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1、基因工程（一）DNA重组技术的基本工具基因工程的基本操作程序时间：45分钟满分：100分 一、选择题(每小题5分，共60分) 1下列关于基因工程的叙述，正确的是() A基因工程经常以抗生素抗性基因为目的基因 B细菌质粒是基因工程常用的运载体 C通常用一种限制性内切酶处理含目的基因的DNA，用另一种限制性内切酶处理运载体DNA D为育成抗除草剂的作物新品种，导入抗除草剂基因时只能以受精卵为受体 解析：本题考查了基因工程的操作工具。基因工程是按照人们的愿望，把一种生物的基因复制出来，加以修饰改造，然后导入另一种生物的细胞里定向地改造生物的遗传性状。在实际操作中一定用同一种限制性核酸内切酶来处理含目
2、的基因的DNA和运载体DNA，使它们产生相同的黏性末端；不仅仅只有受精卵可以作为受体细胞，其他的体细胞也可充当受体细胞；目的基因是符合人们需要的基因，基因工程经常以抗生素的抗性基因为标记基因。b5E2RGbCAP 答案：B 2在基因工程中用来修饰改造生物基因的工具是() A限制酶和DNA连接酶B限制酶和水解酶 C限制酶和运载体 DDNA连接酶和运载体 解析：基因工程中的操作工具有3种，即“分子手术刀”、“分子缝合针”、“分子运输车”。在基因工程操作过程中，利用限制性核酸内切酶将DNA分子切开获取目的基因，同时用同一种限制性核酸内切酶将运载体切开，获得和目的基因相同的黏性末端；再用DNA连接酶将
3、目的基因和运载体连接起来。综合所给选项可知，A项正确。p1EanqFDPw 答案：A 3下列有关基因工程中限制性核酸内切酶的描述，错误的是() A一种限制性内切酶只能识别一种特定的脱氧核苷酸序列 B限制性核酸内切酶的活性受温度的影响 C限制性核酸内切酶能识别和切割RNA D限制性内切酶可从原核生物中提取 解析：本题考查基因工程的操作工具限制性核酸内切酶的作用和来源。限制性核酸内切酶主要从原核生物中分离纯化，是能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且在特定的切点将磷酸二酯键断开；酶的活性是受温度、酸碱度等的影响。DXDiTa9E3d 答案： C 4.降钙素是一种多肽类激素，临床上用于治疗
4、骨质疏松症等。人的降钙素活性很低，半衰RTCrpUDGiT 期较短。某科学机构为了研发一种活性高、半衰期长的新型降钙素，从预期新型降钙素的功能出发，推测相应的脱氧核苷酸序列，并人工合成了两条72个碱基的DNA单链，两条链通过18个碱基对形成部分双链DNA片段，再利用Klenow酶补平，获得双链DNA，过程如下图：5PCzVD7HxA 获得的双链DNA经EcoR(识别序列和切割位点)和BamH(识别序列和切割位点)双酶切后插入大肠杆菌质粒中，下列有关分析错误的是()jLBHrnAILg AKlenow酶是一种DNA聚合酶 B合成的双链DNA有72个碱基对 CEcoR和BamH双酶切的目的是保证目
5、的基因和运载体的定向连接 D筛选重组质粒需要大肠杆菌质粒中含有标记基因 解析：合成的单链DNA有72个碱基，从题图看出两条单链并未左右两端对齐配对，只通过18个碱基对形成部分双链DNA片段，因此获得的双链DNA有碱基对727218126个碱基对。xHAQX74J0X 答案：B 5关于如下图DNA分子片段的说法正确的是() A限制性核酸内切酶可作用于部位，解旋酶作用于部位 B处的碱基缺失导致染色体结构的变异 C把此DNA放在含15N的培养液中复制两代，子代中含15N的DNA占3/4 D该DNA的特异性表现在碱基种类和(AT)/(GC)的比例上 解析：本题考查了基因工程的操作工具和遗传变异的知识。
6、处的碱基缺失导致基因结构的改变属于基因突变；把此DNA放在含15N的培养液中复制两代，形成4个DNA分子，每个DNA分子都含有15N；DNA分子特定的碱基排列顺序决定了DNA分子的特异性。解旋酶在DNA分子复制过程中使扭在一起的两条脱氧核苷酸长链解开，暴露出相应的碱基。LDAYtRyKfE 答案：A 6基因工程中，用“鸟枪法”获得的真核细胞的基因中因含有不能表达的DNA片段而不能直接用于基因的扩增与表达。因此在获取真核细胞的基因时，一般用人工合成基因的方法，下图便是一条重要的途径。下列叙述正确的是()Zzz6ZB2Ltk 已知的蛋白质的氨基酸序列 mRNA的碱基序列 DNA序列 人工合成基因
7、A过程前后两种物质的种类是一一对应的 B过程前后两种物质的种类是一一对应的 C过程和过程前后两种物质的种类都是一一对应的 D过程和过程前后两种物质的种类都不是一一对应的 解析：本题考查目的基因的获取方法和识图能力。从图中可以看出过程表示的是逆转录过程，其过程遵循严格的碱基互补配对关系，所以过程前后两种物质的种类是一一对应的；过程表示用已知蛋白质的氨基酸序列推知mRNA的碱基序列，其中一种氨基酸可以由多个密码子来决定，所以过程前后两种物质的种类不是一一对应的。dvzfvkwMI1 答案：B 7下列关于基因表达载体的构建描述错误的是() A基因表达载体的构建是基因工程的核心 B基因表达载体的构建包
8、括目的基因、启动子、终止子、标记基因等部分 C目的基因就是指编码蛋白质的结构基因 D构建的基因表达载体都是相同的 解析：本题综合考查了基因表达载体构建的基础知识，包括基因表达载体构建在基因工程中的地位、结构组成、不同生物的基因表达载体的不同等。基因表达载体的构建是基因工程的第二步，也是基因工程的核心；一个基因表达载体的组成除目的基因外还有启动子、终止子、标记基因等部分；由于受体细胞不同，基因表达载体的构建也会有差别，不可能千篇一律。rqyn14ZNXI 答案：D 8下列关于目的基因导入受体细胞的描述不正确的是() A基因枪法导入植物体细胞的方法比较经济有效 B显微注射技术是转基因动物中采用最多
9、的方法 C大肠杆菌最常用的转化方法是：使细胞的生理状态发生改变 D农杆菌转化法是将目的基因导入植物细胞最常用的方法 解析：本题综合考查了将目的基因导入细胞的方法。不同生物目的基因导入的方法不同，每种方法都有利有弊。目的基因导入植物细胞常用的方法是农杆菌转化法，该方法比较经济有效，还有基因枪法和花粉管通道法；目的基因导入动物细胞常用的方法是显微注射法；大肠杆菌细胞最常用的转化方法就是用钙离子处理细胞，使细胞的生理状态发生改变，完成转化过程。EmxvxOtOco 答案：A 9下列关于基因工程操作步骤的叙述，错误的是() A用“鸟枪法”提取目的基因的过程需发生碱基互补配对 B两种DNA黏性末端的黏合
10、完全是通过碱基互补配对实现的 C目的基因导入受体细胞过程不发生碱基互补配对 D目的基因表达过程要发生碱基互补配对 解析：本题考查基因工程基本操作步骤。在基因工程操作过程中，将目的基因和运载体的黏性末端连接在一起是利用DNA连接酶。SixE2yXPq5 答案：B 10下列有关基因工程技术的正确叙述是() ADNA重组技术所用的工具酶是限制酶、DNA连接酶和运载体 B所有的限制酶都只能识别同一种特定的核苷酸序列 C选用细菌作为重组质粒的受体细胞是因为细菌繁殖快 D只要目的基因进入了受体细胞就能成功实现表达 解析：本题考查基因工程的操作步骤和操作工具。基因操作的工具酶有限制酶、DNA连接酶，运载体是
11、基因工程中的运输工具；一种限制酶只能识别特定的核苷酸序列；目的基因进入受体细胞后，受体细胞表现出特定的性状，才说明目的基因完成了表达，基因工程的结果是让目的基因完成表达，生产出目的基因的产物；选择受体细胞的重要条件就是能够快速繁殖。6ewMyirQFL 答案：C 11采用基因工程技术将人凝血因子基因导入山羊受精卵，培育出了转基因羊。但是，人凝血因子只存在于该转基因羊的乳汁中。以下有关叙述正确的是()kavU42VRUs A人体细胞中凝血因子基因编码区的碱基对数目，等于凝血因子氨基酸数目的3倍 B可用显微注射技术将含有人凝血因子基因的重组DNA分子导入羊的受精卵 C在该转基因羊中，人凝血因子基因
12、存在于乳腺细胞，而不存在于其他体细胞中 D人凝血因子基因开始转录后，DNA连接酶以DNA分子的一条链为模板合成mRNA 解析：在人体细胞中凝血因子编码区既有内含子，也有外显子，内含子不能决定氨基酸，所以凝血因子编码区的碱基对数目要大于凝血因子氨基酸数目的3倍。多细胞生物的个体发育起点为受精卵，经有丝分裂形成一个完整的个体，所以转基因羊中，人凝血因子基因不仅存在于乳腺细胞中，其他体细胞中也有，只是没有表达。人凝血因子基因开始转录后，以DNA分子的一条链为模板，合成mRNA，在这一过程中用的是RNA聚合酶，而不是DNA连接酶。y6v3ALoS89 答案：B 12我国科学家运用基因工程技术，将苏云金
13、芽孢杆菌的抗虫基因导入棉花细胞并成功表达，培育出了抗虫棉。下列叙述不正确的是()M2ub6vSTnP A基因非编码区对于抗虫基因在棉花细胞中的表达不可缺少 B重组DNA分子中增加一个碱基对，不一定导致毒蛋白的毒性丧失 C抗虫棉的抗虫基因可通过花粉传递至近缘物种，从而造成基因污染 D转基因棉花是否具有抗虫特性是通过检测棉花对抗生素抗性来确定的 解析：非编码区虽然不能编码蛋白质，但是对于遗传信息的表达是不可缺少的。非编码区增加一个碱基对不一定导致毒蛋白的毒性丧失，因为非编码区不能编码蛋白质。转基因棉花是否具有抗虫特性是通过让棉红铃虫来食用棉花的叶片来检测的，检测棉花对抗生素抗性是来确定目的基因是否
14、进入到了受体细胞。抗生素的检测和抗虫特性的检测目的是不同的。0YujCfmUCw 答案：D 二、简答题(共40分) 13(10分)1997年，科学家将动物体内的能够合成胰岛素的基因与大肠杆菌的DNA分子重组，并且在大肠杆菌中表达成功。请据下图回答问题。eUts8ZQVRd (1)此图表示的是采取_合成基因的方法获取_基因的过程。 (2)图中DNA是以_为模板，形成单链DNA，在酶的作用下合成双链DNA，从而获得了所需要的目的基因。sQsAEJkW5T (3)图中代表_，它往往含_基因，以便对目的基因的检测。 (4)图中表示_，为使此过程顺利进行，一般需将大肠杆菌用_处理，以增大其细胞壁的_。GMsIasNXkA (5)图中表示_随大肠杆菌的繁殖而进行增殖，此目的基因在大肠杆菌内表达的标志是_。TIrRGchYzg 解析：从图中可以看出目的基因的获
