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1、食品中合成着色剂的测定 色素提取,2012.4.18,课程目的： 掌握食品中合成着色剂的测定原理； 了解高效液相色谱的工作原理及操作方法。,着色剂：通过使食品着色后改善其感官性状，增进食欲的一类物质。 天然着色剂：辣椒红、甜菜红、红曲米、胭脂虫红、高粱红、叶绿素铜钠、姜黄、栀子黄、胡萝卜素、藻蓝素、可可色素、焦糖色素等等。 合成色素：用人工合成的方法从煤焦油中制取，或以苯、甲苯、萘等芳香烃化合物为原料合成的有机色素。包括苋菜红、柠檬黄、亮蓝、日落黄、诱惑红、赤鲜红等等。,合成着色剂的潜在危害致泻性、致癌性 国际：JECFA制定各种合成着色剂的ADI 我国：食品安全国家标准、食品添加剂使用标准（
2、GB2760-2011） 现状：超量使用，使用工业色素、染料色素,方便、快速、准确地检测食品中合成着色 剂，是对其进行有效管理的必要手段。 测定手段（GB/T 5009.35-2003）： 高效液相色谱法 薄层色谱法 示波极谱法 其他：纸上层析、分光光度法,苋菜红、亮蓝、柠檬黄、日落黄,合成着色剂在饮料中的最大使用量 （GB2760-2011）,一、实验原理,1.聚酰胺吸附法提取合成着色剂 聚酰胺（尼龙）通过氢键吸附着色剂，天然着色剂（影响测定）在酸性条件下被洗脱去除，合成着色剂在碱性条件下被洗脱收集，浓缩后上机测定。 吸附洗涤解吸附浓缩上机,理化测定一般步骤：除杂质、收集目标物、调整浓度、上
3、机,2. 高效液相色谱法 高效液相色谱法（HPLC）：是色谱法的一个重要分支，以液体为流动相，采用高压输液系统，将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，在柱内各成分被分离后，进入检测器进行检测，从而实现对试样的分析。 检测器：二极管阵列检测器,3.结果分析 保留时间（定性）：根据样品中各物质被洗脱至检测器的时间差异来进行定性分析； 峰面积（定量）：根据样品峰面积与标准品峰面积的比较来进行定量分析。,二、试剂与器材,二、试剂与器材,器材： 烧杯、玻棒、吸管、移液管、G3漏斗、抽滤瓶*2、针筒、温度计、5mL玻璃离心管 电子天平、水浴锅,三、实验步骤,取
4、样、脱气 称取饮料20g，倒入50mL烧杯，碳酸饮料用电炉加热除去 二氧化碳。（已脱气）。 2. 色素吸附 称取聚酰胺3g，用少许PH4的水（70）调成糊状，加入待 测样品，搅拌5min。,3. 除杂质 组装好G3漏斗，将样品倒入漏斗，抽滤； PH4的水（70）洗涤3次，每次20mL（洗涤沉淀物）； 甲醇-甲酸洗涤3次，每次20mL（洗涤天然色素）； 400mL PH4的水洗涤。 4. 解吸附 更换抽滤瓶。用乙醇-氨水-水溶液洗涤三次（5mL、10mL、5mL），收集解吸液。 5. 样品浓缩 解吸液倒入蒸发皿中，80水浴蒸发至约2mL，以乙酸（一小滴）调节PH至6。收集样品至玻璃离心管，加水定容至5mL。,70 PH4水，糊状,加热脱气,更换抽滤瓶,目标物,6. 上机测定 3000rpm离心5min，取上层10L进高效液相色谱。 7. 结果分析 （1）保留时间 （2）含量计算,X试样中着色剂含量（g/kg） A样液中着色剂含量（g） V2进样体积（mL） V1试样稀释总机体（mL） m试样质量（g） 结果保留两位有效数字,
