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1、实验五猪瘟的间接免疫荧光实验龙峡学院生命科学学院2015.5.25一、实验目的:*了解和掌握猪癌的临床诊断方法和实验室诊断方法(间接免疫荣光法。荧光免疫显微技术*直接法-荣光素标记Ab直接检测*间接法-一荧光素标记二抗*补体结合法-荧光素标记抗补体Ab*双结合法-一两种英光素标记Ab二、实验原理:回定在载片上的待检病变组织与适当稀释的猪瘾阳性血清反应后,如果待检组织中有猪瘟病毒抗原就会与猪瘟阳性血清中的抗体特异素)标记的的兔抗猪IgG二抗又可与猪瘟阳国性结合,加入FITC(异硫氰酸荧光性抗体特异性结合,在荧光显微镜下可见呈现绿色荣光。荧光标训抗佛免疫荧光技术异硫氰酸荧光素(FITC)能够产生明
2、显荧光并能作为染料使用的有机化合物称为荧光色素或荧光染料。用于标记抗体的荧光色素,必须具有化学上的活性基因,能与蛋白质稳定结合,且不影响标记抗体的生物活性及抗原抗体的特异性结合。荣光二抗荧光素及其激发波长和发射波长荧光素发射的激发波长|发射波长荧光色(nmCnm)异硫氰酸荧光素|“绿495528FITC乙基罗丹明红570595RB200三、试剂与仪器:*1.猪瘟病料、抗原片、FITC荣光标记的兖抗猪二抗、PBS缓冲液、猪瘟标准阴、阳性血清、封片介质:磷酸盐缓冲甘油、盖玻片、滤纸*2.荧光显微镜、摇床、移液器、吸管等$克:将包被有不同基质的生物薄片固定在一个载片组织或病原体的抗体。反应区中,可同时检测多种抗不荧光显微镜:
