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1、植物组织培养,组织培养（tissue culture）,细胞全能性（totipotency）：植物体的每个细胞携带着一套完整的基因组，并具有发育成完整植株的潜在能力。 组织培养（tissue culture）：在无菌条件下，分离并在培养基中培养离体植物组织（器官或细胞）的技术。,促进芽的分化：CTK/IAA高时，形成芽；低时形成根。,+ auxin + cytokinin,Auxin,Cytokinin,Fig. 28-9,组培的应用,快速繁殖 脱除病毒 培育新品种 胚培养 单倍体培养 试管受精 体细胞无性系的变异和筛选 原生质体培养和细胞杂交 基因工程育种 植物种质资源的保存和交换 次生代谢
2、物质的生产,烟草的生长过程,（A、B、C、D为不同生长时期）,callus induction,callus co-culture,the first selection,rootage,redifferentiation,the second selection,水 稻 转 化,烟草的组织培养,培养基的配制 接种前准备 材料处理接种,MS+6-BA 1mg/L+NAA 0.5mg/L 每瓶50ml培养基 琼脂粉用电子天平称量,解剖刀、剪刀、鼻形镊 9寸培养皿（内附滤纸） 500ml 无菌水两瓶 废液缸、打火机、酒精灯 酒精棉球、70%乙醇、 0.1% 升汞,采回的烟草叶片流水冲洗干净，草纸擦
3、干，备用。无菌操作台上，裁剪成0.50.5cm叶片，放于70%乙醇中处理30秒，无菌水洗净，再放到0.1% 升汞溶液中5分钟，无菌水冲洗干净，吸干防于培养基上。,MS培养基配方（mg/L ）,培养基配制注意的问题,微量元素应该精确到0.0001克，大量元素可精确到0.01克。大量元素母液倍数略低，一般为1020倍，微量元素和有机成分一般为50100倍。 母液配制组合 Fe盐的配制方法 激素的配制和保存,配制流程,水（100ml）,大量元素 微量元素 有机物质 Fe盐,蔗糖激素 定容,调节pH到5.8,分装于盛有琼脂粉的锥形瓶中,高压灭菌,常用仪器设备,培养条件,实验要求,配制六瓶两种激素浓度的培养基 两瓶无菌水 培养皿（中间包有滤纸6张）4个 烧杯4个 检查各自的鼻形镊、解剖刀,外植体的选择,选择部位 取材季节的选择 器官发育年龄的选择 取材大小的影响,诱导的成功率： 脱分化和再分化的难易程度不同选取外植体,外植体消毒灭菌的要求,注：表面活性剂吐温的加入可以提高消毒剂的渗透力和杀菌效果。,
