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1、http:/酸 性 磷 酸 酶 染 色 液 使 用 说 明产 品 简 介 ：酸 性 磷 酸 酶 （ Acid phosphatase， ACP） 分 布 极 广 泛 ， 遍 布 各 种 组 织 ， 主 要 存 在 于 细 胞的 溶 酶 体 内 ， 所 以 常 作 为 溶 酶 体 标 志 酶 。 溶 酶 体 外 的 酸 性 磷 酸 酶 存 在 于 内 质 网 和 胞 质 内 。 各种 动 物 中 的 酸 性 磷 酸 酶 各 有 不 同 ， 酸 性 磷 酸 酶 的 适 宜 pH 为 4.5-5.5。酸 性 磷 酸 酶 染 色 液 以 -甘 油 磷 酸 钠 为 底 物 ， 在 酸 性 pH下 被 酸
2、 性 磷 酸 酶 水 解 释 放 出 磷 酸盐 ， 遇 到 铅 离 子 则 生 成 磷 酸 铅 沉 淀 ， 再 被 S2+置 换 ， 最 终 生 成 硫 化 铅 棕 黑 色 沉 淀 。 酸 性 磷 酸酶 的 一 般 抑 制 剂 为 氟 化 物 、 磷 酸 根 离 子 。 对 某 些 酸 性 磷 酸 酶 来 讲 ， Cu2+、 酒 石 酸 根 离 子 和 四氯 化 碳 以 及 醛 类 也 都 是 抑 制 剂 ， Mn2+为 该 酶 的 激 活 剂 。 冰 冻 切 片 和 石 蜡 切 片 均 可 ， 但 多 用 冰冻 切 片 。 临 床 上 ， 改 染 色 法 对 前 列 腺 癌 和 其 他 脏
3、器 的 转 移 性 前 列 腺 癌 呈 强 阳 性 反 应 ， 霍 奇 金淋 巴 瘤 、 胃 癌 、 肺 癌 、 乳 腺 癌 、 舌 表 皮 性 癌 、 多 核 巨 细 胞 瘤 的 瘤 细 胞 质 也 呈 强 阳 性 反 应 ， Ewing肉 瘤 、 成 骨 肉 瘤 等 呈 阴 性 反 应 。产 品 组 成 ：规 格名 称 G1 4 9 02 5 0 ml Storage试 剂 (A): ACP 孵 育 液 5 0 ml 4 避 光试 剂 (B): ACP 硫 化 液 2 1 ml RT 避 光试 剂 (C): ACP 对 照 液 1 0 ml 4 避 光使 用 说 明 书 1 份自 备 材
4、料 ：蒸 馏 水 、 恒 温 箱 、 封 片 剂操 作 步 骤 （ 仅 供 参 考 ） ：（ 一 ） 冰 冻 切 片 染 色http:/1、 冰 冻 切 片 至 蒸 馏 水 。2、 切 片 入 ACP 孵 育 液 ， 置 于 37 温 箱 ， 浸 染 15-60min。3、 入 37 蒸 馏 水 中 洗 2次 ， 每 次 1min， 以 去 除 未 被 吸 附 的 铅 。4、 在 上 述 过 程 中 配 制 ALP 硫 化 工 作 液 ， 即 取 试 剂 （ B） 用 蒸 馏 水 稀 释 50 倍 ， 即 为 ALP硫 化 工 作 液 ， 即 配 即 用 。 切 片 入 硫 化 工 作 液 ，
5、 孵 育 1-2min。5、 流 水 冲 洗 3-5min， 蒸 馏 水 洗 。6、 （ 可 选 ） 核 固 红 复 染 细 胞 核 ， 蒸 馏 水 洗 。7、 甘 油 明 胶 封 片 。（ 二 ） 石 蜡 切 片 染 色1、 石 蜡 切 片 脱 蜡 至 蒸 馏 水 。2、 切 片 入 ACP 孵 育 液 ， 置 于 37 温 箱 ， 浸 染 4-12h， 可 以 延 长 至 24h。3、 入 37 蒸 馏 水 中 洗 2次 ， 每 次 1min， 以 去 除 未 被 吸 附 的 铅 。4、 在 上 述 过 程 中 配 制 ALP 硫 化 工 作 液 ， 即 取 试 剂 （ B） 用 蒸 馏
6、水 稀 释 50 倍 ， 即 为 ALP硫 化 工 作 液 ， 即 配 即 用 。 切 片 入 硫 化 工 作 液 ， 孵 育 1-2min。5、 流 水 冲 洗 3-5min， 蒸 馏 水 洗 。6、 （ 可 选 ） 核 固 红 复 染 细 胞 核 ， 蒸 馏 水 洗 。7、 甘 油 明 胶 封 片 。染 色 结 果 ：酶 活 性 部 位 黑 素 硫 化 铅 沉 淀细 胞 核 根 据 复 染 液 不 同 而 不 同阴 性 对 照 ： （ 可 选 ）http:/将 切 片 置 于 试 剂 （ C） -ACP 对 照 液 中 ， 室 温 1-2h孵 育 ， 其 余 步 骤 相 同 ， 结 果 为
7、 阴 性 。注 意 事 项 ：1、 ACP孵 育 液 、 ACP硫 化 液 易 失 效 ， 最 好 分 成 小 分 储 存 。 ACP硫 化 液 具 有 腐 蚀 性 。2、 对 冰 冻 切 片 染 色 时 ， 应 减 少 切 片 在 室 温 暴 露 的 时 间 。3、 样 本 需 新 鲜 ， 取 材 后 应 立 即 处 理 ， 否 则 会 影 响 酶 的 活 性 。4、 组 织 固 定 需 在 4 冰 箱 进 行 ， 时 间 不 宜 超 过 24h， 否 则 酶 活 性 会 减 弱 或 消 失 。5、 组 织 在 石 蜡 包 埋 是 ， 温 度 不 宜 高 于 56 。 应 使 用 熔 点 为 52-54 的 石 蜡 进 行 浸 蜡 ，浸 蜡 时 间 要 短 ， 否 则 酶 活 性 会 减 弱 或 消 失 。6、 不 纯 的 二 甲 苯 会 分 解 黑 色 沉 淀 ， 宜 选 用 AR 级 以 上 的 二 甲 苯 。7、 为 了 您 的 安 全 和 健 康 ， 请 穿 实 验 服 并 戴 一 次 性 手 套 操 作 。有 效 期 ： 6 个 月
