《原发性肝细胞癌HBsAg、Fas和PCNA抗原的表达及其意义【医学论文】》由会员分享，可在线阅读，更多相关《原发性肝细胞癌HBsAg、Fas和PCNA抗原的表达及其意义【医学论文】（8页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、医学论文-原发性肝细胞癌 HBsAg、Fas 和 PCNA 抗原的表达及其意义作者：姜润德 宗宁 李占元 王占民 【摘要】目的：通过检测原发性肝细胞癌（HCC）及其癌周肝组织 HBsAg、Fas抗原和增殖细胞核抗原（PCNA）的表达，探讨其表达的规律和意义以及 HBV 感染与 HCC 的相关关系，HCC 发生的机制。方法：对 52 例肝癌标本及 42 例癌周肝组织应用免疫组织化学方法检测 HBsAg、Fas 和 PCNA 的表达，并结合血清甲胎蛋白（AFP）水平进行分析。结果：癌周肝组织高度表达 HBsAg 和 Fas，阳性率均达 78.6%，癌组织表达阳性率分别为 21.2%和 30.8%，
2、阳性表达仅限于分化良好者，差异有统计学意义（P 均0.005）。癌组织和癌周组织 HBsAg 和 Fas的表达具有相关性。癌组织的 PCNA 标记指数（54.825.9），显着高于癌周组织（11.69.7)（P0.001），其中 HBsAg 阳性者标记指数又低于 HBsAg 阴性者（41.428.5 vs 58.424.2，P0.05)。在癌周组织 PCNA 阳性细胞常常位于肝小叶周边部，体积较小，核圆形或卵圆形。结论：由于高分化癌具有低水平表达 HBsAg 的能力，推测 HBsAg 在癌组织中的表达消失或低表达应归因于癌细胞的低分化状态。癌周组织持续发生肝细胞的凋亡，但在癌组织尤其是低分化癌
3、组织中则减弱或消失，可能归因于癌细胞不能表达病毒抗原。卵圆形细胞的异常增殖可能是肝癌发生的前提条件。【关键词】癌，肝细胞肝炎表面抗原，乙型抗原，CD95 增殖细胞核抗原Expression of HBsAg,Fas and PCNA in hepatocellular carcinoma and their significance in understanding HBV related hepatocarcinogenesis【ABSTRACT】Objective:To investigate the expressive characters and their significance
4、 by detecting the expressions of HBsAg,Fas and proliferating cell nuclear antigen(PCNA) in both hepatocellular carcinoma(HCC) and their surrounding noncancerous tissues.The correlation between HBV infection and HCC,and the possible mechanism of hepatocellular carcinogenesis were discussed.Methods:HB
5、sAg,Fas and PCNA were detected by immunohistochemistry from 52 cases of hepatocellular carcinoma as well as 42 corresponding noncancerous tissues.Clinical data suchas serum AFP levels was also analysed.Results:Both HBsAg and Fas were strongly expressed in noncancerous tissues,with positive rate of e
6、ach achieving 78.6%.However their expression rates in cancer tissues were 21.2% and 30.8% respectively,significantly lower and less intensive than that of their corresponding noncancerous ones(P0.005).The expression in cancer tissues are only found in the well differentiated types.Close correlations
7、 were found for HBsAg and Fas expressions in both cancer and noncancerous tissues.The average PCNA labeling index(PCNA LI)of HCC was 54.825.9,significantly higher than that of noncancerous tissues,which is only 11.69.7(P0.001).Whereas among HCC patients,the average PCNA LI of HBsAg positive ones was
8、 significantly lower than that of HBsAg negative ones(41.428.5 vs 58.424.2 P0.05).In noncancerous tissues most PCNA positive cells are nucleus ovalshaped small cells which are mostly found in the perilobule areas.Conclusion:As well differentiated HCC cells possess the ability to express HBsAg,the mu
9、ch less expression of HBsAg in cancer tissues was postulated to be the result of undifferentiation of cancer cells.The close relationship between HBsAg and Fas expression indicates that persistent apoptosis still occur in the noncancerous tissues and this process is not ready to happen in the HCC ti
10、ssues possibly due to the disability of cancer cells to express virus related antigens.The proliferation of oval cells in chronic hepatitis tissues might be a prerequisite for the generation of hepatocellular carcinoma.【KEY WORDS】Carcinoma,hepatocellular Hepatitis B surface antigens Antigens,CD95 Pr
11、oliferating cell nuclear antigen 采用免疫组织化学技术研究肝细胞癌及其对应的癌周组织 HBsAg 和 Fas 抗原的表达情况，结合增殖细胞核抗原（PCNA）标记指数和血清 AFP 水平，探讨 HBV 感染在肝细胞癌的发生中的意义。 1 材料与方法1.1 材料1.1.1 一般资料 山东大学齐鲁医院肝细胞性肝癌手术标本存档蜡块 52例，其中 42 例附有癌周肝硬化组织。男 49 例，女 3 例，年龄 2672 岁，平均51 岁。血清 HBsAg 阳性 46 例，占 88%。根据 Edmondson 标准分级：级 6 例，级 25 例，级 18 例，级 3 例。每例病
12、人术前血清 AFP 水平，以20ng/ml做为阳性标准，阳性率为 71.2%（37/52），平均 AFP 水平 131.8ng/ml。1.2.1 试剂 小鼠抗 HBsAg 单克隆抗体、小鼠抗人 PCNA 单克隆抗体（PC10）、生物素化二抗（山羊抗小鼠/兔）及 SABC 试剂盒购自武汉博士德生物工程公司；兔抗人 Fas IgG 多克隆抗体（N18）购自北京中山生物技术公司。操作按说明书进行。1.2 方法 免疫组化采用博士德生物工程公司推荐的 SABC 法（StreptABiotin Complex）。阳性对照用已知 HBsAg、Fas 表达阳性的慢性肝炎肝硬化切片和 PCNA 表达阳性的乳腺导
13、管癌切片，阴性对照用正常鼠/兔血清代替一抗，空白对照用 PBS 代替一抗。结果判断：（1）HBsAg：胞浆内出现棕黄色染色为阳性，按文献1方法对细胞内染色评分：a（阳性着色程度）：无着色为 0，浅着色为 1，深着色为2；b（阳性着色范围）：无着色为 0，着色少于 1/3 为 1，着色大于 1/3 为 2，弥漫着色为 3。将 a、b 两项相加，3 为阴性，3 为阳性。（2）Fas：胞浆及胞膜出现弥漫性棕黄色染色为阳性，阳性细胞在小叶内呈簇状分布，多见于小叶周边部2。无染色或仅偶有散在细胞染色为阴性。（3）PCNA：以细胞核染为棕黄色为阳性。按文献3每张切片随机选取 10 个不同的高倍镜视野，每个
14、视野计数 100 个癌/肝细胞中阳性细胞数，取其均值，即平均每 100 个细胞中阳性染色细胞数，做为标记指数（PCNA labeling index,PCNA LI）。 1.3 统计学处理 数值变量资料用均数的 t 检验，分类变量资料用 2 检验。2 结 果2.1 癌及癌周肝组织 HBsAg 的表达特点与结果 癌周肝组织 HBsAg 的表达以胞浆弥漫型为主，也可见包涵体型表达，阳性细胞呈部分小叶或小叶内部分细胞集中表达的倾向。癌细胞大多为 HBsAg 阴性，阳性仅表现为弱至中度的胞浆弥漫型染色。在包含癌与癌周组织的同一张切片内，癌灶内 HBsAg 阴性染色与癌周组织之阳性染色形成鲜的对照（图
15、1，2）。52 例肝细胞癌中，HBsAg 阳性 11 例，阳性率 21.2%，均表现为弱至中度染色；42 例癌周肝组织 HBsAg 阳性33 例，均呈中至强阳性表达，阳性率 78.6%，两者差异有统计学意义（表 1）。11 例表达 HBsAg 的癌组织，分化级者 5 例，级者 6 例，低分化型癌组织（+）均无表达，分化型（+级）和低分化型癌组织 HBsAg 表达的阳性率差异也有统计学意义（表 2）。 图 2 肝癌组织 HBsAg 阴性，右下角为HBsAg 阳性表达的癌周肝组织（SABC，200）表 1 肝癌及癌周肝组织 HBsAg的表达表 2 分化型与低分化型癌组织 HBsAg 的表达2.2
16、癌及癌周肝组织 Fas 抗原的表达特点与结果 癌周与癌组织 Fas 抗原的阳性染色在假小叶或癌巢内呈簇状分布，多见于假小叶或癌巢周边部，尤其是碎屑样坏死区。癌组织 Fas 抗原表达的强度及频度明显低于癌周肝组织（图3，4）。52 例肝癌标本中，Fas 抗原表达 16 例，阳性率 30.8%，42 例癌周组织阳性表达 33 例，阳性率 78.6%，两者差异有统计学意义（表 3）。16 例表达Fas 的癌组织，分化型 15 例，低分化型 1 例，分化型与低分化型癌组织 Fas 抗原表达的阳性率差异也有统计学意义（表 4），提示 Fas 抗原的表达随癌组织恶性程度的增高而降低，与 HBsAg 的表达情况类似。图 4 肝癌组织 Fas 阴性（SABC，200）表 3 肝癌及癌周肝组织 Fas 抗原的表达表 4 分化型与低分化型肝癌组织 Fas 的表达 Fas 抗原与 HBsAg 在癌及癌周肝组织
