而增加。在 highpressure 地区（图 9b）下降的频率是一致的构象略有增加多层膜中的顺序。
