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1、4、免疫组化染色步骤：4.1 石蜡切片脱蜡至水。4.2 3%H2O2室温孵育510分钟，以消除内源性过氧化物酶的活性。4.3 蒸馏水冲洗，PBS浸泡5分钟，(如需采用抗原修复，可在此步后进行)。然后石蜡切片微波炉抗原修复：将切片放入盛有0.01M枸橼酸盐缓冲液的容器中，置微波炉内加热高火，5min，使液体沸腾。使容器内液体温度保持在9298之间并持续1015分钟（注意：无论是使用医用或家用微波炉，请根据具体机型酌情设置条件，务必满足以上步骤中对温度和时间的要求）。取出容器，室温冷却1020分钟（注意：不可将切片从缓冲液中取出冷却，以便使蛋白能够恢复原有的空间构型）。重复1-2次。PBS洗，下接
2、免疫组化染色步骤4.4 510正常山羊血清（PBS稀释）封闭，室温孵育10分钟。倾去血清，勿洗，滴加适当比例稀释的一抗或一抗工作液，37孵育12小时或4过夜。4.5 PBS冲洗，5分钟3次。4.6 滴加适当比例稀释的生物素标记二抗（1%BSA-PBS稀释），37孵育1030分钟；或滴加第二代生物素标记二抗工作液，37或室温孵育1030分钟。4.7 PBS冲洗，5分钟3次。4.8 滴加适当比例稀释的辣根酶标记链霉卵白素（PBS稀释），37孵育1030分钟；或第二代辣根酶标记链霉卵白素工作液，37或室温孵育1030分钟。4.9 PBS冲洗，5分钟3次。4.10 显色剂显色（DAB或AEC），5-10分钟显色。4.11 自来水充分冲洗，轻度复染，中性树胶封片。
